s*o
2 楼
如题
i*i
3 楼
主板自带声卡。。。还没开机箱怕把warranty废了。
机箱前面耳机口有声音,后面没有。
显卡HDMI不能传声音,blue tooth可以和音箱pair,但是没有声音。
如果把声卡disable, HDMI和Bluetooth 恢复正常,当然耳机口就不work了。。。
抓耳挠腮求解。。。
机箱前面耳机口有声音,后面没有。
显卡HDMI不能传声音,blue tooth可以和音箱pair,但是没有声音。
如果把声卡disable, HDMI和Bluetooth 恢复正常,当然耳机口就不work了。。。
抓耳挠腮求解。。。
s*g
4 楼
最近接手个project.
已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
验?
3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
行。
谢谢!
已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
验?
3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
行。
谢谢!
m*D
7 楼
你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。
白。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
: 2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
: 验?
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢!
钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。
白。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
: 2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
: 验?
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢!
l*s
8 楼
韩国酱油
s*l
11 楼
万家香淡酱油。一直想换没找到合适的。谁给推荐个好的淡酱油?
s*g
13 楼
Doxycycline hyclate
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。
f*4
14 楼
酱青用万字的,老抽用金兰的。以前老抽用珠江桥,后来看到一帖说是兑的就没用了。
去亚洲超市买酱油,最恨标签全是soya sauce而不区别老抽生抽。
韩国酱油没有用过,不知道好吗
去亚洲超市买酱油,最恨标签全是soya sauce而不区别老抽生抽。
韩国酱油没有用过,不知道好吗
m*D
16 楼
We bought D9891-5g, made water solution at 10 mg/ml, and filtered through 0.
22 um before adding into medium.
【在 s*****g 的大作中提到】
: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!
22 um before adding into medium.
【在 s*****g 的大作中提到】
: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!
B*n
17 楼
我都用李锦记,只是因为在纽约有公司,比较放心点进货渠道
s*g
19 楼
非常感谢。昨天我根据你的建议,上网查,没有舍得买他们的液体,定了D9891-1g, 看
来我订对了!
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶,我也用水溶,这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了!
另外,母液存放的多少度?-20C还是4C? 谢谢!
来我订对了!
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶,我也用水溶,这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了!
另外,母液存放的多少度?-20C还是4C? 谢谢!
m*D
22 楼
Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.
p*y
23 楼
李锦记
s*g
25 楼
你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时,是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中?
DOX如果处理一周,细胞会死亡么?
针对你们的细胞,DOX的浓度是多少?
谢谢!
【在 m*********D 的大作中提到】
: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.
那么再用药物处理细胞时,是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中?
DOX如果处理一周,细胞会死亡么?
针对你们的细胞,DOX的浓度是多少?
谢谢!
【在 m*********D 的大作中提到】
: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.
l*h
26 楼
李锦记
m*D
28 楼
Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.
k*0
30 楼
你肯定?比如游戏是5.1 杜比数码的,你的声卡无法解码自然也无法送信号去receiver
[在 a9 (嗯) 的大作中提到:]
:杜比数码解码的任务在家庭影院,好声卡坏声卡都一样的
[在 a9 (嗯) 的大作中提到:]
:杜比数码解码的任务在家庭影院,好声卡坏声卡都一样的
s*g
31 楼
非常感谢赐教!
等订货一来,就要开工了!
等订货一来,就要开工了!
t*7
32 楼
李锦记鲜味生抽、李锦记草菇老抽
偶尔断粮了又没时间去中国超市,就去美国超市买日本酱油KIKKOMAN
偶尔断粮了又没时间去中国超市,就去美国超市买日本酱油KIKKOMAN
s*g
34 楼
最近接手个project.
已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
验?
3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
行。
谢谢!
已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
验?
3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
行。
谢谢!
b*g
35 楼
一直用李锦记的各种酱油,都很好。
搭车问下,李锦记里的蚝油好几个品种,哪种最好吃啊?
搭车问下,李锦记里的蚝油好几个品种,哪种最好吃啊?
m*D
37 楼
你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。
白。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
: 2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
: 验?
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢!
钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。
白。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞,抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么?用什么试剂配母液?
: 2。doxycycline induces多长时间(1天?2天?。。。)才能有反应,从而进行后续试
: 验?
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行,还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢!
s*g
41 楼
Doxycycline hyclate
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 你用tetoff还是teton系统?off系统是shut down transcription,作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统,则要等protein出来,你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。
s*o
42 楼
珠江桥只咸不香
m*D
43 楼
We bought D9891-5g, made water solution at 10 mg/ml, and filtered through 0.
22 um before adding into medium.
【在 s*****g 的大作中提到】
: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!
22 um before adding into medium.
【在 s*****g 的大作中提到】
: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!
s*g
45 楼
非常感谢。昨天我根据你的建议,上网查,没有舍得买他们的液体,定了D9891-1g, 看
来我订对了!
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶,我也用水溶,这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了!
另外,母液存放的多少度?-20C还是4C? 谢谢!
来我订对了!
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶,我也用水溶,这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了!
另外,母液存放的多少度?-20C还是4C? 谢谢!
m*D
47 楼
Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.
s*g
49 楼
你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时,是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中?
DOX如果处理一周,细胞会死亡么?
针对你们的细胞,DOX的浓度是多少?
谢谢!
【在 m*********D 的大作中提到】
: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.
那么再用药物处理细胞时,是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中?
DOX如果处理一周,细胞会死亡么?
针对你们的细胞,DOX的浓度是多少?
谢谢!
【在 m*********D 的大作中提到】
: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.
l*z
50 楼
李锦记-- 锦珍酱油 味极鲜
m*D
51 楼
Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.
s*g
53 楼
非常感谢赐教!
等订货一来,就要开工了!
等订货一来,就要开工了!
s*g
55 楼
我做了浓度梯度3天测试。找出毒性小的最高浓度。做了4 天的处理。
24h DOX Induction, then 3 days Drug treatment with DOX.
至于蛋白量需要WB 检测。但是MTS显示了我预期的结果。显微镜下也看到了细胞形状的
变化(Apoptosis/cell death)。
Negative control and shRNA knockdown 在细胞viability上有着显著的差异!
万分感谢!
24h DOX Induction, then 3 days Drug treatment with DOX.
至于蛋白量需要WB 检测。但是MTS显示了我预期的结果。显微镜下也看到了细胞形状的
变化(Apoptosis/cell death)。
Negative control and shRNA knockdown 在细胞viability上有着显著的差异!
万分感谢!
s*l
60 楼
多年前看报道李锦记酱油二恶英超标的事,后来怎样了?不过估计其它的牌子也保证不
了。
了。
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