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请问两个southern blot 的问题

请问两个southern blot 的问题# Biology - 生物学

c*i2012-12-04 08:12

1 楼

最近OPT快过期，可是还没找到工作。
考虑转到F2,理论上如果有公司要我，并且帮我申请H1B，即使是F2也是可行的吧？
但是就不知道这种情况多吗？公司应该不愿意等我那么长时间，给我申请H1B吧。
难道只有再申请转回F1一条路了吗？
谢谢

w*y2012-12-04 08:12

2 楼

我试过好几种方法，都无法清洁到让自己满意

b*r2012-12-04 08:12

3 楼

被朋友的猫猫抓伤了，是只几个月大的小猫，朋友刚买的，他也不知道打过什么疫苗
没有。应该怎么处理？
谢谢

c*u2012-12-04 08:12

4 楼

transgenic mouse southern blot, 做了几个星期了还没出来,首要的问题如图，坑爹
的genomic DNA 用HindIII切了24个小时，60v 跑了6个小时，就给我跑成这副鬼样子，
大家提DNA，溶DNA，切，跑胶有什么trick没？还有一个问题是，我的目标条带有
10kb，DIG probe, 我老板说10kb太大了，2-5kb最好，那我这种情况有可能成不？
真心求教，酌情发包子，谢谢。

S*I2012-12-04 08:12

5 楼

可行
不多，但有；如果H-1B正好有配额，办个加急，等15个工作日就能上班了，公司不至于
连15天都等不了吧。

【在 c********i 的大作中提到】

: 最近OPT快过期，可是还没找到工作。
: 考虑转到F2,理论上如果有公司要我，并且帮我申请H1B，即使是F2也是可行的吧？
: 但是就不知道这种情况多吗？公司应该不愿意等我那么长时间，给我申请H1B吧。
: 难道只有再申请转回F1一条路了吗？
: 谢谢

g*92012-12-04 08:12

6 楼

What kind of 油 are you talking about?
I just wipe it down with some dish liquid every time after I finish cooking,
so far everything is as clean as new.

【在 w*********y 的大作中提到】

: 我试过好几种方法，都无法清洁到让自己满意

q*u2012-12-04 08:12

7 楼

按普通擦伤划伤处理即可

【在 b******r 的大作中提到】

: 被朋友的猫猫抓伤了，是只几个月大的小猫，朋友刚买的，他也不知道打过什么疫苗
: 没有。应该怎么处理？
: 谢谢

s*r2012-12-04 08:12

8 楼

southern这种实验耗时长，步骤多，加上DIG本身信号就比同位素弱，真心坑爹。新手
的话能搞的死去活来，我前段时间自己也是试了两次都没成功，实在不想伺候了，最后
以一顿buffet的代价请lab里一老手postdoc做的。。

e*r2012-12-04 08:12

9 楼

配额如果没了就有问题了

【在 S**I 的大作中提到】

:
: 可行
: 不多，但有；如果H-1B正好有配额，办个加急，等15个工作日就能上班了，公司不至于
: 连15天都等不了吧。

c*l2012-12-04 08:12

10 楼

409

a*82012-12-04 08:12

11 楼

You can see your wells has strong signal. DNA digestion is not complete.
HindIII is NOT a good enzyme for southern. try other enzyme and then trouble
shoot other conditions. Good luck.
Your marker is good, I guess that you also labeled a small amount of marker,
which is good.

b*l2012-12-04 08:12

12 楼

每天擦，而且最好炉子没凉的时候用洗碗剂和scotch pad擦。很容易。不过可能我用的
油烟不大。而且记住，炒锅外面要擦干净。

【在 w*********y 的大作中提到】

: 我试过好几种方法，都无法清洁到让自己满意

d*h2012-12-04 08:12

13 楼

DNA提的不纯，酶切的不完全，你图中都有明显带痕了
你如果样品个数少，建议你跑大孔胶，过夜跑，放低电压，跑出来的片子好看
用同位素做，不要用地高辛，那个和同位素做的片子没法比
以我的经验看的话，跑成这样，同位素都足够做出漂亮片子了。

g*92012-12-04 08:12

14 楼

1. change to P38.
2. wash it a little bit longer.
This result seems to be promising.
good luck.

【在 c********u 的大作中提到】

: transgenic mouse southern blot, 做了几个星期了还没出来,首要的问题如图，坑爹
: 的genomic DNA 用HindIII切了24个小时，60v 跑了6个小时，就给我跑成这副鬼样子，
: 大家提DNA，溶DNA，切，跑胶有什么trick没？还有一个问题是，我的目标条带有
: 10kb，DIG probe, 我老板说10kb太大了，2-5kb最好，那我这种情况有可能成不？
: 真心求教，酌情发包子，谢谢。