如何immortalize MEFs?# Biology - 生物学
a*l
1 楼
请问诸位大侠如何immortalize MEFs? 本人试了一次3T3 protocol (3x105 cells 每3
天传一次）. 传了几代后细胞就不长了。不知怎么回事。有人试过large T antigen 吗？
多谢
天传一次）. 传了几代后细胞就不长了。不知怎么回事。有人试过large T antigen 吗？
多谢
i*0
2 楼
用shARF可以。
或者3t3， senescence以后，3天换medium一次，等到clonal expansion以后，在传代
。
或者3t3， senescence以后，3天换medium一次，等到clonal expansion以后，在传代
。
s*d
3 楼
我的经验，3T3 protocol trick: 细胞生长变缓以后，3 天换一次液，而不是3天传一
次。。3天传一次的话7，8代以后就不长了，细胞越来越少。。
次。。3天传一次的话7，8代以后就不长了，细胞越来越少。。
o*d
4 楼
SV40 LT, 一個星期搞定。
a*l
5 楼
多谢诸位大侠指教。
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