v*a
2 楼
要克隆一个gene,发现用我自己培养的细胞来PCR扩增时,大部分P不出,少数P得出。
用别人养的相同的细胞,都P不出。凡是P出来的,会有两条靠得很近很近的条带(~1.
5kb)。
然后我就挖了上面的那一条下来,做成plasmid了,测序也都完全正确。
这次要做recombinant protein,所以重新设计了primer(PCR产物很短,只有600多bp
),用上次做的现成的plasmid进行PCR,结果又P出来两条很近的条带。
有点想不通,请教一下大家这是怎么回事呢?
另,做western blot时偶尔也出现靠得很近的条带(忽而又只有一条),没有见过有相
关isoform的报导。
谢谢!
用别人养的相同的细胞,都P不出。凡是P出来的,会有两条靠得很近很近的条带(~1.
5kb)。
然后我就挖了上面的那一条下来,做成plasmid了,测序也都完全正确。
这次要做recombinant protein,所以重新设计了primer(PCR产物很短,只有600多bp
),用上次做的现成的plasmid进行PCR,结果又P出来两条很近的条带。
有点想不通,请教一下大家这是怎么回事呢?
另,做western blot时偶尔也出现靠得很近的条带(忽而又只有一条),没有见过有相
关isoform的报导。
谢谢!
s*r
3 楼
你对开口票的理解比较独特 呵呵
a*d
4 楼
splicing?
l*0
7 楼
韩国的航班以前是改回程时间不要钱,后来变成只能改一次不要钱,不知道现在怎么样
了,去问问agent?
了,去问问agent?
b*n
8 楼
自己配的那种loading dye,而且颜色棕红的,不是蓝色的?
bp
【在 v***a 的大作中提到】
: 要克隆一个gene,发现用我自己培养的细胞来PCR扩增时,大部分P不出,少数P得出。
: 用别人养的相同的细胞,都P不出。凡是P出来的,会有两条靠得很近很近的条带(~1.
: 5kb)。
: 然后我就挖了上面的那一条下来,做成plasmid了,测序也都完全正确。
: 这次要做recombinant protein,所以重新设计了primer(PCR产物很短,只有600多bp
: ),用上次做的现成的plasmid进行PCR,结果又P出来两条很近的条带。
: 有点想不通,请教一下大家这是怎么回事呢?
: 另,做western blot时偶尔也出现靠得很近的条带(忽而又只有一条),没有见过有相
: 关isoform的报导。
: 谢谢!
bp
【在 v***a 的大作中提到】
: 要克隆一个gene,发现用我自己培养的细胞来PCR扩增时,大部分P不出,少数P得出。
: 用别人养的相同的细胞,都P不出。凡是P出来的,会有两条靠得很近很近的条带(~1.
: 5kb)。
: 然后我就挖了上面的那一条下来,做成plasmid了,测序也都完全正确。
: 这次要做recombinant protein,所以重新设计了primer(PCR产物很短,只有600多bp
: ),用上次做的现成的plasmid进行PCR,结果又P出来两条很近的条带。
: 有点想不通,请教一下大家这是怎么回事呢?
: 另,做western blot时偶尔也出现靠得很近的条带(忽而又只有一条),没有见过有相
: 关isoform的报导。
: 谢谢!
D*t
9 楼
That could be different isoforms. Why not clone the lower band and sequence
it?
it?
w*z
14 楼
template switch?
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