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acetone 固定对FITC-dextran有影响吗？
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acetone 固定对FITC-dextran有影响吗？# Biology - 生物学
f*2
1 楼
马上要出发onsite了。在准备西装。
1.我有一套纯蓝色的，一套有点褐色的，穿哪套比较好？我和LD的意见不一致。我倾
向纯蓝色的，觉得比较正式。LD倾向有点褐色的那套，她说蓝色太土，有点褐色好点。
2.出发的时候我打算穿便装。那么在飞机上如何携带西装？
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F*n
2 楼
父母在2013年底汇了一笔款到我银行账号上，2014年初又汇了一笔到我LD账号上。每笔
数额刚好达到3520表的要求，所以需要寄一份纸质3520表到IRS. 填写过程中最大的疑
问就是第一页的foreign trust 和 U.S agent 如何填写。分别是汇款的国内银行以及
美国这边的接收银行吗? 还有我LD是今年初收到的汇款，也要在今年的报税截止日前寄
出3520表吗？ 万分感谢！
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t*r
3 楼
是么
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
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h*g
4 楼
测肿瘤血管的渗透性。sacrifice老鼠前2小时iv注射FITC-dextran，取肿瘤块OCT
frozen. 然后切成5um的切片，用acetone固定。
但是只能看到很少的大血管有荧光，绝大部分cd31（血管内皮marker）阳性的地方都没
看到dextran阳性。
想来想去也不知道哪出错了。是不是用acetone固定对FITC-dextran有影响，或者我切
片固定的过程中没注意避光？
哪位有经验的给说说？
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M*n
5 楼
这跟专业有关系。
science的，着装根本不重要。随便你怎么穿
西装应该有袋子和衣架吧，carry on 人家不会管你的。俺见到过多次了。

【在 f******2 的大作中提到】
: 马上要出发onsite了。在准备西装。
: 1.我有一套纯蓝色的，一套有点褐色的，穿哪套比较好？我和LD的意见不一致。我倾
: 向纯蓝色的，觉得比较正式。LD倾向有点褐色的那套，她说蓝色太土，有点褐色好点。
: 2.出发的时候我打算穿便装。那么在飞机上如何携带西装？
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j*c
6 楼
刚发现3520没法e-file
我可以把其他税表e-file，然后再手填3520邮寄给IRS吗？
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L*s
7 楼
Python库以 类BSD 居多，绝大多数场景可以规避GPL库，不必被强制开源

【在 t**r 的大作中提到】
: 是么
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
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s*y
8 楼
I suggest you to use other fixation methods, because acetone likely washed
out the FITC-dextran.

【在 h****g 的大作中提到】
: 测肿瘤血管的渗透性。sacrifice老鼠前2小时iv注射FITC-dextran，取肿瘤块OCT
: frozen. 然后切成5um的切片，用acetone固定。
: 但是只能看到很少的大血管有荧光，绝大部分cd31（血管内皮marker）阳性的地方都没
: 看到dextran阳性。
: 想来想去也不知道哪出错了。是不是用acetone固定对FITC-dextran有影响，或者我切
: 片固定的过程中没注意避光？
: 哪位有经验的给说说？
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t*t
9 楼
褐色是个什么概念？
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h*g
10 楼
Really?
how about PFA?
and do you think I need keep the tissue from light when the tissue is cut
and fixed? Thanks,

【在 s******y 的大作中提到】
: I suggest you to use other fixation methods, because acetone likely washed
: out the FITC-dextran.
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f*2
11 楼
蓝色的类似第一套。褐色的类似第二套。你们说哪套适合一些？

【在 t*******t 的大作中提到】
: 褐色是个什么概念？
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s*y
12 楼
当然是避光比较好。但是其实也没有那么敏感啦！我们平时做抗体的时候只要不对着强
光就没有事。
你用的是Dextran, 应该更加没有事。
PFA应该可以，只要不会破坏细胞膜结构的都可以（不要加detergent!)

【在 h****g 的大作中提到】
: Really?
: how about PFA?
: and do you think I need keep the tissue from light when the tissue is cut
: and fixed? Thanks,
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t*t
13 楼
当然是蓝色的
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h*g
14 楼
为什么要保持细胞膜（endothelial cell 吧）的完整性？ dextran不是通过bind到
endothelial cell 的细胞膜上起作用的吧?
anyway, i will try. thanks,

只要不会破坏细胞膜结构的都可以（不要加detergent!)

【在 s******y 的大作中提到】
: 当然是避光比较好。但是其实也没有那么敏感啦！我们平时做抗体的时候只要不对着强
: 光就没有事。
: 你用的是Dextran, 应该更加没有事。
: PFA应该可以，只要不会破坏细胞膜结构的都可以（不要加detergent!)
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l*a
15 楼
蓝色的漂亮
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h*o
16 楼
我一直都用4%的pfa固定组织，fitc-dextran的荧光保存很好
没试过acetone

【在 h****g 的大作中提到】
: 测肿瘤血管的渗透性。sacrifice老鼠前2小时iv注射FITC-dextran，取肿瘤块OCT
: frozen. 然后切成5um的切片，用acetone固定。
: 但是只能看到很少的大血管有荧光，绝大部分cd31（血管内皮marker）阳性的地方都没
: 看到dextran阳性。
: 想来想去也不知道哪出错了。是不是用acetone固定对FITC-dextran有影响，或者我切
: 片固定的过程中没注意避光？
: 哪位有经验的给说说？
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e*a
17 楼
你要是面试艺术类教授就第二套，其他的还是蓝色吧

【在 f******2 的大作中提到】
: 蓝色的类似第一套。褐色的类似第二套。你们说哪套适合一些？
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s*y
18 楼
Dextran是水溶物，一般是用来看溶液跑到哪里去用的。
如果跑坏了细胞膜结构，那么dextran就会漏出来，然后就被洗掉了。
你当时用的acetone可以很好的沉降蛋白，但是会把细胞膜破坏，所以小血管里面的
信号就全部损失了。

【在 h****g 的大作中提到】
: 为什么要保持细胞膜（endothelial cell 吧）的完整性？ dextran不是通过bind到
: endothelial cell 的细胞膜上起作用的吧?
: anyway, i will try. thanks,
:
: 只要不会破坏细胞膜结构的都可以（不要加detergent!)
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f*2
19 楼
不是艺术类的。谢谢！

【在 e*******a 的大作中提到】
: 你要是面试艺术类教授就第二套，其他的还是蓝色吧
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h*g
20 楼
不同组织处理和固定方式的对FITC-Dextran的影响：
1，tumor tissue-OCT-section-acetone: fail
2, tumor tissue-OCT-section-PFA:fail
3, tumor tissue-PFA-sucrose-OCT-section: work!
看来FITC-dextran 和YFP一样，要用PFA固定，然后再OCT
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r*e
21 楼
blue

【在 f******2 的大作中提到】
: 马上要出发onsite了。在准备西装。
: 1.我有一套纯蓝色的，一套有点褐色的，穿哪套比较好？我和LD的意见不一致。我倾
: 向纯蓝色的，觉得比较正式。LD倾向有点褐色的那套，她说蓝色太土，有点褐色好点。
: 2.出发的时候我打算穿便装。那么在飞机上如何携带西装？
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h*g
22 楼
另外，你一般切多厚来观察FITC-Dextran？ 10um？
还有，最后怎么分析结果呢？是根据像素值大小来分辨哪是血管里的，哪是血管外的?
还是染cd31还判断？
谢谢！！

【在 h*****o 的大作中提到】
: 我一直都用4%的pfa固定组织，fitc-dextran的荧光保存很好
: 没试过acetone
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i*s
23 楼
蓝色的吧

【在 f******2 的大作中提到】
: 马上要出发onsite了。在准备西装。
: 1.我有一套纯蓝色的，一套有点褐色的，穿哪套比较好？我和LD的意见不一致。我倾
: 向纯蓝色的，觉得比较正式。LD倾向有点褐色的那套，她说蓝色太土，有点褐色好点。
: 2.出发的时候我打算穿便装。那么在飞机上如何携带西装？
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a*c
24 楼
Do you have a way to keep dextran while doing permeablization ? I'm researching on this all afternoon.
I'm thinking about using 70kD dextran.

【在 s******y 的大作中提到】
: Dextran是水溶物，一般是用来看溶液跑到哪里去用的。
: 如果跑坏了细胞膜结构，那么dextran就会漏出来，然后就被洗掉了。
: 你当时用的acetone可以很好的沉降蛋白，但是会把细胞膜破坏，所以小血管里面的
: 信号就全部损失了。
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m*4
25 楼
当然蓝色了。蓝色明明比褐色好看庄重。
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f*a
26 楼
blue, black or grey for interviews.
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