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请教冰冻切片的问题
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请教冰冻切片的问题# Biology - 生物学
g*a
1
我把那个塑料头想上提了一下
但是倒油的时候还是很多会从边缘漏下来
浪费而且不干净
这种瓶子有什么机关么?
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l*n
2
比如credit limit 1000,听说每月花250以上会伤信用,真的假的?
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z*3
3
《千古一帝---李世民》
《宋太祖 ----赵匡胤》
《汉光武帝 ---刘秀》
《七子八婿满床笏---郭子仪》
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d*o
4
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: dakandao (大熊宝宝), 信区: Military
标 题: 带了一万解放军精兵和装备回到战国时代结果更惨
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 19:45:19 2010, 美东)
回去后才发现带的都是精锐电子战部队,全是价值数亿的电磁干扰的设备 连一支老
套筒、汉阳造都冒得
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n*a
5
為什麼糾正自己的思想見解,有那麼重要?這是因為,人的一切行為,都受著
思想的支配。思想不改變,行為就不會發生改變,行為不改變,業果也就不會改變,業
果不改變,就依然擺脫不了輪迴之苦。所以不去修正思想,修行就根本無從談起。要獲
得解脫,必須從源頭下手,修正自己的思想見解。
敬錄自 益西彭措堪布官方微博
http://weibo.com/yixipengcuo
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i*s
6
三四个月前买的,昨天用的时候invalid
难道也会过期吗?还是只能在中文office上用?
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s*r
7
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,
能不能保质期长一点。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是
先得灌一些OCT。或者新鲜肠子能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
都是小白问题,请多指教。
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K*t
8

装到玻璃油瓶里面再倒~

【在 g****a 的大作中提到】
: 我把那个塑料头想上提了一下
: 但是倒油的时候还是很多会从边缘漏下来
: 浪费而且不干净
: 这种瓶子有什么机关么?

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g*z
9
如果现在你的分数很低,只有好处
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p*n
10
笑话冷,人品差

【在 d******o 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: dakandao (大熊宝宝), 信区: Military
: 标 题: 带了一万解放军精兵和装备回到战国时代结果更惨
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 19:45:19 2010, 美东)
: 回去后才发现带的都是精锐电子战部队,全是价值数亿的电磁干扰的设备 连一支老
: 套筒、汉阳造都冒得

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n*a
11
無論做任何事情,首先要由意識去設計藍圖,然後由身和口去按圖施工。其中
意識是決定一切的主宰。因此,訓練、調整、調伏意識,是人生最重要的工作之一。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://www.weibo.com/cichengluozhu
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h*0
12
这种明显是一个码卖给无数人用的,肯定会被封啊。

【在 i**s 的大作中提到】
: 三四个月前买的,昨天用的时候invalid
: 难道也会过期吗?还是只能在中文office上用?

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M*s
13
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。
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b*t
14
大厨说没有腔调

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 装到玻璃油瓶里面再倒~

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g*n
15
花100就还掉
再继续花
继续还

【在 l*****n 的大作中提到】
: 比如credit limit 1000,听说每月花250以上会伤信用,真的假的?
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q*d
16
其中有10个解放军是艾滋病感染者,
然后任务简化强奸100个古人..
然后人类就灭亡了

【在 d******o 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: dakandao (大熊宝宝), 信区: Military
: 标 题: 带了一万解放军精兵和装备回到战国时代结果更惨
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 19:45:19 2010, 美东)
: 回去后才发现带的都是精锐电子战部队,全是价值数亿的电磁干扰的设备 连一支老
: 套筒、汉阳造都冒得

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n*a
17
自律、平等、寬容、積極、慈悲、智慧、放下、遵守因果、少欲知足、利益他
人、無條件地奉獻等等。這些都是大乘佛法的教學內容。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://www.weibo.com/cichengluozhu
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A*s
18
早说了这种都是假的
说一次被人咬一次
给淘宝的托们跪了,别再来咬我了,请去咬楼主

【在 i**s 的大作中提到】
: 三四个月前买的,昨天用的时候invalid
: 难道也会过期吗?还是只能在中文office上用?

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v*a
19


cryoprotection

【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会

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K*t
20

那放脸盆里面 拿大勺子舀出来!!

【在 b*******t 的大作中提到】
: 大厨说没有腔调
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s*g
21
真的
但是是说statement balance
你要是花了500还掉400 然后才出statement 显示账单为100
那啥事儿都没有

【在 l*****n 的大作中提到】
: 比如credit limit 1000,听说每月花250以上会伤信用,真的假的?
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R*a
22
艾滋病不至于让人类灭亡啊

【在 q*d 的大作中提到】
: 其中有10个解放军是艾滋病感染者,
: 然后任务简化强奸100个古人..
: 然后人类就灭亡了

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n*a
23
學佛以後,可以找到人生的方向、奮鬥的目標、生存的意義。每一天都能過得
很充實,除了物質生活以外,還可以享受來自心靈的快樂,擁有積極的人生觀和光明的
前途。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://weibo.com/cichengluozhu
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z*l
24

还好没买

【在 A*****s 的大作中提到】
: 早说了这种都是假的
: 说一次被人咬一次
: 给淘宝的托们跪了,别再来咬我了,请去咬楼主

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l*z
25
赞专业!

cryoprotection

【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会

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b*t
26
LOL

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 那放脸盆里面 拿大勺子舀出来!!

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C*n
27
不要在听jb说了。如果你care,自己搞清楚。
avatar
q*d
28
那是现在

【在 R***a 的大作中提到】
: 艾滋病不至于让人类灭亡啊
avatar
s*o
29
Office和Windows的都买过四五个,用到现在都没出过什么问题。第一次使用的时候可
以在线激活,之后重装系统什么的都需要电话激活。
买过一个Office 2011的码,放了一个多月才用,激活不了,联系卖家又换了一个,激
活了。
avatar
s*r
30
太感谢了。
我就是收集tissue作染色。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,
是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。

Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。

【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会

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K*t
31

看谁还说没有腔调?!!

【在 b*******t 的大作中提到】
: LOL
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o*a
32
不一定是statement balance的,各个银行提交balance记录的时间不一样,如果没记错
的话,Chase好像是在statement date的14天前提交。理论上在那个时候只要keep low
balance就可以了。但个人觉得最好还是尽量让oustanding balance保持得比较低,一
花比较大的就马上pay。如果用external account还过去的话,就不要等那个balance出
来再pay,可以直接push进去。
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R*a
33
古时候更不容易了啊。少了一个输血传染和公用注射器这个大途径啊

【在 q*d 的大作中提到】
: 那是现在
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A*s
34
我从网上找的不花钱的码子也能激活,能激活就算正版了?
不是正版,还花钱,图个啥?

【在 s*****o 的大作中提到】
: Office和Windows的都买过四五个,用到现在都没出过什么问题。第一次使用的时候可
: 以在线激活,之后重装系统什么的都需要电话激活。
: 买过一个Office 2011的码,放了一个多月才用,激活不了,联系卖家又换了一个,激
: 活了。

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l*i
35
肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz

【在 s******r 的大作中提到】
: 太感谢了。
: 我就是收集tissue作染色。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
: 话,
: 是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
:
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织

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b*t
36
伙伙你奔一个给大家看看神马叫腔调

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 看谁还说没有腔调?!!

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u*n
37
不是我多消费银行才有的赚吗?
avatar
q*d
38
你是对的,不过原因不是因为这个,
据说有一定比例的人根本不会感染

【在 R***a 的大作中提到】
: 古时候更不容易了啊。少了一个输血传染和公用注射器这个大途径啊
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s*o
39
可能还是懒吧... 花了10分钟google到的激活码都激活不了,然后就掏钱了
其实花的钱也可以忽略不计,少吃一个sub够买一堆激活码了
国内买盗版碟不还得花几块钱么

【在 A*****s 的大作中提到】
: 我从网上找的不花钱的码子也能激活,能激活就算正版了?
: 不是正版,还花钱,图个啥?

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s*r
40
石蜡应该不合适,有人说LacZ不能耐受有机溶剂。

肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz

【在 l**i 的大作中提到】
: 肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz
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B*e
41
上次不是有个大厨说灌到那种靠挤的塑料瓶子里么?
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d*l
42
coask, 有没有官方的说法?

【在 u***n 的大作中提到】
: 不是我多消费银行才有的赚吗?
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l*e
43
那也就不能有1w个解放军回去了
变成了“外祖父悖论”

【在 q*d 的大作中提到】
: 其中有10个解放军是艾滋病感染者,
: 然后任务简化强奸100个古人..
: 然后人类就灭亡了

avatar
l*i
44
我用其它组织做过 没问题的
先x-gal染色,再固定包埋切片

【在 s******r 的大作中提到】
: 石蜡应该不合适,有人说LacZ不能耐受有机溶剂。
:
: 肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz

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K*5
45
扒出来以后有个瓶颈啊 上面还有个拧下来的盖子
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z*e
46
是的,一方面银行希望你花钱,完全没有balance和还款记录是负面影响。
但是另一方面,你借债越多,银行风险越高,所以balance占credit limit高于某个百
分比也是负面影响。
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s*r
47
我明白你的意思,
我说的是染色切好的片子,不是先染再切。

我用其它组织做过 没问题的
先x-gal染色,再固定包埋切片

【在 l**i 的大作中提到】
: 我用其它组织做过 没问题的
: 先x-gal染色,再固定包埋切片

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K*t
48

等我先去买个脸盆!!

【在 b*******t 的大作中提到】
: 伙伙你奔一个给大家看看神马叫腔调
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x*n
49
如果只有一个账号,当然是真的。
revolving account,比如2个账号,1k和9k,花了3k,就是3k除以10k=30%,25%-50%,
不扣分也不加分。低于25%,加分。
avatar
l*z
50
我们一般先Lac-Z 染色,再石蜡包埋切片。。。

【在 l**i 的大作中提到】
: 肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz
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b*t
51
好!!

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 等我先去买个脸盆!!

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M*s
52
先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。
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g*a
53
还是会漏啊...
可能是我没拔好?

【在 K********5 的大作中提到】
: 扒出来以后有个瓶颈啊 上面还有个拧下来的盖子
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s*r
54
谢谢,大包子奉上。
还有一个小疑问,切好的片子可以直接-80C保存吧,不用先室温Dry吧。

先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。

【在 M******s 的大作中提到】
: 先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
: 续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
: 和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
: 所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
: 织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的

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g*a
55
实在不行只能这样了

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 等我先去买个脸盆!!

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M*s
56
要室温 air dry, 1 到2h 就可以,否则可能会有冰晶,形态会破坏掉
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K*t
57

恩呢~我一直用油瓶的 因为撒了实在是太不好清理了~=)

【在 g****a 的大作中提到】
: 实在不行只能这样了
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M*s
58
我们用室温真空, 10分钟就好
普通air dry, 薄片30分,厚片1小时,振动机切片2小时,你这个半到一小时
avatar
b*t
59
你不是不做饭么。。

【在 K******t 的大作中提到】
:
: 恩呢~我一直用油瓶的 因为撒了实在是太不好清理了~=)

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A*0
60
赞专业!赞耐心!大赞!

cryoprotection

【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会

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s*r
62
再次感谢啊。

我们用室温真空, 10分钟就好
普通air dry, 薄片30分,厚片1小时,振动机切片2小时,你这个半到一小时

【在 M******s 的大作中提到】
: 我们用室温真空, 10分钟就好
: 普通air dry, 薄片30分,厚片1小时,振动机切片2小时,你这个半到一小时

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S*9
63
绝对专业
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M*5
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