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学术贴:关于microarray analysis样品,统计意义和实际上,哪种方法更好?
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学术贴:关于microarray analysis样品,统计意义和实际上,哪种方法更好?# Biology - 生物学
g*0
1
实际情况是:
我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个
合并成3个呢?还是随机选3个?
所有的样品都已经预检测过,都没问题。
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s*s
2
没做过array,就瞎说。统计上当然合并了好,实际上还是随便挑三个吧,
否则MM里面还要墨迹半天

【在 g****0 的大作中提到】
: 实际情况是:
: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个
: 合并成3个呢?还是随机选3个?
: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。

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T*t
3
如果做mechanism 最好不要合并,用individual sample做,可以random选三个样本,
这样发文章比较好;如果做biomarker research,可以合并。
如果合并了,不管是合并两个也好,三个也好,都是pooled sample,没有区别

【在 g****0 的大作中提到】
: 实际情况是:
: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个
: 合并成3个呢?还是随机选3个?
: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。

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g*0
4
请问为什么统计上合并会好?因为降低了variation吗?
MM是什么?

【在 s******s 的大作中提到】
: 没做过array,就瞎说。统计上当然合并了好,实际上还是随便挑三个吧,
: 否则MM里面还要墨迹半天

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g*0
5
是想找mechanism。 为什么用individual samples好?为什么对发文章好?因为好做统
计吗?

【在 T**********t 的大作中提到】
: 如果做mechanism 最好不要合并,用individual sample做,可以random选三个样本,
: 这样发文章比较好;如果做biomarker research,可以合并。
: 如果合并了,不管是合并两个也好,三个也好,都是pooled sample,没有区别

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T*t
6
如果是几个individual在一组,那么它们就是biological replicates
生物之间存在biological variation(个体差异)
如果你pool了,就看不到这样的差异
这个问题你应该弄明白
设计的实验的时候 应该有biological replicates和technique replicates

【在 g****0 的大作中提到】
: 是想找mechanism。 为什么用individual samples好?为什么对发文章好?因为好做统
: 计吗?

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K*4
7
随机各选3个
不要混合,
不要忘记了要留些RNA作 realtime PCR. 这样就是 6 control,6 treatment。刚刚够
吧。

【在 g****0 的大作中提到】
: 实际情况是:
: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个
: 合并成3个呢?还是随机选3个?
: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。

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c*g
8
没错。
microarray技术已经很成熟了,technical variation都很小。如果你只能做三个,两
两pool是最好的。这样也是biological replicates,只要pool和pool之间没有相同的
个体。

【在 g****0 的大作中提到】
: 请问为什么统计上合并会好?因为降低了variation吗?
: MM是什么?

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g*0
9
谢谢提醒,这些RNA样品是用realtime pcr检验过的(已知下游),所以已经留了cDNA
了。

【在 K**4 的大作中提到】
: 随机各选3个
: 不要混合,
: 不要忘记了要留些RNA作 realtime PCR. 这样就是 6 control,6 treatment。刚刚够
: 吧。

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g*0
10
是的,我不打算作technical duplicates。

【在 c*****g 的大作中提到】
: 没错。
: microarray技术已经很成熟了,technical variation都很小。如果你只能做三个,两
: 两pool是最好的。这样也是biological replicates,只要pool和pool之间没有相同的
: 个体。

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c*g
11
你听我的,两两pool。我可以肯定的说统计上,这个是比随机选三个更好的设计,你的
统计power要大不少。原因就是你讲的,variation减小了。

【在 g****0 的大作中提到】
: 是的,我不打算作technical duplicates。
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d*y
12
microarray sucks.用RNAseq吧
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g*0
13
能否展开说说RNAseq?好在哪里?有推荐的公司吗?测6个样品(3X2组),要花多少钱?
我听说不同的样品之间定量不好,是吗?

【在 d***y 的大作中提到】
: microarray sucks.用RNAseq吧
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