w*y
2 楼
新手作RT，遇到如下几个问题，还请大家不吝赐教：
1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
5.引物还是很特异的。
想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
谢谢
1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
5.引物还是很特异的。
想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
谢谢
t*c
3 楼
啊--------牛
C*e
4 楼
跑胶或者run chip没？
RNA有没有降解？
RNA有没有降解？
Y*H
5 楼
自己组集装箱
O*e
6 楼
多半是降解了。跑个胶看看吧。
呢？
【在 w******y 的大作中提到】
: 新手作RT，遇到如下几个问题，还请大家不吝赐教：
: 1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
: 2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
: 3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
: 4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
: 5.引物还是很特异的。
: 想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
: 谢谢
呢？
【在 w******y 的大作中提到】
: 新手作RT，遇到如下几个问题，还请大家不吝赐教：
: 1.用的小鼠的心脏组织提的RNA；
: 2.提的时候A260/A280的值在1.5左右；
: 3.纯化之后，这个值只有1.00甚至更低；
: 4.跑了RT之后发现，趋势和别人报道的相反；
: 5.引物还是很特异的。
: 想请教一下，这个纯化怎么越纯越低呢；还有纯化会否是我后面不理想的结果的原因呢？
: 谢谢
O*e
7 楼
这个，偶的经验是：国内好的家具不比美国的便宜，而且质量没有美国的好。
因为美国这边买家具都是现场看到，就到仓库拿。国内的话都是要定做的，没有现货，
然后其直接后果就是：2周后你拿到手里的和你在店里看到的是多少不太一样的，不是
抽屉内部滑轮有些问题，就是polish不够好，油漆上得不够匀。
当初偶们花了6000块定做了个五斗橱，然后拉到美国后发现这边的五斗橱无论是质量还
是设计样式都比偶们那个好一些，而且价格也不贵。幸好没拉很多家具过来，美国这边
其实好的地毯是比国内贵些，还有挂在墙壁上的画之类的，也比国内贵，我觉得拉的话
，拉这些比较核算些。
个人经历，不代表所有人。
因为美国这边买家具都是现场看到，就到仓库拿。国内的话都是要定做的，没有现货，
然后其直接后果就是：2周后你拿到手里的和你在店里看到的是多少不太一样的，不是
抽屉内部滑轮有些问题，就是polish不够好，油漆上得不够匀。
当初偶们花了6000块定做了个五斗橱，然后拉到美国后发现这边的五斗橱无论是质量还
是设计样式都比偶们那个好一些，而且价格也不贵。幸好没拉很多家具过来，美国这边
其实好的地毯是比国内贵些，还有挂在墙壁上的画之类的，也比国内贵，我觉得拉的话
，拉这些比较核算些。
个人经历，不代表所有人。
n*e
8 楼
什么叫“提”？什么叫“纯化”？这两个在你哪里有什么区别？能不能 准确地 描述一
下你做了什么？什么试剂？
至少先做到这些。否则怎么判断啊！
下你做了什么？什么试剂？
至少先做到这些。否则怎么判断啊！
y*p
9 楼
运家具过来入关有问题吗,
我公公在印尼做木材,说要给我们运些家具过来,我怕要缴税.
另外从中国组集装箱是什么价格?
【在 O******e 的大作中提到】
: 这个，偶的经验是：国内好的家具不比美国的便宜，而且质量没有美国的好。
: 因为美国这边买家具都是现场看到，就到仓库拿。国内的话都是要定做的，没有现货，
: 然后其直接后果就是：2周后你拿到手里的和你在店里看到的是多少不太一样的，不是
: 抽屉内部滑轮有些问题，就是polish不够好，油漆上得不够匀。
: 当初偶们花了6000块定做了个五斗橱，然后拉到美国后发现这边的五斗橱无论是质量还
: 是设计样式都比偶们那个好一些，而且价格也不贵。幸好没拉很多家具过来，美国这边
: 其实好的地毯是比国内贵些，还有挂在墙壁上的画之类的，也比国内贵，我觉得拉的话
: ，拉这些比较核算些。
: 个人经历，不代表所有人。
我公公在印尼做木材,说要给我们运些家具过来,我怕要缴税.
另外从中国组集装箱是什么价格?
【在 O******e 的大作中提到】
: 这个，偶的经验是：国内好的家具不比美国的便宜，而且质量没有美国的好。
: 因为美国这边买家具都是现场看到，就到仓库拿。国内的话都是要定做的，没有现货，
: 然后其直接后果就是：2周后你拿到手里的和你在店里看到的是多少不太一样的，不是
: 抽屉内部滑轮有些问题，就是polish不够好，油漆上得不够匀。
: 当初偶们花了6000块定做了个五斗橱，然后拉到美国后发现这边的五斗橱无论是质量还
: 是设计样式都比偶们那个好一些，而且价格也不贵。幸好没拉很多家具过来，美国这边
: 其实好的地毯是比国内贵些，还有挂在墙壁上的画之类的，也比国内贵，我觉得拉的话
: ，拉这些比较核算些。
: 个人经历，不代表所有人。
m*m
10 楼
既然测了RNA 260/280，不会不知道比值应该接近2.0吧
这个跑胶也看不出啥结果的
【在 O******e 的大作中提到】
: 多半是降解了。跑个胶看看吧。
:
: 呢？
这个跑胶也看不出啥结果的
【在 O******e 的大作中提到】
: 多半是降解了。跑个胶看看吧。
:
: 呢？
y*u
11 楼
不错，等我买房了也准备一试，不过主要是软装璜一类的，画呀，墙贴啊。我已经问过
了，海运的话就是时间长点，一般一两个月。买家具的风险怕有点大吧。除非让国内的
朋友家人把关。。另外地毯之类的，还有什么卫浴用品啊之类的建议买，床上用品啊。
靠垫啊。窗帘啊。。反正国内的比美国的好太多了。。一样运就多点运啊。能省好多钱
啊。。到时候用不掉YARDSALE也不会损失太多钱，哈哈哈。。另外也可以找人一起团购
集装箱就更省啦。。。
了，海运的话就是时间长点，一般一两个月。买家具的风险怕有点大吧。除非让国内的
朋友家人把关。。另外地毯之类的，还有什么卫浴用品啊之类的建议买，床上用品啊。
靠垫啊。窗帘啊。。反正国内的比美国的好太多了。。一样运就多点运啊。能省好多钱
啊。。到时候用不掉YARDSALE也不会损失太多钱，哈哈哈。。另外也可以找人一起团购
集装箱就更省啦。。。
n*w
12 楼
如果是用nanodrop测得话，降解得了话不会影响这个比值多少吧。跑胶倒是可以看看。
O*e
13 楼
我们是公司出钱，不知道多少钱，应该不贵。总共运了个大床，床垫（床垫也买亏了，
该美国买的），2个床头柜，五斗橱，一套餐桌，一个大茶几，另加80个左右的纸箱子
，那种20尺的小集装箱绰绰有余。啥问题都没碰到，检验检疫也没问题，也没收税。因
为东西不多，不过我们发票什么都备着，以防万一。报关的时候也是如实报的。量不多
，而且是自用的话海关不会征税的。上海拉到西岸1个月左右。比较烦的是保险，你要
先填好价值，报关的时候就是以这个为基础的，我们是如实填写的，怕万一要缴税什么
的，多交了就亏了，但又觉得如果错过了诈骗保险公司的机会有点可惜，开玩笑啦。
不过当时我们计划了一个plan B，就是发票上不写明日期，比如08年10月份买的，我们
让人别写年份，只写月，这样年份我们回来自己写，写成07年，即使海关要抽税，我们
可以说不是新家具。记得当时为了这个还费了很多周折，因为人家发票都是电脑打印的
说。。。
但是这个后来我们自己忘了写了，海关也没问，就放了，还是前几天整理票据的时候看
到这些发票，我们自己都笑了。
我个人建议的话，找大的全球搬家公司，因为这样海关都知道这些公司是做搬家生意的
，不是做进
【在 y****p 的大作中提到】
: 运家具过来入关有问题吗,
: 我公公在印尼做木材,说要给我们运些家具过来,我怕要缴税.
: 另外从中国组集装箱是什么价格?
该美国买的），2个床头柜，五斗橱，一套餐桌，一个大茶几，另加80个左右的纸箱子
，那种20尺的小集装箱绰绰有余。啥问题都没碰到，检验检疫也没问题，也没收税。因
为东西不多，不过我们发票什么都备着，以防万一。报关的时候也是如实报的。量不多
，而且是自用的话海关不会征税的。上海拉到西岸1个月左右。比较烦的是保险，你要
先填好价值，报关的时候就是以这个为基础的，我们是如实填写的，怕万一要缴税什么
的，多交了就亏了，但又觉得如果错过了诈骗保险公司的机会有点可惜，开玩笑啦。
不过当时我们计划了一个plan B，就是发票上不写明日期，比如08年10月份买的，我们
让人别写年份，只写月，这样年份我们回来自己写，写成07年，即使海关要抽税，我们
可以说不是新家具。记得当时为了这个还费了很多周折，因为人家发票都是电脑打印的
说。。。
但是这个后来我们自己忘了写了，海关也没问，就放了，还是前几天整理票据的时候看
到这些发票，我们自己都笑了。
我个人建议的话，找大的全球搬家公司，因为这样海关都知道这些公司是做搬家生意的
，不是做进
【在 y****p 的大作中提到】
: 运家具过来入关有问题吗,
: 我公公在印尼做木材,说要给我们运些家具过来,我怕要缴税.
: 另外从中国组集装箱是什么价格?
T*t
14 楼
260/280偏低，说明280的吸收太高了，或者是有蛋白污染，或者用的buffer里有紫外吸
收干扰物质。光是RNA降解应该不会导致260//280低那么多的。
收干扰物质。光是RNA降解应该不会导致260//280低那么多的。
s*n
15 楼
看看你的水，这个对比值影响很大。
w*y
16 楼
谢谢各位的建议。
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