B*g
2 楼
搞ADV degree请愿发100伪币
h*0
3 楼
大佛顶首楞严经大势至菩萨念佛圆通章
唐天竺沙门般刺密谛译
大势至法王子,与其同伦五十二菩萨,即从座起,顶礼佛足,而白佛言:
我忆往昔恒河沙劫,有佛出世,名无量光。十二如来,相继一劫。其最后佛,名超日月
光,彼佛教我念佛三昧。譬如有人,一专为忆,一人专忘,如是二人,若逢不逢,或见
非见。二人相忆,二忆念深,如是乃至从生至生,同于形影,不相乖异。十方如来,怜
念众生,如母忆子。若子逃逝,虽忆何为?子若忆母,如母忆时,母子历生,不相违远
。若众生心,忆佛念佛,现前当来,必定见佛,去佛不远。不假方便,自得心开。如染
香人,身有香气,此则名曰香光庄严。我本因地,以念佛心,入无生忍。今于此界,摄
念佛人,归于净土。佛问圆通,我无选择。都摄六根,净念相继,得三摩地,斯为第一。
清凉书屋标点
报恩斋——净土专页 s****[email protected] 1999-2003年
唐天竺沙门般刺密谛译
大势至法王子,与其同伦五十二菩萨,即从座起,顶礼佛足,而白佛言:
我忆往昔恒河沙劫,有佛出世,名无量光。十二如来,相继一劫。其最后佛,名超日月
光,彼佛教我念佛三昧。譬如有人,一专为忆,一人专忘,如是二人,若逢不逢,或见
非见。二人相忆,二忆念深,如是乃至从生至生,同于形影,不相乖异。十方如来,怜
念众生,如母忆子。若子逃逝,虽忆何为?子若忆母,如母忆时,母子历生,不相违远
。若众生心,忆佛念佛,现前当来,必定见佛,去佛不远。不假方便,自得心开。如染
香人,身有香气,此则名曰香光庄严。我本因地,以念佛心,入无生忍。今于此界,摄
念佛人,归于净土。佛问圆通,我无选择。都摄六根,净念相继,得三摩地,斯为第一。
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N*w
4 楼
http://www.engadget.com/2010/06/01/vias-wondermedia-decorates-computex-with-arm-9-powered-android/
看起来不错
配置不详
VIA 自己做 ARM CPU,所以成本估计又可以便宜几毛钱。。
看起来不错
配置不详
VIA 自己做 ARM CPU,所以成本估计又可以便宜几毛钱。。
n*n
6 楼
我希望纯化Bacteroides里面的galactosidase, 从来没有做过这种实验。看到很多人
都用his-
tag做,我有个问题,加这个his-tag会对酶活性有影响吗? 有没有可能在E.coli里表
达出来的酶没
有活性? 如果出现这种情况,有什么其他方法可以解决呢?其他的纯化方法会有区别
吗?
有没有可能我就在Bacteroides里面表达his-tag的酶,然后纯化?
多谢多谢!!
都用his-
tag做,我有个问题,加这个his-tag会对酶活性有影响吗? 有没有可能在E.coli里表
达出来的酶没
有活性? 如果出现这种情况,有什么其他方法可以解决呢?其他的纯化方法会有区别
吗?
有没有可能我就在Bacteroides里面表达his-tag的酶,然后纯化?
多谢多谢!!
m*i
7 楼
2.
23kg/each
23kg/each
s*n
9 楼
一般来讲加一个His tag对酶活性影响不大,但可能有个别例子例外。你可以在His tag
和你的蛋白之间加6-10个aa,可以减少对目的蛋白的影响,同时方便纯化。
你可以在所需要的host里表达带His tag的蛋白,前提是你有其遗传系统。但我觉得你
可以先试试E. coli的,毕竟有成熟的表达体系,如果实在不行再试试同源表达。
和你的蛋白之间加6-10个aa,可以减少对目的蛋白的影响,同时方便纯化。
你可以在所需要的host里表达带His tag的蛋白,前提是你有其遗传系统。但我觉得你
可以先试试E. coli的,毕竟有成熟的表达体系,如果实在不行再试试同源表达。
w*r
11 楼
你可以在his tag和你的protein之间加一个Thrombin或者某个protease(比如3C)的切
点,
纯化好之后可以把tag切掉。
不过有时候有些蛋白在Ecoli表达很差甚至不溶,可以在his tag之前再放一个Trx帮助
蛋白表达,表达好之后所有的tag都可以再切掉的。
【在 n****n 的大作中提到】
: 我希望纯化Bacteroides里面的galactosidase, 从来没有做过这种实验。看到很多人
: 都用his-
: tag做,我有个问题,加这个his-tag会对酶活性有影响吗? 有没有可能在E.coli里表
: 达出来的酶没
: 有活性? 如果出现这种情况,有什么其他方法可以解决呢?其他的纯化方法会有区别
: 吗?
: 有没有可能我就在Bacteroides里面表达his-tag的酶,然后纯化?
: 多谢多谢!!
点,
纯化好之后可以把tag切掉。
不过有时候有些蛋白在Ecoli表达很差甚至不溶,可以在his tag之前再放一个Trx帮助
蛋白表达,表达好之后所有的tag都可以再切掉的。
【在 n****n 的大作中提到】
: 我希望纯化Bacteroides里面的galactosidase, 从来没有做过这种实验。看到很多人
: 都用his-
: tag做,我有个问题,加这个his-tag会对酶活性有影响吗? 有没有可能在E.coli里表
: 达出来的酶没
: 有活性? 如果出现这种情况,有什么其他方法可以解决呢?其他的纯化方法会有区别
: 吗?
: 有没有可能我就在Bacteroides里面表达his-tag的酶,然后纯化?
: 多谢多谢!!
a*n
14 楼
thanks, and support
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