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怎么GENOTYPE HOMOZYGOTE tg MICE
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怎么GENOTYPE HOMOZYGOTE tg MICE# Biology - 生物学
l*o
1
丈夫最近刚成公民,我找到博后,马上要去j1 面签。结婚3年左右了,一直两地中,我
从未去过美国。
请问,我这种情况j1面签有问题吗?要注意些什么?多谢!
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P*e
2
是有情节的,本来以为是子子孙孙无穷尽地打boss,原来拿到infinity sword之后是可以通关的。。。
作为tablet上的游戏是做得很不错了,回去继续玩我的Metal Gear
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a*g
3
想GENERATE HOMOZYGOTE的TG MICE, 请问怎么可以GENOTYPING啊,用QPCR可靠吗?需
要用TAQMAN还是普通QPCR就可以了?多谢!
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r*y
4
拿到了还没完。。。。

可以通关的。。。

【在 P****e 的大作中提到】
: 是有情节的,本来以为是子子孙孙无穷尽地打boss,原来拿到infinity sword之后是可以通关的。。。
: 作为tablet上的游戏是做得很不错了,回去继续玩我的Metal Gear

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R*n
5
Taqman吧,Gold standard
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a*g
6
多谢!普通SYBR GREEN不行吗?

【在 R****n 的大作中提到】
: Taqman吧,Gold standard
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S*s
7
这个难度比较高。你知道 transgene 插入在基因组的位置么?如果知道的话设计
Primer 扩充相应位置就行了。好奇的问一句,你为什么要 homozygous tg mice?

【在 a*******g 的大作中提到】
: 想GENERATE HOMOZYGOTE的TG MICE, 请问怎么可以GENOTYPING啊,用QPCR可靠吗?需
: 要用TAQMAN还是普通QPCR就可以了?多谢!

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R*n
8
syber green原理是用allele specific PCR吧,一个primer 3'端用来区分phenotype.
我没做过不太清楚效果。还有什么和ligation结合的,HRM的。你说的太笼统了。
Taqman是用probe,两边一个dye一个quencher,不同的sequence dye不一样,一管PCR搞
定。这个基本上是业界的标准方法

【在 a*******g 的大作中提到】
: 多谢!普通SYBR GREEN不行吗?
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c*r
10
sybr green也可以,但是需要分开跑。
sybr green是个non-specific的DNA double strain dye.就是说,只要是PCR产物都可
以stain。所以没法用multiplex reation做internal control。
如果用taqman,pcr效率不错的话,可以设计两对primers,一对测你的target
sequence,一对做个其他随便什么基因的sequence。分别用不同的颜色标记。这样在一
个样品里跑两个pcr。如果如果target sequence是control的50%(一般给+-20%的误差
)就是single copy。如果和control一样(也是20%误差)就是two copies。
如果你的primers设计比较好,两对的amplification efficiency非常接近,那么可以
直接用ct数来计算二者的关系。但是如果两对primers的效率相差比较多,那么只能每
次都分别给两个primer做standard curve。这样保证二者的定量可比,也是可以的。就
是麻烦点。

【在 a*******g 的大作中提到】
: 多谢!普通SYBR GREEN不行吗?
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