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one question about agar plate

one question about agar plate# Biology - 生物学

L*e2011-02-20 08:02

1 楼

那英今天倒是一副淑女范，赶脚那英就是在选陪衬人啊，有木有？想起那英陪祖英唱歌
那次了，那是丫鬟陪着小姐出游，今天那英是为了找回一把吧？
汪峰以后千万别再唱现场了，他的歌是个人都比他自己唱得好。不过越来越看不惯张恒
远唱歌的样子，像犯癫痫一样打抖，又像是憋着尿夹着裆在那儿蹦。难道摇滚就要瞎蹦
瞎跳？小梁子那样安安静静地唱不也很有力量吗？
看到金润吉走近四强，然后陪着哈林一起当炮灰，也蛮悲凉的。还是以前说过的，想玩
一把的话找哈林做导师，要有点“追求”的话，要慎重。哈林几次说到“高高兴兴上台
，漂漂亮亮下台，最终都要下台的。”他自己其实早就知道自己这组的结果吧？
虽然阿mei力捧李琦，但是后知后觉这首小李子还是比阿mei差了几条街。四位导师里，
也就阿mei还有当年8成功力。。。

n*w2011-02-20 08:02

2 楼

Hi, I was doing transformation and after plating the culture for overnight
and no colonies grew. And there are many bubbles underneath the agar. Does
anyone have an idea how it happened and how to fix it?
Thank you so much.

d*u2011-02-20 08:02

3 楼

金润吉现在成了四不像，也不知道他的风格是什么了？
假声配上黑人嗓？

【在 L*****e 的大作中提到】

: 那英今天倒是一副淑女范，赶脚那英就是在选陪衬人啊，有木有？想起那英陪祖英唱歌
: 那次了，那是丫鬟陪着小姐出游，今天那英是为了找回一把吧？
: 汪峰以后千万别再唱现场了，他的歌是个人都比他自己唱得好。不过越来越看不惯张恒
: 远唱歌的样子，像犯癫痫一样打抖，又像是憋着尿夹着裆在那儿蹦。难道摇滚就要瞎蹦
: 瞎跳？小梁子那样安安静静地唱不也很有力量吗？
: 看到金润吉走近四强，然后陪着哈林一起当炮灰，也蛮悲凉的。还是以前说过的，想玩
: 一把的话找哈林做导师，要有点“追求”的话，要慎重。哈林几次说到“高高兴兴上台
: ，漂漂亮亮下台，最终都要下台的。”他自己其实早就知道自己这组的结果吧？
: 虽然阿mei力捧李琦，但是后知后觉这首小李子还是比阿mei差了几条街。四位导师里，
: 也就阿mei还有当年8成功力。。。

m*52011-02-20 08:02

4 楼

making a new batch of plates……

t*m2011-02-20 08:02

5 楼

看着张飞机那便秘的样子就烦，满台乱蹦，唯恐别人不知道他是吊丝代言，在唱摇滚。
真不懂汪峰怎么看上这个人
金润吉和哈林应该都不是追名次的人。金润吉找哈林就是想有突破，目前看来他的转变
不讨好，不过他们两个的勇气是值得钦佩的

【在 L*****e 的大作中提到】

n*w2011-02-20 08:02

6 楼

That's what I am doing now.
But I need to have an idea so I can avoid this problem when I make the
plates if it is due to something I didn't pay attention to in that process...
Thanks!

【在 m******5 的大作中提到】

: making a new batch of plates……

d*u2011-02-20 08:02

7 楼

张穿着礼服弹了一段钢琴呢（其实是电子琴）
其实是想颠覆屌丝形象

【在 t*****m 的大作中提到】

: 看着张飞机那便秘的样子就烦，满台乱蹦，唯恐别人不知道他是吊丝代言，在唱摇滚。
: 真不懂汪峰怎么看上这个人
: 金润吉和哈林应该都不是追名次的人。金润吉找哈林就是想有突破，目前看来他的转变
: 不讨好，不过他们两个的勇气是值得钦佩的

L*O2011-02-20 08:02

8 楼

Make sure the antibiotics is correct.
And you can use the burner to get rid of the bubbles...

【在 n***w 的大作中提到】

: Hi, I was doing transformation and after plating the culture for overnight
: and no colonies grew. And there are many bubbles underneath the agar. Does
: anyone have an idea how it happened and how to fix it?
: Thank you so much.

T*t2011-02-20 08:02

9 楼

That's two questions indeed.
That no colonies grew might result from many things. Not the right
antibiotic or not the right amount, or transformation went wrong... You need
to include at least a positive control and negative control each time when
you do transformation in order to troubleshoot.
Air bubbles in the plate usually happen when the media was too cold when
pouring the plates. The LB-Agar solidified before the accidentally trapped
air bubble had the chance to escape. The viscosity of the media also
increases when the temperature drops so air bubbles are more easy to be form
and trapped.

n*w2011-02-20 08:02

10 楼

Thank you.
But I cannot see visible bubbles when I took the plates from 4 degrees.
After incubating at 37 degrees for
some time, they started to appear.
I will double check the antibiotic. Thank you.

need
when
form

【在 T**********t 的大作中提到】

: That's two questions indeed.
: That no colonies grew might result from many things. Not the right
: antibiotic or not the right amount, or transformation went wrong... You need
: to include at least a positive control and negative control each time when
: you do transformation in order to troubleshoot.
: Air bubbles in the plate usually happen when the media was too cold when
: pouring the plates. The LB-Agar solidified before the accidentally trapped
: air bubble had the chance to escape. The viscosity of the media also
: increases when the temperature drops so air bubbles are more easy to be form
: and trapped.

I*h2011-02-20 08:02

11 楼

大家都没回答到点子上，或者看出人家真正的问题
英文都挺溜啊
平板倒好了之后在室温放1-2天再放到4度

【在 n***w 的大作中提到】

: Thank you.
: But I cannot see visible bubbles when I took the plates from 4 degrees.
: After incubating at 37 degrees for
: some time, they started to appear.
: I will double check the antibiotic. Thank you.
:
: need
: when
: form

T*t2011-02-20 08:02

12 楼

哈哈，英文问题我就用英文回答，中文问题就用中文回答了。。。
我实验室太脏，倒完平板之后我都是一凝好就放4度的，顶多过夜。在室温放1-2天万万
不敢，倒是没出现过lz说的那种一开始看不到气泡，incubate一阵之后出现气泡的情况。

【在 I*****h 的大作中提到】

: 大家都没回答到点子上，或者看出人家真正的问题
: 英文都挺溜啊
: 平板倒好了之后在室温放1-2天再放到4度

w*t2011-02-20 08:02

13 楼

平板使用前在常温或者30度放1－2小时，等平板的温度升上来了再放到37度就不会有气
泡了。不过这些气泡不会影响你的转化结果，没有colony的原因很多。

n*w2011-02-20 08:02

14 楼

非常感谢！！

【在 w**t 的大作中提到】

: 平板使用前在常温或者30度放1－2小时，等平板的温度升上来了再放到37度就不会有气
: 泡了。不过这些气泡不会影响你的转化结果，没有colony的原因很多。

y*i2011-02-20 08:02

15 楼

铺板前冷却时要用stur bar搅动（stur bar和LB一起 autoclave).

【在 n***w 的大作中提到】