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土问：怎样提高two Oligo ligation的效率？

土问：怎样提高two Oligo ligation的效率？# Biology - 生物学

b*t2010-11-29 08:11

1 楼

最近美国股市比较动荡，对此我个人有一些看法，和大家分享一下：
1. 关于两房的收归国家问题，我觉得阿宝的做法是对的，但是可能有点晚了。这
个政策远远不足以让房市见底，只是避免了两个房贷公司的倒闭让事情变得更不可收拾
而已。真正的底我们不可能现在就预测的出来，什么明年下半年后年上半年纯属胡说
八道。银行和建商的股价就目前来说还是偏高的，一个未来渺茫并且赔钱的股票你说
应该值多少钱？
2. 关于原材料的回落，我认为最近的市场是处在一个回调过度的状态。也许是因
为先前有太多小型闲散资金参与炒作，稍有风吹草动大家一起扯呼，造成了这么一个
恐慌的局面。其实长久来看，现在是一个很好的买入的时候；
3. 关于美元的强弱，美元现在已经不单单是美元了，美元现在就是人民币，人民
币就是美元，如果谁还搞不清楚这个问题，我觉得对于国际货币的认识还需要再加强。
美元的强是表，人民币的强是本，如果现在让人民币和美元的汇率脱钩的话，你想想
会有什么事情发生。长期来看，美元不可能强到哪里去，因为一个过度消费和负债累
累的国家是不可能有一个强势的货币的。最近两房的收购居然能让美元

w*e2010-11-29 08:11

2 楼

要ligate two short ss oligos （~80 base for one, 10-30 base for the other)，
有可能达到高效率吗（比如至少20％）？隐约记得可以用complementary sequence
作为guide来提高效率，不知有没有现成的protocol？请牛人指点。多谢！

w*e2010-11-29 08:11

3 楼

ding~

【在 w******e 的大作中提到】

: 要ligate two short ss oligos （~80 base for one, 10-30 base for the other)，
: 有可能达到高效率吗（比如至少20％）？隐约记得可以用complementary sequence
: 作为guide来提高效率，不知有没有现成的protocol？请牛人指点。多谢！

D*g2010-11-29 08:11

4 楼

why?

T*t2010-11-29 08:11

5 楼

有，叫splinted ligation。
因为T4 DNA ligase的功能是特异性修复双链DNA上的nick。所以需要设计一个splint
oligo，和你需要ligate的两个oligo的两端各自互补。像这样：
图里显示的是连接RNA，不过DNA也是一样的。
这个protocol在这里：
http://www.megaupload.com/?d=QT50D23R
[7] Joining of RNAs by splinted ligation
Melissa J. Moore and Charles C. Query
Methods in Enzymology
Volume 317, 2000, Pages 109-123
RNA - Ligand Interactions, Part A

w*e2010-11-29 08:11

6 楼

thx a lot, dawg~

【在 T**********t 的大作中提到】

: 有，叫splinted ligation。
: 因为T4 DNA ligase的功能是特异性修复双链DNA上的nick。所以需要设计一个splint
: oligo，和你需要ligate的两个oligo的两端各自互补。像这样：
: 图里显示的是连接RNA，不过DNA也是一样的。
: 这个protocol在这里：
: http://www.megaupload.com/?d=QT50D23R
: [7] Joining of RNAs by splinted ligation
: Melissa J. Moore and Charles C. Query
: Methods in Enzymology
: Volume 317, 2000, Pages 109-123