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求推荐BAC purification kit

求推荐BAC purification kit# Biology - 生物学

m*92010-12-02 08:12

1 楼

fresh phd, engineering, 刚拿到一个offer，大家能不能给我指导一下多少base
salary比较合适啊，我用来去和HR argue。还有一个人的话消费一个月大概在多少啊？
没有去过CA的说。

w*g2010-12-02 08:12

2 楼

刚才联系机票代理给父母买票，结果发现票价差200块钱，明显是两种价格区间，贵的那
家说什么也降不到最便宜的，声称，那些便宜的票是高返点的，即使出票之后也有可能
被取消的。但我联系便宜票的代理，他们说，他们出票是直接从国航出，不会有这种情
况，除非航班取消。
我之所以犹豫是因为之前在贵的那家买过票，当时又便宜服务又好，所以还想用她。但
是否现在机票还有这种所谓高返点（高风险？）的情况，大家可以交流一下。谢谢！

m*h2010-12-02 08:12

3 楼

妈妈顺利到家了。
希望这个月我和我家那位顺顺利利！！！
发20个包子~

T*72010-12-02 08:12

4 楼

比如zookeeper, 比如vert.x
request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text"
).end();
这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.

V*F2010-12-02 08:12

5 楼

大家有没有好用的抽BAC的kit？
多谢！

j*j2010-12-02 08:12

6 楼

90K-110K. 看专业＆水平了。
消费人＆人差别太大，不好说。

【在 m********9 的大作中提到】

: fresh phd, engineering, 刚拿到一个offer，大家能不能给我指导一下多少base
: salary比较合适啊，我用来去和HR argue。还有一个人的话消费一个月大概在多少啊？
: 没有去过CA的说。

a*n2010-12-02 08:12

7 楼

你去travel问问吧，那里对机票懂的牛人多

的那

【在 w*****g 的大作中提到】

: 刚才联系机票代理给父母买票，结果发现票价差200块钱，明显是两种价格区间，贵的那
: 家说什么也降不到最便宜的，声称，那些便宜的票是高返点的，即使出票之后也有可能
: 被取消的。但我联系便宜票的代理，他们说，他们出票是直接从国航出，不会有这种情
: 况，除非航班取消。
: 我之所以犹豫是因为之前在贵的那家买过票，当时又便宜服务又好，所以还想用她。但
: 是否现在机票还有这种所谓高返点（高风险？）的情况，大家可以交流一下。谢谢！

j*n2010-12-02 08:12

8 楼

祝福~~~~~mua~~

z*e2010-12-02 08:12

9 楼

request
.response()
.putHeader("Content-Type", "text/plain")
.write("some text")
.end();
写成这样就好了
如果你想看log的话
用aop，直接设置pointcut = abc.com.ClassName.*
这样每次调用method/func的时候
都会被拦截，然后你在log中就会看到
类似
method name = response
method name = putHeader, parameter0 = Content-Type:String...
method name = write, parameter0 = "some text":String
method name = end
酱紫，看你自己怎么设置log了

l*n2010-12-02 08:12

10 楼

Qiagen plasmid Midi

b*y2010-12-02 08:12

11 楼

how much did you get?

【在 m********9 的大作中提到】

a*u2010-12-02 08:12

12 楼

bless~~

c*e2010-12-02 08:12

13 楼

response一般传json就可以了，client side拿到json之后把它写出来。

text"

【在 T******7 的大作中提到】

: 比如zookeeper, 比如vert.x
: request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text"
: ).end();
: 这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.

t*z2010-12-02 08:12

14 楼

咳，别提了，我半天没抽出多少东西来，试验过QIAGEN Large-Construct Kit，QIAGEN
Plasmid Mini，Invitrogen PureLink HiPure Kit。产量低且不稳定，关键是要做好
心理准备，细菌要好好养，动作要轻，水要热。最后我们直接把含有BAC的细菌株送到
转基因公司去了。他们说可以免费代替我们纯化。

b*u2010-12-02 08:12

15 楼

祝顺~~~
嘛事这么紧张啊？
能说说吗？

d*e2010-12-02 08:12

16 楼

这就是要上Scala的节奏

text"

【在 T******7 的大作中提到】

: 比如zookeeper, 比如vert.x
: request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text"
: ).end();
: 这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.

b*g2010-12-02 08:12

17 楼

Clotech Nucleobond 100
http://www.clontech.com/products/detail.asp?tabno=2&product_id=186802

w*w2010-12-02 08:12

18 楼

恭喜恭喜

l*t2010-12-02 08:12

19 楼

我看java以后直接用scala的spec就可以了

f*42010-12-02 08:12

20 楼

Qiagen plasmid Midi
严格按照上面说的做，效果非常好

【在 V**F 的大作中提到】

: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！

m*h2010-12-02 08:12

21 楼

我妈是回家了。55~

p*p2010-12-02 08:12

22 楼

please google these 3 words: bac qiagen midi. First hit.
I've used the protocol for many Bac clones, routinely get more than 100ug/
50ml culture.

【在 V**F 的大作中提到】

: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！

F*t2010-12-02 08:12

23 楼

一定顺顺利利的！！

b*g2010-12-02 08:12

24 楼

Clotech Nucleobond 100
http://www.clontech.com/products/detail.asp?tabno=2&product_id=186802

m*h2010-12-02 08:12

25 楼

都排着，我睡觉前发，嘎嘎~~

S*s2010-12-02 08:12

26 楼

何必用 Kit，直接 CsCl 纯化吧。产率高很多，而且样品也很纯。我用 Clontech 的
kit 纯化出来的 BAC，如果再 setup CsCl 的话还能看到有很多杂质和 linear DNA。

【在 V**F 的大作中提到】

: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！

i*n2010-12-02 08:12

27 楼

祝顺~~~

j*g2010-12-02 08:12

28 楼

看你的目的了。如果只是为了做PCR的template,那么很简单，Qiagen kit里的p1, p2,
p3buffer加后直接加isopropanol沉淀，再用ethanol洗两次就可以了。保证不会丢。这
个方法可以在CHORI的网站上找到。
我们实验室一般用来打老鼠，这就需要CsCl纯化。虽然步骤挺多，但是做熟了也很简单
。而且质量会好很多。