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构建ki mice怎样做point mutation最好

构建ki mice怎样做point mutation最好# Biology - 生物学

t*42010-07-21 07:07

1 楼

RT，豁免目前收到I 797C，状态是favorable recommendation，但是国内家人病重，必
须赶回去，目前持J1，ds2019未到期，但是护照签证过期，需要重新提交签证，可以通
过吗？因为已经有了移民倾向递交非移民签证，其实也不打算留美国了，但是国内上班
时间还有一段，目前美国工作需要一段时间处理，主要实在不能回来只好临时找个地方
过度一下，但是美国房租这些不确定留不留，希望有经验的大侠们提供些意见，先谢过
了！

b*t2010-07-21 07:07

2 楼

Zion 和 Bryce 已经被拍烂了。这次的主要目的还是去游玩，也没报什么希望能拍出惊
人之作。这个时间段大概不是太好的拍摄机会。路上看到几个有限的摄影爱好，设备齐
全。这两个公园，的确值得去，亲身体会一下大自然的魅力。
同另一家和租一辆车，路上走走停停不太方便。其实我对路边的高原景色很感兴趣。旁
边的一些小镇，想必有很多故事。希望将来有机会再慢慢走一回。
走之前做了些准备，做为经验，记录一下。
我平时都用CF卡自带的塑料盒，散放在包的口袋了。看了网上的一些评价，买了两个CF
卡盒。每盒可以装4个。收到后，做工的确坚固，但实在是太重了。不实用。四天我没
有用完两个16GB的CF卡。
镜头以18-200为主。路上也用了11-16。其实这种超广角的变形，我个人不是太喜欢。
只是偶尔用用。那个35F1.8的，根本没啥机会用。有个18-50F2.8，丢在行李箱里，一
次也没有用过。
估计顶光逆光的时候，拍个纪念照的机会比较多，就带了一个闪灯。结果一次都没有用
。有几次试了试内闪，因为多数人带眼镜，反光很厉害，废弃。还是自然光拍完靠后期
调。
带了个轻便的三脚架。用了几次，多数是自拍个合影。在外面的时候，拍风景基本用不
上，太阳没落就回来了。和人同行，不好拖的太晚。
电池走之前都充足了电。但还是带了充电器备用。四天用完一组8个AA。装上一组新的
，只用了一点。其实不用外挂电池盒也可以，还轻便很多。充电器一次也没有用。
清洗的基本用具还是要有的。以防万一。我有一次休息的时候，将衣服铺在地上，相机
放在衣服上。结果走的时候，朋友没注意，撩起衣服，相机滚到地上，全是土。我用擦
手的湿纸巾擦干净。镜头上的滤镜和遮光罩都帮了不少忙。遮光罩即使不遮光，也能起
到保护镜头的作用，一定要用。
走之前还买了一套LCD护具，三件。一个是后面的大LCD，和原配的基本一样，只是黑色
边框，挺好。另一个是上面小LCD用的，贴在上面。还有一个小的，贴在取景器上。这
个我原来觉得没必要，现在觉得挺好。取景器的镜片是凹进去的，每次清洗的时候很不
方便。贴上这个后，直接在外面擦一下就可以了。

T*s2010-07-21 07:07

3 楼

接下来的三天都是在忙碌中度过。精灵诗人、刚德和水花轮流在外警戒，防止男爵
的军队突袭。食人魔法师则日以继夜地抄写着通晓语言的卷轴，或者是直接施放在某个
人身上。食人魔从来都缺乏耐心，美食家的兼职也没能给提拉米苏增加哪怕是一勺的耐
心。所以枯燥的工作简直把它折磨得要发疯。可是它是个聪明的食人魔，知道什么事情
最重要，不会为自己的喜好而影响了真正的大事。这些通晓语言的卷轴可以让所有的人
，包括那七名步战骑士，在三天内初步学会本位面的通用语，虽然还会生涩，但这是在
本位面站稳脚跟的第一步。它们的回归之途已被断绝，作为入侵者，一旦失败，那么死
亡就是最好的结局。
提拉米苏不喜欢干活，可是和死亡相比，能够干活就是件幸福的事了。至于枯燥，
聪明的食人魔用美食弥补了自己。他每天的工作就是抄写卷轴，睡觉和吃东西。食人魔
法师和牧师最独到的天赋就在于不用冥想，睡觉就是它们最好的恢复法力办法，效率比
大多数人类法师冥想的效果还要好。
三分熟则是另一种忙碌。他承担了尽可能多的需要力气的活，并且有空就会打制和
修补钢甲与武器。在这方面食人魔再次让他的人类战友们大吃一惊，他手艺之精湛堪比
最熟练的矮人工匠。
工作虽然同样枯燥，但三分熟把这视为锻炼力量的一种手段。力量是食人魔最重要
，也是最引以为傲的天赋属性，更强大的力量不仅意味着攻击力的直接提升，还意味着
更强大的防御，因为可以披上更加厚重的钢甲了。而且随着力量的进步，也会让食人魔
的等级随之提升。食人魔也有斗气，但并不象人类骑士那样依赖斗气。他们强大的力量
总会把战斗变得很简单。三分熟已经感觉到自己距离十一级不远了，特别是这场战斗又
让他前进了一大步。等他真正到了十一级，就可以把重锤从一百公斤换成一百二十公斤
的。到了那时，哪怕是力量型的受封骑士也会被他一锤砸飞，而敏泰爵士或许能挡几下
，但也绝不会愿意和三分熟硬拼力量，???是自取灭亡。
大家都以各自的方式在忙碌着，水花在研究着自己的长刀和新衣服。她执着地喜欢
偏白色的衣裤，却又不喜欢受束缚的感觉，于是自己把裤角撕开，变成类似于裙裤的装
束，这才觉得舒适。而不管什么时候，她总是赤足的，而那双雪白的脚很少会变脏。永
眠指引者是水花另一个研究的东西，这把灰暗的长刀握在她的手里，总有一种让人心悸
的感觉。
而奥拉尔则不断试图接近水花，并且得到她的心。
精灵吟游诗人每天都会为她创新一个新的诗篇，并且献给这个从来没有笑过的少女
。很少看到他练习什么，或许喋喋不休就是吟游诗人的晋级方式，不然实在难以解释他
现在那已晋升到9级的吟游诗人等级是从哪来的。
在两个美丽少女之间，奥拉尔经过短暂的试探，就本能地远离流砂，选择了水花。
他对这个充满了野性的少女简直就是着迷了，而且对于他的恭维、试探甚至是隐晦的求
爱，水花都没有明确地拒绝，甚至有时候似乎还有些鼓励。
对于水花自选的衣服式样，奥拉尔从不吝惜地大加赞叹，对于长刀永眠指引者则是
发出震惊的哀叹。以上都还可以理解，于如此充满野性的绝色少女，无论什么样的衣服
穿上去都是不错的。
至于衣服的具体式样，只要符合轻薄短小露的标准，那就肯定不会错了。
而永眠指引者只要不是瞎子，通过这几天的战斗都可以看出它的绝伦威力。此刀在
手，就连本身实力要更强一筹的刚德都不愿意招惹少女。
但是精灵诗人并不是对水花每个举动都很认同，或者说，是有难以理解的地方。比
如说在他看来，永眠指引者绝对是罕见的附魔兵器，把它用好比什么都重要。可是水花
却用了许多宝贵的时间在摆弄着一把简陋粗糙的钢凿，有时候甚至还会特意地打磨几下。
但是她的打磨并不是把多棱钢锥弄得锋利，而是恰恰相反，是把它弄得更加粗糙。
据她自己说，这样可以增加威力。奥拉尔怎么都想不明白为什么这样会增加威力，可是
看到刚德一脸了然的样子，他就无由的愤怒。
这个野蛮人，居然在不懂装懂！优雅、渊博、富有艺术气息的精灵诗人愤愤地想。
如果说基地中让奥拉尔觉得碍眼的风景，刚德绝对算是一个。这个野蛮人在少女身
边的时间相当的多，而少女也不介意他在旁边，甚至练刀都不避忌着刚德。而另一点让
奥拉尔不满的是，刚德看他的眼神总是显得很诡异，而且目光经常会在他的屁股周围转
来转去。
这种目光让精灵诗人警惕着野蛮人性趣爱好的同时，又勾起了他一些不那么美好的
回忆。
而刚德，每每看到水花在摆弄她那枚多棱钢椎时，也总是觉得下半段脊椎有些发冷
。他忽然觉得，自己应该抽点时间打磨一下自己的大斧，把它磨得锋利些。那把大斧有
些过于粗糙了，都和多棱钢椎差不多了。他还期待着什么时候精灵诗人会忍不住去摸一
把水花的屁股，那样的话，肯定会有一个非常精彩的结局的。
这种情况在死亡训练营发生过不止一次，每次都会是训练营很长一段时间的谈资。
死亡训练营的生活其实非常枯燥乏味，所以所有的人都向往着能够早点离开那个鬼
地方。能够看到一个无知的家伙身心遭受重创，绝对是件赏心悦目的乐事。这类事情多
了，倒霉鬼们做过些什么也就被区分出来。那些勉强能走路，但不敢坐下，只能卧睡的
，就是啥都没摸到的。而真的摸到点啥的，都会变成死人。
李察则是抽出大量时间完善着流砂的构装。在接下来的三天中，李察没有再犯任何
错误，直到魔力增幅顺利完成。就象流砂说的，看多了，也就不再惊艳了。
最终完成的构装，对魔力增幅在21%，已经达到李察预想的上限，在现有情况下不
能要求更多了。据流砂自己估计，这个构装为她带来了额外的一个强效治疗，三个治疗
术和七个微伤治疗。这等于一个步战骑士的一整条命。
流砂能力的提升，也直接提升了这个队伍的战斗力。李察现在对于对付佛萨男爵已
经很有信心。但佛萨说到底，也只是一个公国边缘地区的小领主而已。
三天时间，在充分的休息，足够的食物，以及流砂神术的作用下，所有人的伤势都
已经痊愈，恢复了巅峰的战斗力。而且有三分熟意外的手艺，战士们的盔甲都翻整一新。
是时候做点什么了。

M*t2010-07-21 07:07

4 楼

要做个targeting construct,准备clone一个~15kb的bac片断到retrieval vector，如
何做我们要的那个point mutation最
有效？有经验的同修说说。非常感谢！尽量自己做了，帮老板省点。

x*52010-07-21 07:07

5 楼

Bless, 不清楚你的移民倾向是什么情况，如果只是豁免应该无所谓，你可以继续申请
J1签证，如果是有了明确的移民倾向估计J1就不行了。。。不管怎么祝愿你的家人早日
康复！

s*n2010-07-21 07:07

6 楼

谢谢分享

q*c2010-07-21 07:07

7 楼

干啥啊，只要给母巢升级，什么位面都是补品。
要是我就一头扎进大山里面去，开始攀登虫族科技树的伟大过程。

【在 T*********s 的大作中提到】

: 接下来的三天都是在忙碌中度过。精灵诗人、刚德和水花轮流在外警戒，防止男爵
: 的军队突袭。食人魔法师则日以继夜地抄写着通晓语言的卷轴，或者是直接施放在某个
: 人身上。食人魔从来都缺乏耐心，美食家的兼职也没能给提拉米苏增加哪怕是一勺的耐
: 心。所以枯燥的工作简直把它折磨得要发疯。可是它是个聪明的食人魔，知道什么事情
: 最重要，不会为自己的喜好而影响了真正的大事。这些通晓语言的卷轴可以让所有的人
: ，包括那七名步战骑士，在三天内初步学会本位面的通用语，虽然还会生涩，但这是在
: 本位面站稳脚跟的第一步。它们的回归之途已被断绝，作为入侵者，一旦失败，那么死
: 亡就是最好的结局。
: 提拉米苏不喜欢干活，可是和死亡相比，能够干活就是件幸福的事了。至于枯燥，
: 聪明的食人魔用美食弥补了自己。他每天的工作就是抄写卷轴，睡觉和吃东西。食人魔

i*02010-07-21 07:07

8 楼

retrieval vector? why?

t*42010-07-21 07:07

9 楼

豁免不是属于移民倾向问题吗？我指的就是这个，如果仅仅是豁免也可以继续申请J1那
太好了，多谢！

s*n2010-07-21 07:07

10 楼

我下次要去还是不约人的好。虽然我不一定拍日出日落，但拍片还是需要时间考虑的。
不是摄影同好估计很难理解。

T*s2010-07-21 07:07

11 楼

大山里面资源不够啊

【在 q*c 的大作中提到】

: 干啥啊，只要给母巢升级，什么位面都是补品。
: 要是我就一头扎进大山里面去，开始攀登虫族科技树的伟大过程。

M*t2010-07-21 07:07

12 楼

would you please recommend other feasible strategies? i have absolutely no
background in this field.

z*g2010-07-21 07:07

13 楼

我的理解是，如果你正在豁免，你重新以J1入境，难道不是豁免直接失效吗？
楼主你再问问律师。

s*n2010-07-21 07:07

14 楼

其实你该带个胶片机哈哈

X*n2010-07-21 07:07

15 楼

galK counter selection. google recombineering galK.
http://web.ncifcrf.gov/research/brb/protocol/Protocol3_SW102_galK_v2.pdf

【在 M******t 的大作中提到】

: would you please recommend other feasible strategies? i have absolutely no
: background in this field.

x*22010-07-21 07:07

16 楼

犹他几个公园是拍银河的圣地，拍的人相对少些。楼主去的时间又是黄金时期，不拍有
点可惜。在家里人睡后溜出去也不会影响太多。

【在 b*****t 的大作中提到】

: Zion 和 Bryce 已经被拍烂了。这次的主要目的还是去游玩，也没报什么希望能拍出惊
: 人之作。这个时间段大概不是太好的拍摄机会。路上看到几个有限的摄影爱好，设备齐
: 全。这两个公园，的确值得去，亲身体会一下大自然的魅力。
: 同另一家和租一辆车，路上走走停停不太方便。其实我对路边的高原景色很感兴趣。旁
: 边的一些小镇，想必有很多故事。希望将来有机会再慢慢走一回。
: 走之前做了些准备，做为经验，记录一下。
: 我平时都用CF卡自带的塑料盒，散放在包的口袋了。看了网上的一些评价，买了两个CF
: 卡盒。每盒可以装4个。收到后，做工的确坚固，但实在是太重了。不实用。四天我没
: 有用完两个16GB的CF卡。
: 镜头以18-200为主。路上也用了11-16。其实这种超广角的变形，我个人不是太喜欢。

l*s2010-07-21 07:07

17 楼

是啊，闪光灯，脚架是用的少

b*t2010-07-21 07:07

18 楼

一般最好一个人出去，想停就停，想走就走。我们有孩子，和租一辆车，孩子们在路上
不会枯燥。

【在 s*****n 的大作中提到】

: 我下次要去还是不约人的好。虽然我不一定拍日出日落，但拍片还是需要时间考虑的。
: 不是摄影同好估计很难理解。

b*t2010-07-21 07:07

19 楼

这个最好露营。租的车只有一把钥匙，不在我手里。每天都走4-5个小时，都挺累，就
懒的打扰朋友了。

【在 x*****2 的大作中提到】

: 犹他几个公园是拍银河的圣地，拍的人相对少些。楼主去的时间又是黄金时期，不拍有
: 点可惜。在家里人睡后溜出去也不会影响太多。

b*t2010-07-21 07:07

20 楼

闪光灯估计没啥用。三脚架我还是宁可带上。

【在 l*****s 的大作中提到】

: 是啊，闪光灯，脚架是用的少

t*a2010-07-21 07:07

21 楼

谢谢分享！

CF

【在 b*****t 的大作中提到】

l*g2010-07-21 07:07

22 楼

最爱去拱门公园露营了。不过唯一不适应的就是露营没地方洗澡。
另外，赞分享。然后很同意遮光罩那部分。

【在 b*****t 的大作中提到】

: 这个最好露营。租的车只有一把钥匙，不在我手里。每天都走4-5个小时，都挺累，就
: 懒的打扰朋友了。

b*t2010-07-21 07:07

23 楼

你要求太高。露营还要洗澡。
再分享个秘诀。野外的时候，清晨起来牙涮干净就好了，不要洗脸。。洗脸的话，出去
一天对皮肤很伤。回来后，睡前洗干净就好。

【在 l******g 的大作中提到】

: 最爱去拱门公园露营了。不过唯一不适应的就是露营没地方洗澡。
: 另外，赞分享。然后很同意遮光罩那部分。