T*e
2 楼
e*o
3 楼
歌老了，嗓子老了，人也老了
可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
惭愧，又是拿Iphone录的...
不下雨就出太阳吧
原唱 孟庭苇
作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
多少天 多少年 不曾听你说真心话
想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记你的心 你的话 用情的人容易害怕
雨季来 心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
多少天 多少年 不曾听你说真心话
灰的云 蓝的心 不下雨就出太阳吧
念不到 盼不到 别爱我不让我知道
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记 你的话 用情的人容易害怕
雨季来 心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记你的心 你的话 用情的人容易害怕
心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
惭愧，又是拿Iphone录的...
不下雨就出太阳吧
原唱 孟庭苇
作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
多少天 多少年 不曾听你说真心话
想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记你的心 你的话 用情的人容易害怕
雨季来 心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
多少天 多少年 不曾听你说真心话
灰的云 蓝的心 不下雨就出太阳吧
念不到 盼不到 别爱我不让我知道
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记 你的话 用情的人容易害怕
雨季来 心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
雨不下 心也放不下 伊人在天涯
惦记你的心 你的话 用情的人容易害怕
心伞不开 天天盼你来
淋湿我的心 我的情 为我们的爱带来天晴
b*e
4 楼
PS：您的每一个点击，每一张推荐，每一个收藏，每一条书评都是对“冰临神下”的支持
================================================================
数百双绿色的眼睛在洞内闪烁，像是浮在海水里的奇异生物，饥饿已久，贪婪地盯
着误闯进来的食物。
慕行秋一冲而出，立刻施法堵住洞口，他得先救地面上的那些魔奴。
刚刚获得自由的魔奴们还没有缓过劲儿来，有的相拥痛哭，有的独自傻笑，有的四
处乱跑，有的坐在地方不动……他们被困在洞内少则数月，多则几十年，冷不丁再次沐
浴真正的阳光、吸进清新的空气，怎能不激动万分？
魔奴的寿命长达二百余年，在他们的前方还有希望。
沈昊的父亲和秃子的母亲一直守在洞口，慕行秋刚一落地两人就迎上去，一人拽一
条胳膊，争着追问儿子的情况，其他魔奴也慢慢向年轻的道士围拢。
沈昊还好说，秃子的状态极为独特，慕行秋不得不编造故事，让秃子跟野林镇少年
一块进入庞山，一块修行，一块长大……他从来没说过这么多的谎言，而且没有使用任
何幻术，可秃子的母亲总是听不够，一点小事也要追问不休。
沈老爷更是不肯谦让，慕行秋每次说完秃子，也必须再说一点沈昊的事，听说儿子
已经成为斩妖会的法将，沈老爷泪水纵横，其实他根本不了解斩妖会法将是什么意思，
只知道自己的儿子还活着，而且活得很好。
“沈昊的哥哥我也见着了，就在那边的岛上……”
沈老爷放声大笑，“哈哈，沈家还在！哈哈，沈家还在！小秋，多亏了你的抢亲，
抢得好啊。要不是因为你，二栓也不会逃过一劫，更不会成为什么法将。哈哈。抢得好
啊。芳芳呢？你们成亲了？”
慕行秋摇摇头，没法在这件事编造故事。忙说道：“我先带大家到对面的陆地上，
然后再将其他人也带过去。”
“洞里的人怎么办？”秃子的母亲问。
“他们没救了，当官儿的不是说过吗，岛上的火越来越弱，想压制魔种也越来越难
了。”沈老爷心情大好，说起惨事也兴高采烈的。
慕行秋让百余名魔奴集中站在一起，然后施法带着他们一块飞越海峡。
眼瞅着海水就在脚下翻涌，众魔奴既惊叹又恐惧。全都互相挽在一起，离慕行秋尽
可能近一些，尤其是十几名野林镇的人，纷纷伸手抓着慕行秋的胳膊、衣角，盯着他看
个没够。
“道士都有这种本事吗？二栓会吗？”沈老爷对儿子的大名也不熟，张口闭口叫的
还是小名。
“秃子呢？他从小就淘气，不爱读书，当道士能跟上吗？”秃子的母亲说着儿子的
缺点，心里却满怀期望。
“这是简单的法术，他们两个都会。”慕行秋已经不去想离开止步邦之后该怎么圆
谎了。这些人受了十几年的苦难，有资格享受一点欢乐，哪怕是短暂的欢乐。
于是十名野林镇少年一个也没死。全都顺利成为庞山道士，个个创建了一番事业，
说起大良如今家财万贯的时候，野林镇的人齐声发出羡慕与赞叹的呼声，镇子本来就不
大，几乎家家沾亲带故，因此每个人的成就也都是大家的骄傲。
就连那些不认识大良的魔奴也两眼冒光，他们大都是人类，只有少数妖族。分外怀
念世俗生活，对大良的发家史比对道士更感兴趣。
“可惜大良他爹……”沈老爷连笑数声。“野林镇真是人杰地灵，沈慕两家全都兴
旺起来了。哈哈，好啊。”
到了对岸，慕行秋将魔奴放在一处高地上，与王宫保持着距离，然后施放了一层幻
境，叮嘱他们不要离开，他飞出很远还能感觉到背上的目光。
他要先与异史君汇合，然后去接大岛上的魔奴与百姓，最后还要救出洞内的顶火魔
奴，那里还有野林镇的人，他绝不能有朝一日对大良说，自己曾经有机会救出大良的父
亲，却因为种种原因放弃了。
止步邦幻境彻底崩溃，幻境并非纯粹的虚无，大臣、士兵、家眷、房屋、花草树木
等等，都有原型，或是粗糙的雕像，或是一根木棍、一块石头，甚至还有一些真正的人
类与妖族，他们生活在幻境中，也是幻境的一部分，当幻境朽毁，他们也跟着变成木石
之物，等到幻境完全消失的时候，他们也没有醒来。
异史君化成了老者之形，就站在魔像旁边，脚下是一地杂乱的冰镜碎片，他在遥望
南方的海洋，海浪仍在不停地涌向岸边，规模不是很大，却跟北方海洋的平静形成鲜明
对比。
“咱们被困在这里，永远也出不去了。”异史君头也不回地说。
慕行秋落在地上，“你试过了？”
“从我变成众魂之妖开始到现在，其实只有两千一百多年，不到三千年。”异史君
答非所问。
慕行秋向西边的远荒半岛望了一眼，发现那边没有太明显的异常，于是问：“你调
查到什么了？”
异史君却像是没听到一样，只顾讲自己的往事，“一切都是从一块龙肉开始的，可
惜，这里没有惊险，没有曲折，我能吃到这块肉，全是因为偶然，我到现在也不明白那
块龙肉是怎么留存至今的。它是龙肉，在吃过那么多肉之后，我对此已经非常肯定。”
慕行秋的天目直刺南海的波浪，穿越了那层强大的禁制，有那么一刻，他觉得自己
看到了禁制边缘的狭长小岛，甚至看到了杨清音的身影，可画面只持续了一瞬间，海上
的波浪突然升起，像是一排缓缓起立的巨人，然后迈开大步冲向海岸。
天目被巨浪卷了回来，慕行秋能感受到海浪的力量更加强大，的确很难再以瞬移法
术穿过去，更不用说还有近万名的魔奴和百姓拖后腿。
“龙肉让我拥有了吞魂和辨识祖先印记的能力，啊，整整一千年，我开开心心地吃
肉吞魂。收集数不清的记忆，记忆就是我的草场，我应该一直吃下去的。不参与任何争
斗，也不管任何是非。可我太好奇了。未知总是吸引着我，道统看得太严，我不敢靠近
，于是一步步地接近止步邦。”
慕行秋又一次望向西边的远荒岛，发现一批岛民正乘着仅有的几艘平底船驶来，那
里海面异常平静，不需要帮忙，船是真实的。没有跟幻境一块消逝。
“在这里，我窥探到了古神的秘密，身上从此多了一项任务，可这项任务要用到一
名强大的道士，我不敢招惹道统，只好先做其它的小事，传播古神教、收集妖器魔物、
培养更多的大妖……”
异史君捧起手中的焦黑树根，看着它深深地叹了口气，“又是一千多年，就在即将
成功的时候。我才知道，我的任务居然也是幻境的一部分。”
“嗯？”慕行秋听到这里才终于有点感兴趣了。
异史君将焦黑树根递到慕行秋面前，“瞧。这就是火树王，也是道统三祖的力量来
源，还是止步邦幻境的最重要法器，他告诉我，十年之内神树就会被彻底烧掉，而你，
慕行秋，将是最后一个为道火添加木柴的人。”
“你不是想让我灭火吗？”慕行秋托起自己手中的黑树皮，上面的嫩枝已经长到五
六寸长。生出了第三、第四片叶子。
“结束即是开始，灭火即是生火。”异史君冷笑一声。“一棵神树怎么会向一只妖
求助？呵呵，我真是太自大了。你一开始说得对，根本没有神，树只提供力量，对力量
的不同用法分化出了魔族与道统，可是树也能收回力量，这让道魔都很紧张。”
“十三万多年前，道魔决战的时候，树收回了魔族的种子，道统三祖看在眼里，必
然深感恐惧，害怕有一天道火也会被收回，于是试图烧死神树。岛上的道火加持了大量
法术，可是燃烧了十几万年，神树依然存活，道统不得不向魔种求助。”
“向魔种求助？”慕行秋听糊涂了。
异史君指着旁边的高大魔像，“我读过里面的信息了。望山出现大批魔道士并非偶
然，祖师方寻墨为了与魔种沟通，不得不暂时放开镇魔钟，使得魔种涌出，侵袭了许多
道士。”
当初的魔族为了毁灭神树花费了数万年的心血，就在他们想出办法尚未实施的时候
，发生了道魔大战，慕行秋在黑树皮里读过这段记载，“方寻墨成功了？”
“当然，魔种比道统还要憎恨神树，而且道魔双方都想进行一场真正的决战，不受
神树影响，只凭自己的实力，所以道统退隐，给魔种再造身体的时间，以此换取魔种的
帮助——就是这尊魔像。”
“魔像里面藏着什么？”
“一粒完整无缺的魔种，再加上早已注入其中的毁树之法，但这还不够，得有一名
道士催动法术，重新燃起强大千万倍的道火，十年之内就能毁掉神树。呵呵，魔族当初
没有杀死道统三祖原来是有原因的，他们早就发现了道火的用途，没想到要十几万年以
后才能用上。”
“我既不想灭火，也不想生火，只想将大家都带出止步邦。”
“你知道吗？进入止步邦的本应该是注神道士左流英，而不是你。”异史君再次长
叹一声，“真是看不透他啊，左流英到底是一无所知，阴差阳错把位置让给了你，还是
早有预谋，一步步把你推到这里的？”
慕行秋早就不再猜测左流英的想法，可他这时却想左流英特意交待过的一句话，“
到了某一刻道统会想尽办法阻止你，那就证明你走的方向或许是正确的，如果畅通无阻
，你就要反思一下了。”
到目前为止，除了变强的巨浪，慕行秋还没有感受到来自道统的直接阻力。
“我为什么一定要遵从道统与魔族的计划呢？”慕行秋向海边码头望去，第一批乘
船过海的魔奴已经登岸，他们也看到了高处的慕行秋，正欣喜万分向他招手。
“你没有别的选择。”异史君已经看不到希望，“顺着毁树的这条路走，你能拥有
十年幻境，逆着这条路走——不，没有别的路。”
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数百双绿色的眼睛在洞内闪烁，像是浮在海水里的奇异生物，饥饿已久，贪婪地盯
着误闯进来的食物。
慕行秋一冲而出，立刻施法堵住洞口，他得先救地面上的那些魔奴。
刚刚获得自由的魔奴们还没有缓过劲儿来，有的相拥痛哭，有的独自傻笑，有的四
处乱跑，有的坐在地方不动……他们被困在洞内少则数月，多则几十年，冷不丁再次沐
浴真正的阳光、吸进清新的空气，怎能不激动万分？
魔奴的寿命长达二百余年，在他们的前方还有希望。
沈昊的父亲和秃子的母亲一直守在洞口，慕行秋刚一落地两人就迎上去，一人拽一
条胳膊，争着追问儿子的情况，其他魔奴也慢慢向年轻的道士围拢。
沈昊还好说，秃子的状态极为独特，慕行秋不得不编造故事，让秃子跟野林镇少年
一块进入庞山，一块修行，一块长大……他从来没说过这么多的谎言，而且没有使用任
何幻术，可秃子的母亲总是听不够，一点小事也要追问不休。
沈老爷更是不肯谦让，慕行秋每次说完秃子，也必须再说一点沈昊的事，听说儿子
已经成为斩妖会的法将，沈老爷泪水纵横，其实他根本不了解斩妖会法将是什么意思，
只知道自己的儿子还活着，而且活得很好。
“沈昊的哥哥我也见着了，就在那边的岛上……”
沈老爷放声大笑，“哈哈，沈家还在！哈哈，沈家还在！小秋，多亏了你的抢亲，
抢得好啊。要不是因为你，二栓也不会逃过一劫，更不会成为什么法将。哈哈。抢得好
啊。芳芳呢？你们成亲了？”
慕行秋摇摇头，没法在这件事编造故事。忙说道：“我先带大家到对面的陆地上，
然后再将其他人也带过去。”
“洞里的人怎么办？”秃子的母亲问。
“他们没救了，当官儿的不是说过吗，岛上的火越来越弱，想压制魔种也越来越难
了。”沈老爷心情大好，说起惨事也兴高采烈的。
慕行秋让百余名魔奴集中站在一起，然后施法带着他们一块飞越海峡。
眼瞅着海水就在脚下翻涌，众魔奴既惊叹又恐惧。全都互相挽在一起，离慕行秋尽
可能近一些，尤其是十几名野林镇的人，纷纷伸手抓着慕行秋的胳膊、衣角，盯着他看
个没够。
“道士都有这种本事吗？二栓会吗？”沈老爷对儿子的大名也不熟，张口闭口叫的
还是小名。
“秃子呢？他从小就淘气，不爱读书，当道士能跟上吗？”秃子的母亲说着儿子的
缺点，心里却满怀期望。
“这是简单的法术，他们两个都会。”慕行秋已经不去想离开止步邦之后该怎么圆
谎了。这些人受了十几年的苦难，有资格享受一点欢乐，哪怕是短暂的欢乐。
于是十名野林镇少年一个也没死。全都顺利成为庞山道士，个个创建了一番事业，
说起大良如今家财万贯的时候，野林镇的人齐声发出羡慕与赞叹的呼声，镇子本来就不
大，几乎家家沾亲带故，因此每个人的成就也都是大家的骄傲。
就连那些不认识大良的魔奴也两眼冒光，他们大都是人类，只有少数妖族。分外怀
念世俗生活，对大良的发家史比对道士更感兴趣。
“可惜大良他爹……”沈老爷连笑数声。“野林镇真是人杰地灵，沈慕两家全都兴
旺起来了。哈哈，好啊。”
到了对岸，慕行秋将魔奴放在一处高地上，与王宫保持着距离，然后施放了一层幻
境，叮嘱他们不要离开，他飞出很远还能感觉到背上的目光。
他要先与异史君汇合，然后去接大岛上的魔奴与百姓，最后还要救出洞内的顶火魔
奴，那里还有野林镇的人，他绝不能有朝一日对大良说，自己曾经有机会救出大良的父
亲，却因为种种原因放弃了。
止步邦幻境彻底崩溃，幻境并非纯粹的虚无，大臣、士兵、家眷、房屋、花草树木
等等，都有原型，或是粗糙的雕像，或是一根木棍、一块石头，甚至还有一些真正的人
类与妖族，他们生活在幻境中，也是幻境的一部分，当幻境朽毁，他们也跟着变成木石
之物，等到幻境完全消失的时候，他们也没有醒来。
异史君化成了老者之形，就站在魔像旁边，脚下是一地杂乱的冰镜碎片，他在遥望
南方的海洋，海浪仍在不停地涌向岸边，规模不是很大，却跟北方海洋的平静形成鲜明
对比。
“咱们被困在这里，永远也出不去了。”异史君头也不回地说。
慕行秋落在地上，“你试过了？”
“从我变成众魂之妖开始到现在，其实只有两千一百多年，不到三千年。”异史君
答非所问。
慕行秋向西边的远荒半岛望了一眼，发现那边没有太明显的异常，于是问：“你调
查到什么了？”
异史君却像是没听到一样，只顾讲自己的往事，“一切都是从一块龙肉开始的，可
惜，这里没有惊险，没有曲折，我能吃到这块肉，全是因为偶然，我到现在也不明白那
块龙肉是怎么留存至今的。它是龙肉，在吃过那么多肉之后，我对此已经非常肯定。”
慕行秋的天目直刺南海的波浪，穿越了那层强大的禁制，有那么一刻，他觉得自己
看到了禁制边缘的狭长小岛，甚至看到了杨清音的身影，可画面只持续了一瞬间，海上
的波浪突然升起，像是一排缓缓起立的巨人，然后迈开大步冲向海岸。
天目被巨浪卷了回来，慕行秋能感受到海浪的力量更加强大，的确很难再以瞬移法
术穿过去，更不用说还有近万名的魔奴和百姓拖后腿。
“龙肉让我拥有了吞魂和辨识祖先印记的能力，啊，整整一千年，我开开心心地吃
肉吞魂。收集数不清的记忆，记忆就是我的草场，我应该一直吃下去的。不参与任何争
斗，也不管任何是非。可我太好奇了。未知总是吸引着我，道统看得太严，我不敢靠近
，于是一步步地接近止步邦。”
慕行秋又一次望向西边的远荒岛，发现一批岛民正乘着仅有的几艘平底船驶来，那
里海面异常平静，不需要帮忙，船是真实的。没有跟幻境一块消逝。
“在这里，我窥探到了古神的秘密，身上从此多了一项任务，可这项任务要用到一
名强大的道士，我不敢招惹道统，只好先做其它的小事，传播古神教、收集妖器魔物、
培养更多的大妖……”
异史君捧起手中的焦黑树根，看着它深深地叹了口气，“又是一千多年，就在即将
成功的时候。我才知道，我的任务居然也是幻境的一部分。”
“嗯？”慕行秋听到这里才终于有点感兴趣了。
异史君将焦黑树根递到慕行秋面前，“瞧。这就是火树王，也是道统三祖的力量来
源，还是止步邦幻境的最重要法器，他告诉我，十年之内神树就会被彻底烧掉，而你，
慕行秋，将是最后一个为道火添加木柴的人。”
“你不是想让我灭火吗？”慕行秋托起自己手中的黑树皮，上面的嫩枝已经长到五
六寸长。生出了第三、第四片叶子。
“结束即是开始，灭火即是生火。”异史君冷笑一声。“一棵神树怎么会向一只妖
求助？呵呵，我真是太自大了。你一开始说得对，根本没有神，树只提供力量，对力量
的不同用法分化出了魔族与道统，可是树也能收回力量，这让道魔都很紧张。”
“十三万多年前，道魔决战的时候，树收回了魔族的种子，道统三祖看在眼里，必
然深感恐惧，害怕有一天道火也会被收回，于是试图烧死神树。岛上的道火加持了大量
法术，可是燃烧了十几万年，神树依然存活，道统不得不向魔种求助。”
“向魔种求助？”慕行秋听糊涂了。
异史君指着旁边的高大魔像，“我读过里面的信息了。望山出现大批魔道士并非偶
然，祖师方寻墨为了与魔种沟通，不得不暂时放开镇魔钟，使得魔种涌出，侵袭了许多
道士。”
当初的魔族为了毁灭神树花费了数万年的心血，就在他们想出办法尚未实施的时候
，发生了道魔大战，慕行秋在黑树皮里读过这段记载，“方寻墨成功了？”
“当然，魔种比道统还要憎恨神树，而且道魔双方都想进行一场真正的决战，不受
神树影响，只凭自己的实力，所以道统退隐，给魔种再造身体的时间，以此换取魔种的
帮助——就是这尊魔像。”
“魔像里面藏着什么？”
“一粒完整无缺的魔种，再加上早已注入其中的毁树之法，但这还不够，得有一名
道士催动法术，重新燃起强大千万倍的道火，十年之内就能毁掉神树。呵呵，魔族当初
没有杀死道统三祖原来是有原因的，他们早就发现了道火的用途，没想到要十几万年以
后才能用上。”
“我既不想灭火，也不想生火，只想将大家都带出止步邦。”
“你知道吗？进入止步邦的本应该是注神道士左流英，而不是你。”异史君再次长
叹一声，“真是看不透他啊，左流英到底是一无所知，阴差阳错把位置让给了你，还是
早有预谋，一步步把你推到这里的？”
慕行秋早就不再猜测左流英的想法，可他这时却想左流英特意交待过的一句话，“
到了某一刻道统会想尽办法阻止你，那就证明你走的方向或许是正确的，如果畅通无阻
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到目前为止，除了变强的巨浪，慕行秋还没有感受到来自道统的直接阻力。
“我为什么一定要遵从道统与魔族的计划呢？”慕行秋向海边码头望去，第一批乘
船过海的魔奴已经登岸，他们也看到了高处的慕行秋，正欣喜万分向他招手。
“你没有别的选择。”异史君已经看不到希望，“顺着毁树的这条路走，你能拥有
十年幻境，逆着这条路走——不，没有别的路。”
z*u
5 楼
H55主要就是集成个显示，CPU有这个功能是不是不用H55有点浪费？但价格上好像还便宜些，P55贵在哪里啊？
j*r
6 楼
如附件里红箭头所指的路命。
以前好像tangbohu 发过。
以前好像tangbohu 发过。
g*f
7 楼
最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
指教一二。多谢了
BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
指教一二。多谢了
BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
h*8
8 楼
bless
【在 b*****1 的大作中提到】
: 看着7月底的绿的花花的。怎么我们的连个更新都没有。RE也做了。
【在 b*****1 的大作中提到】
: 看着7月底的绿的花花的。怎么我们的连个更新都没有。RE也做了。
i*o
9 楼
麻烦mm按照版规把词曲作者名跟歌词都补上吧（主贴）
【在 e*****o 的大作中提到】
: 歌老了，嗓子老了，人也老了
: 可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
: 惭愧，又是拿Iphone录的...
: 不下雨就出太阳吧
: 原唱 孟庭苇
: 作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
: 风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
: 多少天 多少年 不曾听你说真心话
: 想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
: 盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
【在 e*****o 的大作中提到】
: 歌老了，嗓子老了，人也老了
: 可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
: 惭愧，又是拿Iphone录的...
: 不下雨就出太阳吧
: 原唱 孟庭苇
: 作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
: 风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
: 多少天 多少年 不曾听你说真心话
: 想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
: 盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
t*g
10 楼
DMI带宽，pci-e带宽。
因为H55 chipset就是定位低端，所以H55的板子从做工到用料到OC能力都差一截。
【在 z***u 的大作中提到】
: H55主要就是集成个显示，CPU有这个功能是不是不用H55有点浪费？但价格上好像还便宜些，P55贵在哪里啊？
因为H55 chipset就是定位低端，所以H55的板子从做工到用料到OC能力都差一截。
【在 z***u 的大作中提到】
: H55主要就是集成个显示，CPU有这个功能是不是不用H55有点浪费？但价格上好像还便宜些，P55贵在哪里啊？
t*u
11 楼
首先，你这是primo 1.1 还是1.2？不同版本修改的方法不一样。
【在 j*****r 的大作中提到】
: 如附件里红箭头所指的路命。
: 以前好像tangbohu 发过。
【在 j*****r 的大作中提到】
: 如附件里红箭头所指的路命。
: 以前好像tangbohu 发过。
s*t
12 楼
TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
j*k
13 楼
bless
e*o
14 楼
不好意思，又忘了。
【在 i******o 的大作中提到】
: 麻烦mm按照版规把词曲作者名跟歌词都补上吧（主贴）
【在 i******o 的大作中提到】
: 麻烦mm按照版规把词曲作者名跟歌词都补上吧（主贴）
j*r
15 楼
primo 1.1。多谢了。
【在 t******u 的大作中提到】
: 首先，你这是primo 1.1 还是1.2？不同版本修改的方法不一样。
【在 t******u 的大作中提到】
: 首先，你这是primo 1.1 还是1.2？不同版本修改的方法不一样。
d*7
16 楼
PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
我觉得
很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
，我的TF没信
号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
就变成IgG和
我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
的蛋白很容
易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
来我换了个
protocol，是Riachar Young's Lab protocol，就好了！
尚勇丰建立ChIP,真搞笑，哈哈
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
我觉得
很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
，我的TF没信
号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
就变成IgG和
我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
的蛋白很容
易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
来我换了个
protocol，是Riachar Young's Lab protocol，就好了！
尚勇丰建立ChIP,真搞笑，哈哈
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
l*g
17 楼
you will be 'greened' by the end of this month :)
l*e
18 楼
mm唱得不错，刚开始主歌声音没有打开，唱得小心翼翼的，副歌就好多了。
伴奏声音太小，人声和伴奏没有合成在一起，建议买个简单的设备，这样
录制效果要好很多。多奔，下次别忘记格式哦。还有就是［翻唱］括号要在中文
输入模式下输入。
伴奏声音太小，人声和伴奏没有合成在一起，建议买个简单的设备，这样
录制效果要好很多。多奔，下次别忘记格式哦。还有就是［翻唱］括号要在中文
输入模式下输入。
t*u
19 楼
打开data.zip里ui_igo9\480_272\ui\navigatemap_480_272.ui
lua.showDiriconBg && %route.list.navigated.has_navigable_path)>
将txt_18bd改为txt_20bd或txt_22bd。
如果是其他resolution,到相应的目录底下修改。good luck.
lua.showDiriconBg && %route.list.navigated.has_navigable_path)>
将txt_18bd改为txt_20bd或txt_22bd。
如果是其他resolution,到相应的目录底下修改。good luck.
g*f
20 楼
多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
s*t
21 楼
Bless!
h*7
22 楼
孟庭苇的歌很难唱的，MM演绎的不错。去把装备上了吧，有没有后期差别很大。
j*r
23 楼
成了，谢谢了。
【在 t******u 的大作中提到】
: 打开data.zip里ui_igo9\480_272\ui\navigatemap_480_272.ui
:
: lua.showDiriconBg && %route.list.navigated.has_navigable_path)>
: 将txt_18bd改为txt_20bd或txt_22bd。
: 如果是其他resolution,到相应的目录底下修改。good luck.
【在 t******u 的大作中提到】
: 打开data.zip里ui_igo9\480_272\ui\navigatemap_480_272.ui
:
: lua.showDiriconBg && %route.list.navigated.has_navigable_path)>
: 将txt_18bd改为txt_20bd或txt_22bd。
: 如果是其他resolution,到相应的目录底下修改。good luck.
a*d
24 楼
CHIP assay 最早是Ron Mckay建立的吧，称作 Mckay assay.
An immunoassay for the interaction between an SV40 T antigen related protein
and DNA.
J. Mol. Biol. 1981
至于在哺乳动物细胞里面用类似方法，是否尚永丰是第一人，就不清楚了。
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
An immunoassay for the interaction between an SV40 T antigen related protein
and DNA.
J. Mol. Biol. 1981
至于在哺乳动物细胞里面用类似方法，是否尚永丰是第一人，就不清楚了。
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
a*e
25 楼
bless. send baozi ba.
O*e
26 楼
声音挺像孟庭苇的。。。唱的不错的。。。好听
x*x
27 楼
PRIMO1.2怎么改大字体？？
s*t
28 楼
正在做ChIP， 准备使用Young Lab的protocol，
请问你在用young lab的protocl的时候在reverse crosslink的时候是怎么做的
好像reverse crosslink 都很麻烦。
我现在在mIgG 的ctrl里面都能扩出band。请问你是怎么解决的？
【在 d****7 的大作中提到】
: PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
: 我觉得
: 很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
: ，我的TF没信
: 号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
: 就变成IgG和
: 我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
: 后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
: 的蛋白很容
: 易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
请问你在用young lab的protocl的时候在reverse crosslink的时候是怎么做的
好像reverse crosslink 都很麻烦。
我现在在mIgG 的ctrl里面都能扩出band。请问你是怎么解决的？
【在 d****7 的大作中提到】
: PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
: 我觉得
: 很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
: ，我的TF没信
: 号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
: 就变成IgG和
: 我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
: 后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
: 的蛋白很容
: 易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
a*s
29 楼
bless
k*i
30 楼
虽然是iphone录的，但是楼主mm唱得是真的好！这声音温柔细腻，别原唱更是自成一格
。
。
m*u
31 楼
请问你做p65 ChIP用的啥抗体？能给个具体信息吗？谢谢
【在 g*******f 的大作中提到】
: 多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
: millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
: p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
【在 g*******f 的大作中提到】
: 多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
: millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
: p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
V*x
32 楼
MM的声音很好听~~
有机会整套设备吧~~
有机会整套设备吧~~
b*e
33 楼
upstate不能用于tf有什么根据吗？我看文献上很多人用他家的kit做tf的啊。
【在 s*****t 的大作中提到】
: TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
: Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
: 我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
【在 s*****t 的大作中提到】
: TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
: Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
: 我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
z*n
34 楼
赞！声音真好听，赶快上设备！！！
q*2
35 楼
cell signal 的不错
【在 m*****u 的大作中提到】
: 请问你做p65 ChIP用的啥抗体？能给个具体信息吗？谢谢
a*a
36 楼
超赞！
能否点唱一曲孟庭苇的《紫浣花》？
能否点唱一曲孟庭苇的《紫浣花》？
g*f
37 楼
最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
指教一二。多谢了
BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
指教一二。多谢了
BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
e*o
38 楼
呵呵，好啊，不过得等我先找来这歌听听
【在 a****a 的大作中提到】
: 超赞！
: 能否点唱一曲孟庭苇的《紫浣花》？
【在 a****a 的大作中提到】
: 超赞！
: 能否点唱一曲孟庭苇的《紫浣花》？
s*t
39 楼
TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
i*o
40 楼
有少许小音准问题，但是，瑕不掩瑜，整体很不错，唱得很好听。
赶紧响应群众呼声换设备吧~~~
【在 e*****o 的大作中提到】
: 歌老了，嗓子老了，人也老了
: 可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
: 惭愧，又是拿Iphone录的...
: 不下雨就出太阳吧
: 原唱 孟庭苇
: 作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
: 风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
: 多少天 多少年 不曾听你说真心话
: 想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
: 盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
赶紧响应群众呼声换设备吧~~~
【在 e*****o 的大作中提到】
: 歌老了，嗓子老了，人也老了
: 可惜唱到最后那段才开嗓 :-)
: 惭愧，又是拿Iphone录的...
: 不下雨就出太阳吧
: 原唱 孟庭苇
: 作曲：游鸿明 作词：许常德 编曲：彭飞
: 风吹云 云在动 不下雨就出太阳吧
: 多少天 多少年 不曾听你说真心话
: 想得远 远的天 不下雨就出太阳吧
: 盼着你 念着你 我疼你别让我牵挂
d*7
41 楼
PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
我觉得
很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
，我的TF没信
号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
就变成IgG和
我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
的蛋白很容
易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
来我换了个
protocol，是Riachar Young's Lab protocol，就好了！
尚勇丰建立ChIP,真搞笑，哈哈
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
我觉得
很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
，我的TF没信
号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
就变成IgG和
我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
的蛋白很容
易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
来我换了个
protocol，是Riachar Young's Lab protocol，就好了！
尚勇丰建立ChIP,真搞笑，哈哈
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
e*o
42 楼
呵呵呵，你说的太委婉了，有很多问题的，我自己都能听出来，唉，总是眼高手低啊
【在 i******o 的大作中提到】
: 有少许小音准问题，但是，瑕不掩瑜，整体很不错，唱得很好听。
: 赶紧响应群众呼声换设备吧~~~
【在 i******o 的大作中提到】
: 有少许小音准问题，但是，瑕不掩瑜，整体很不错，唱得很好听。
: 赶紧响应群众呼声换设备吧~~~
g*f
43 楼
多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
c*n
44 楼
挺好听的。
IPHONE的声音就是薄啊，赞成上设备。
IPHONE的声音就是薄啊，赞成上设备。
a*d
45 楼
CHIP assay 最早是Ron Mckay建立的吧，称作 Mckay assay.
An immunoassay for the interaction between an SV40 T antigen related protein
and DNA.
J. Mol. Biol. 1981
至于在哺乳动物细胞里面用类似方法，是否尚永丰是第一人，就不清楚了。
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
An immunoassay for the interaction between an SV40 T antigen related protein
and DNA.
J. Mol. Biol. 1981
至于在哺乳动物细胞里面用类似方法，是否尚永丰是第一人，就不清楚了。
【在 g*******f 的大作中提到】
: 最近在做 ChIP 看PPARgamma 的转录调控，一个月了也没出什么结果，用的是
: Millipore 的EZ ChIP Kit, IgG阴性对照总是出现挺强的带，， RNA Polymerase2 阳
: 性对照的带却很弱，似乎没有理由怀疑试剂盒的RNA Polymerase2 抗体有问题啊? 以前
: 做NF-kappaB 一直都做得挺好的，只是用的是不同的试剂盒而已。 还请做这个方面的
: 指教一二。多谢了
: BTW，偶然翻到了尚永丰的主页，上面有这么一句 "在世界上首次建立了哺乳动物细胞
: 染色质免疫沉淀技术（ChIP）"
: http://www.bjmu.edu.cn/art/2009/12/6/art_8_39651.html
: 让我觉得挺 shock 的，原来这个技术是他"建立"的 难以置信啊
i*o
46 楼
不是，不夸张得说，以我被封做“金耳”的“神听力”，你这首里一些小音准的问题其
实也主要是因为设备拖后腿（返送不到位）而导致的，而且多半也都在1/4 key上下游
荡，不算很影响听感的。
所以赶紧上套设备吧~~~~
【在 e*****o 的大作中提到】
: 呵呵呵，你说的太委婉了，有很多问题的，我自己都能听出来，唉，总是眼高手低啊
实也主要是因为设备拖后腿（返送不到位）而导致的，而且多半也都在1/4 key上下游
荡，不算很影响听感的。
所以赶紧上套设备吧~~~~
【在 e*****o 的大作中提到】
: 呵呵呵，你说的太委婉了，有很多问题的，我自己都能听出来，唉，总是眼高手低啊
s*t
47 楼
正在做ChIP， 准备使用Young Lab的protocol，
请问你在用young lab的protocl的时候在reverse crosslink的时候是怎么做的
好像reverse crosslink 都很麻烦。
我现在在mIgG 的ctrl里面都能扩出band。请问你是怎么解决的？
【在 d****7 的大作中提到】
: PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
: 我觉得
: 很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
: ，我的TF没信
: 号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
: 就变成IgG和
: 我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
: 后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
: 的蛋白很容
: 易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
请问你在用young lab的protocl的时候在reverse crosslink的时候是怎么做的
好像reverse crosslink 都很麻烦。
我现在在mIgG 的ctrl里面都能扩出band。请问你是怎么解决的？
【在 d****7 的大作中提到】
: PPARgamma的ChIP有难度，但是RNA polII的ChIP signal应该很强啊，你说IgG信号强，
: 我觉得
: 很可能是试剂盒的buffer污染了，我当初用Millipore的方法的时候就出现了这个问题
: ，我的TF没信
: 号，IgG信号极强。后来觉得是污染，我就自己配Buffer，不用试剂盒的buffer，然后
: 就变成IgG和
: 我的TF都没带了，至少解决了污染问题。
: 后来我发现，Millipore这个方法有SDS在lysis buffer里，对于结合力强或者表达量高
: 的蛋白很容
: 易出结果，比如SRF,ELK1之类的，我的TF表达量低，结合力也弱，怎么做都出不来，后
n*a
48 楼
附议口真总的意见。
m*u
49 楼
请问你做p65 ChIP用的啥抗体？能给个具体信息吗？谢谢
【在 g*******f 的大作中提到】
: 多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
: millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
: p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
【在 g*******f 的大作中提到】
: 多谢两位指点，dbrg77老哥的信息很有用，看来确实是试剂盒的问题，我以前用
: millipore 的做 NF-kappaB p65做得好好的，虽然PCR IgG的对照也有weak 的带,但是
: p65 IP 的还是很特异的。 我得试试Young 的 protocol
b*e
50 楼
upstate不能用于tf有什么根据吗？我看文献上很多人用他家的kit做tf的啊。
【在 s*****t 的大作中提到】
: TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
: Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
: 我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
【在 s*****t 的大作中提到】
: TF的chIP 和Histon的chiP不一样。
: Upsate的 protocol只适用于Histon的chIP不能用于TF的chIP
: 我建议你try一下Themo 的kit，他家是用酶切的。
q*2
51 楼
cell signal 的不错
【在 m*****u 的大作中提到】
: 请问你做p65 ChIP用的啥抗体？能给个具体信息吗？谢谢
g*f
52 楼
对，就是cell signal 的，很好用，非常特异。
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