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问个关于细胞培养问题--别嫌弱

问个关于细胞培养问题--别嫌弱# Biology - 生物学

b*g2011-10-21 07:10

1 楼

如果拧紧细胞培养瓶瓶盖，不让里面空气与培养箱中的空气交换24 hours，这种状态给
细胞造成的是哪种stress？？
缺氧？
积聚的碱性pH? (因为二氧化碳进不去)
细胞自己代谢过程中产生的有害气体？

g*02011-10-21 07:10

2 楼

培基变酸发黄

h*r2011-10-21 07:10

3 楼

积聚的碱性pH? 这个可能性不大。CO2在大气中0.03%吧，主要是自己能产CO2出不去。
我觉得变酸的可能性大点。另外是厌氧下的有机酸的积累。
可以在瓶子里悬挂一块儿KOH，让它吸收CO2，但不和培养基接触。
也可以考虑用buffer陪培养基，例如大肠用TB培养基。

b*g2011-10-21 07:10

4 楼

谢谢回答，可是培养箱中的CO2是5%啊,它的作用不就是维持培养基的酸性吗?
我自己空想，也觉得应该是无氧条件对细胞造成的伤害。

【在 h**********r 的大作中提到】

: 积聚的碱性pH? 这个可能性不大。CO2在大气中0.03%吧，主要是自己能产CO2出不去。
: 我觉得变酸的可能性大点。另外是厌氧下的有机酸的积累。
: 可以在瓶子里悬挂一块儿KOH，让它吸收CO2，但不和培养基接触。
: 也可以考虑用buffer陪培养基，例如大肠用TB培养基。

b*h2011-10-21 07:10

5 楼

Co2是为了维持酸性环境吗？应该是缓冲作用维持ph7.4的稳定吧？

【在 b*********g 的大作中提到】

: 谢谢回答，可是培养箱中的CO2是5%啊,它的作用不就是维持培养基的酸性吗?
: 我自己空想，也觉得应该是无氧条件对细胞造成的伤害。

b*g2011-10-21 07:10

6 楼

对对！！是维持培养基的pH!!我是想说在空气中CO2含量少，所以培养基放久了就会变
粉红，变碱性，可是放在高CO2环境中就是为了中和这种变化，起到的是酸性的作用

【在 b********h 的大作中提到】

: Co2是为了维持酸性环境吗？应该是缓冲作用维持ph7.4的稳定吧？

h*r2011-10-21 07:10

7 楼

你没说CO2培养箱，我的理解你别嫌弱：（

b*g2011-10-21 07:10

8 楼

g*02011-10-21 07:10

9 楼

培基变酸发黄

h*r2011-10-21 07:10

10 楼

b*g2011-10-21 07:10

11 楼

b*h2011-10-21 07:10

12 楼

Co2是为了维持酸性环境吗？应该是缓冲作用维持ph7.4的稳定吧？

【在 b*********g 的大作中提到】

: 谢谢回答，可是培养箱中的CO2是5%啊,它的作用不就是维持培养基的酸性吗?
: 我自己空想，也觉得应该是无氧条件对细胞造成的伤害。

b*g2011-10-21 07:10

13 楼

: Co2是为了维持酸性环境吗？应该是缓冲作用维持ph7.4的稳定吧？

h*r2011-10-21 07:10

14 楼

你没说CO2培养箱，我的理解你别嫌弱：（

L*S2011-10-21 07:10

15 楼

可能主要会是缺氧。
CO2 是维持培养液PH (7.4),但是一般培养液都会加入NaHCO3 和HEPES,而且HEPES对酸
碱度的调节作用受CO2 浓度影响小。
细胞自己代谢过程中产生的有害气体？我觉得要看觉体细胞的数目（细胞数/ml培养液
或者细胞数/cm2）还有细胞的耐受程度。

j*x2011-10-21 07:10

16 楼

关于这个问题，刚读研无聊的时候做过不是很严谨的比较，“结论”是和缺氧无关
当时的培养瓶盖还是老式的，不带filter需要自己拧开一个角度的那种，同时养的三种
细胞293/Huh7/Hela，用的invitrogen的普通DMEM培养基，不含hepes。有一次传细胞的
时候没留神盖子全部拧紧，结果第二天发现所有培养基全部变碱，293/Huh7贴壁出现严
重问题，漂浮大量“死细胞”，活细胞形态也非常差。但是Hela没有任何问题，一切正
常。拧开瓶盖之后不到24小时，多数“死细胞”重新贴壁，细胞形态恢复正常，培养基
颜色也回到正常pH范围。这时候我又把瓶盖拧紧，继续培养差不多48小时，所有细胞生
长一切如常，这时候由于细胞已经生长一段时间自然产酸，即便拧紧瓶盖，培养基也不
会变碱的过分。
我的“结论”是，某些细胞（293/Huh7）对培养基pH比较敏感，尤其是在悬浮后等待贴
壁的时候，而有些糙的比如Hela就不敏感，而缺不缺氧，大部分细胞不在乎，尤其是在
短时间内

【在 L****S 的大作中提到】

: 可能主要会是缺氧。
: CO2 是维持培养液PH (7.4),但是一般培养液都会加入NaHCO3 和HEPES,而且HEPES对酸
: 碱度的调节作用受CO2 浓度影响小。
: 细胞自己代谢过程中产生的有害气体？我觉得要看觉体细胞的数目（细胞数/ml培养液
: 或者细胞数/cm2）还有细胞的耐受程度。

c*t2011-10-21 07:10

17 楼

Warburg effect?肿瘤细胞的能量来源主要是无氧糖酵解而不是氧化磷酸化.

【在 j****x 的大作中提到】

: 关于这个问题，刚读研无聊的时候做过不是很严谨的比较，“结论”是和缺氧无关
: 当时的培养瓶盖还是老式的，不带filter需要自己拧开一个角度的那种，同时养的三种
: 细胞293/Huh7/Hela，用的invitrogen的普通DMEM培养基，不含hepes。有一次传细胞的
: 时候没留神盖子全部拧紧，结果第二天发现所有培养基全部变碱，293/Huh7贴壁出现严
: 重问题，漂浮大量“死细胞”，活细胞形态也非常差。但是Hela没有任何问题，一切正
: 常。拧开瓶盖之后不到24小时，多数“死细胞”重新贴壁，细胞形态恢复正常，培养基
: 颜色也回到正常pH范围。这时候我又把瓶盖拧紧，继续培养差不多48小时，所有细胞生
: 长一切如常，这时候由于细胞已经生长一段时间自然产酸，即便拧紧瓶盖，培养基也不
: 会变碱的过分。
: 我的“结论”是，某些细胞（293/Huh7）对培养基pH比较敏感，尤其是在悬浮后等待贴