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怎样在transgenic mice一个特定的器官里表达一个基因

怎样在transgenic mice一个特定的器官里表达一个基因# Biology - 生物学

s*s2016-06-10 07:06

1 楼

比如说，这个基因在肝脏里面不表达，但是想建立transgenic mouse，让这个基因在肝
脏里能够表达。我的问题是：1）有哪些手段可以选择和那种最有效；2）有哪些公司可
以作。

s*y2016-06-10 07:06

2 楼

最简单的方法就是把那个基因接到一个肝脏特定表达的promoter后，然后直接把这个东
西转到卵细胞里去然后做成老鼠。
这个技术很简单，大部分学校的core facility 都可以做。

【在 s****s 的大作中提到】

: 比如说，这个基因在肝脏里面不表达，但是想建立transgenic mouse，让这个基因在肝
: 脏里能够表达。我的问题是：1）有哪些手段可以选择和那种最有效；2）有哪些公司可
: 以作。

s*s2016-06-10 07:06

3 楼

非常感谢。

【在 s******y 的大作中提到】

: 最简单的方法就是把那个基因接到一个肝脏特定表达的promoter后，然后直接把这个东
: 西转到卵细胞里去然后做成老鼠。
: 这个技术很简单，大部分学校的core facility 都可以做。

H*N2016-06-10 07:06

4 楼

这个直接打卵就行了，没必要转到ESC里面。但前提是你要有好的PROMOTER,因为有的
PROMOTER很长或者不知上界，需要用BAC做。最保险的方法是把你要表达的基因KNOCKIN
到一个在肝脏表达的基因里，这就需要ESC,但要花比较大的EFFORT。理论上CRISPR也可
以做，但目前用CRISPR做KI老鼠效率太低。

【在 s******y 的大作中提到】

s*y2016-06-10 07:06

5 楼

哎呀你说的对。对于这么简单的任务其实刚受精的卵细胞就够了。
不需要开动胚胎干细胞。
肝脏特异的promoter 有好几个很好用的，应该不是问题。

KNOCKIN

【在 H****N 的大作中提到】

: 这个直接打卵就行了，没必要转到ESC里面。但前提是你要有好的PROMOTER,因为有的
: PROMOTER很长或者不知上界，需要用BAC做。最保险的方法是把你要表达的基因KNOCKIN
: 到一个在肝脏表达的基因里，这就需要ESC,但要花比较大的EFFORT。理论上CRISPR也可
: 以做，但目前用CRISPR做KI老鼠效率太低。