z*m
2 楼
我是一个冷漠的人，不相信爱情，却总在为别人的爱情感动流泪。
我不喜欢别人试图走进我的心，彼此毫无瓜葛的时候，我会肆无忌惮的跟他们疯玩，可
是一旦感觉彼此的关系开始改变时，我都会及时抽身，远离。
朋友说，你是不是受过什么伤害？为什么总是这么戒备？
我无言，不知道是从什么时候起，我不相信爱情，即使我从来没有过爱情，却不再相信
爱情。
可是我总在别人的美好爱情面前驻足，流泪。
读《情断西藏》，坐在电脑前，泪流满面，我是一个感性的人，常常会对着文字流泪，
会在电影曲终人散时任泪水滑落。
大家都为他们摩卡和散兵的爱情唏嘘流泪，我却为他们感到伤悲。
再美丽的爱情，却只存活了七天，生命消失了，爱情也变成了悲剧。
三毛曾经说过：“感谢上天，今日活着的是我，痛着的也是我，如果叫荷西来忍受这一
分有一分钟的长夜，那我是万万不肯的。幸好这些都没有轮到他，要是他像我这样的活
下去，那么我拼了命也要跟上帝争了回来换他。”
为他们这样的爱情感动，却不希望自己遇见这样的爱情，太痛苦的活着，不如一片空白
的活着，抱着回忆过一生，不如失忆的过一生。
摩卡又何曾不是，七天的一见钟情换来了一生的悲伤绝望，不值得。
所以我宁愿这一生都不遇见爱情，平平淡淡，过我自己的生活。
我不喜欢别人试图走进我的心，彼此毫无瓜葛的时候，我会肆无忌惮的跟他们疯玩，可
是一旦感觉彼此的关系开始改变时，我都会及时抽身，远离。
朋友说，你是不是受过什么伤害？为什么总是这么戒备？
我无言，不知道是从什么时候起，我不相信爱情，即使我从来没有过爱情，却不再相信
爱情。
可是我总在别人的美好爱情面前驻足，流泪。
读《情断西藏》，坐在电脑前，泪流满面，我是一个感性的人，常常会对着文字流泪，
会在电影曲终人散时任泪水滑落。
大家都为他们摩卡和散兵的爱情唏嘘流泪，我却为他们感到伤悲。
再美丽的爱情，却只存活了七天，生命消失了，爱情也变成了悲剧。
三毛曾经说过：“感谢上天，今日活着的是我，痛着的也是我，如果叫荷西来忍受这一
分有一分钟的长夜，那我是万万不肯的。幸好这些都没有轮到他，要是他像我这样的活
下去，那么我拼了命也要跟上帝争了回来换他。”
为他们这样的爱情感动，却不希望自己遇见这样的爱情，太痛苦的活着，不如一片空白
的活着，抱着回忆过一生，不如失忆的过一生。
摩卡又何曾不是，七天的一见钟情换来了一生的悲伤绝望，不值得。
所以我宁愿这一生都不遇见爱情，平平淡淡，过我自己的生活。
p*c
3 楼
【 以下文字转载自 shopping 讨论区 】
发信人: phucc (粉蒸排骨), 信区: shopping
标 题: 再问thinkpad系统激活的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sun May 27 01:41:27 2012, 美东)
我的是T420，非dos机，自带win7 home premium
以前的硬盘被我自己搞坏了，自己换了块硬盘，然后重新装了网上下载的
win 7 home premium，由于是 MSDN版本，我自己在网上下载了一个lenovo.xrm-ms的文
件，照网上的做法加载了联想oem信息，然后用的key是我机器背后的那个key，为什么
还是不能激活呢？谢谢
发信人: phucc (粉蒸排骨), 信区: shopping
标 题: 再问thinkpad系统激活的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sun May 27 01:41:27 2012, 美东)
我的是T420，非dos机，自带win7 home premium
以前的硬盘被我自己搞坏了，自己换了块硬盘，然后重新装了网上下载的
win 7 home premium，由于是 MSDN版本，我自己在网上下载了一个lenovo.xrm-ms的文
件，照网上的做法加载了联想oem信息，然后用的key是我机器背后的那个key，为什么
还是不能激活呢？谢谢
f*8
4 楼
夫妻店，真是不好呆。
在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
(其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
(其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
d*r
5 楼
其实只能说没有邓紫棋的难听，总的来说都难听。
【在 d*****0 的大作中提到】
: 说明选歌很重要啊！
【在 d*****0 的大作中提到】
: 说明选歌很重要啊！
c*f
6 楼
抱抱 我现在的感觉和你一样
不敢用力去爱了
平平淡淡就是福
【在 z*****m 的大作中提到】
: 我是一个冷漠的人，不相信爱情，却总在为别人的爱情感动流泪。
: 我不喜欢别人试图走进我的心，彼此毫无瓜葛的时候，我会肆无忌惮的跟他们疯玩，可
: 是一旦感觉彼此的关系开始改变时，我都会及时抽身，远离。
: 朋友说，你是不是受过什么伤害？为什么总是这么戒备？
: 我无言，不知道是从什么时候起，我不相信爱情，即使我从来没有过爱情，却不再相信
: 爱情。
: 可是我总在别人的美好爱情面前驻足，流泪。
: 读《情断西藏》，坐在电脑前，泪流满面，我是一个感性的人，常常会对着文字流泪，
: 会在电影曲终人散时任泪水滑落。
: 大家都为他们摩卡和散兵的爱情唏嘘流泪，我却为他们感到伤悲。
不敢用力去爱了
平平淡淡就是福
【在 z*****m 的大作中提到】
: 我是一个冷漠的人，不相信爱情，却总在为别人的爱情感动流泪。
: 我不喜欢别人试图走进我的心，彼此毫无瓜葛的时候，我会肆无忌惮的跟他们疯玩，可
: 是一旦感觉彼此的关系开始改变时，我都会及时抽身，远离。
: 朋友说，你是不是受过什么伤害？为什么总是这么戒备？
: 我无言，不知道是从什么时候起，我不相信爱情，即使我从来没有过爱情，却不再相信
: 爱情。
: 可是我总在别人的美好爱情面前驻足，流泪。
: 读《情断西藏》，坐在电脑前，泪流满面，我是一个感性的人，常常会对着文字流泪，
: 会在电影曲终人散时任泪水滑落。
: 大家都为他们摩卡和散兵的爱情唏嘘流泪，我却为他们感到伤悲。
p*n
7 楼
没看懂
l*6
8 楼
Apple vs orange
x*2
9 楼
没看出有说你不好的意思啊
有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
一点电还舍不得用实验室关门得了
有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
一点电还舍不得用实验室关门得了
d*0
10 楼
起码听的懂她在唱啥
【在 d********r 的大作中提到】
: 其实只能说没有邓紫棋的难听，总的来说都难听。
【在 d********r 的大作中提到】
: 其实只能说没有邓紫棋的难听，总的来说都难听。
f*8
11 楼
我在摇tube,老板娘以为我在摇plates (长E. coli的），老板娘就跟老板报告了，老板
就问我是不是在 shaking plates
【在 p****n 的大作中提到】
: 没看懂
就问我是不是在 shaking plates
【在 p****n 的大作中提到】
: 没看懂
g*1
12 楼
呵呵，跟泡沫一个味道。无病呻吟
f*8
13 楼
是没有说我我不好，可是还是感觉很不舒服。这种应该是小事吧，有时大家都是混用的
，有人在摇管子，要一起用，只能也一起摇板子了。没必要报告老板，老板再来发问吧
我就是有些觉得，他们觉得我是那种很不会做实验的。怕把实验做坏了，还浪费试剂。
反正实验室特别节省。
【在 x**2 的大作中提到】
: 没看出有说你不好的意思啊
: 有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
: 一点电还舍不得用实验室关门得了
，有人在摇管子，要一起用，只能也一起摇板子了。没必要报告老板，老板再来发问吧
我就是有些觉得，他们觉得我是那种很不会做实验的。怕把实验做坏了，还浪费试剂。
反正实验室特别节省。
【在 x**2 的大作中提到】
: 没看出有说你不好的意思啊
: 有的话你把原因和老板说清楚应该就没事了吧？
: 一点电还舍不得用实验室关门得了
l*l
14 楼
你们品味太low。邓紫棋虽然也low，但是这首完爆春哥。
s*y
15 楼
可能是因为你是新手，他们不放心你的实验技能吧。
应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
一般来说应该就会好一些。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
一般来说应该就会好一些。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
d*r
16 楼
是不是真唱的原因， 这两首歌都很难听。 春哥的唱的不怎么样， 但是至少舞台做的
很好， 个人造型也是迄今最大的突破， 普通话也比邓的强多了， 总统还是要好一些
的。
没有酬金显然是邓紫棋失败的最大原因， 这个作品和我是歌手里真是差的太远了， 从
唱到舞台就是一个粗陋的无底线，态度极差。
【在 l*****l 的大作中提到】
: 你们品味太low。邓紫棋虽然也low，但是这首完爆春哥。
很好， 个人造型也是迄今最大的突破， 普通话也比邓的强多了， 总统还是要好一些
的。
没有酬金显然是邓紫棋失败的最大原因， 这个作品和我是歌手里真是差的太远了， 从
唱到舞台就是一个粗陋的无底线，态度极差。
【在 l*****l 的大作中提到】
: 你们品味太low。邓紫棋虽然也low，但是这首完爆春哥。
p*n
17 楼
哦，明白了
直接跟丫说没有啊，没看到有人摇plate啊
这种钉子碰几回，丫就没胃口了
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我在摇tube,老板娘以为我在摇plates (长E. coli的），老板娘就跟老板报告了，老板
: 就问我是不是在 shaking plates
直接跟丫说没有啊，没看到有人摇plate啊
这种钉子碰几回，丫就没胃口了
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我在摇tube,老板娘以为我在摇plates (长E. coli的），老板娘就跟老板报告了，老板
: 就问我是不是在 shaking plates
g*e
18 楼
邓紫棋技术上肯定完爆春哥。
但自己写歌是真不行
【在 l*****l 的大作中提到】
: 你们品味太low。邓紫棋虽然也low，但是这首完爆春哥。
但自己写歌是真不行
【在 l*****l 的大作中提到】
: 你们品味太low。邓紫棋虽然也low，但是这首完爆春哥。
f*8
19 楼
他们就是担心我不懂干活乱做实验，把agar plate放进去摇。就是不相信人，处处察看
。还察看得不清楚。
【在 s******y 的大作中提到】
: 可能是因为你是新手，他们不放心你的实验技能吧。
: 应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
: 实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
: 我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
: 稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
: 一般来说应该就会好一些。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
。还察看得不清楚。
【在 s******y 的大作中提到】
: 可能是因为你是新手，他们不放心你的实验技能吧。
: 应该不是因为省电的问题，实验室再省也不会不开shaker, 那点电钱相对于
: 实验室材料的钱和你的工资来说简直就什么都不是。
: 我猜他们应该是担心你不懂干活乱做实验，把agar plate （？） 放进去摇。
: 稍微解释一下就好了。等你一些初步结果出来之后，他们知道你是能干活的人，
: 一般来说应该就会好一些。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
s*y
20 楼
你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
我可能就少走很多弯路了。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 他们就是担心我不懂干活乱做实验，把agar plate放进去摇。就是不相信人，处处察看
: 。还察看得不清楚。
一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
我可能就少走很多弯路了。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 他们就是担心我不懂干活乱做实验，把agar plate放进去摇。就是不相信人，处处察看
: 。还察看得不清楚。
C*e
21 楼
可以展开说说为什么事sodium azide的问题么？
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
s*y
22 楼
因为sodium azide 会抑制 HRP 的活性。
不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 可以展开说说为什么事sodium azide的问题么？
不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 可以展开说说为什么事sodium azide的问题么？
C*e
23 楼
多谢
我可能也犯过一样的错误
我还是用HRP和AP的
【在 s******y 的大作中提到】
: 因为sodium azide 会抑制 HRP 的活性。
: 不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
我可能也犯过一样的错误
我还是用HRP和AP的
【在 s******y 的大作中提到】
: 因为sodium azide 会抑制 HRP 的活性。
: 不过现在大家都用红外荧光二抗了，反而就没有这个问题了。
s*y
24 楼
如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
想反复用）。
后来我就再也不重复用二抗了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 多谢
: 我可能也犯过一样的错误
: 我还是用HRP和AP的
而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
想反复用）。
后来我就再也不重复用二抗了。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 多谢
: 我可能也犯过一样的错误
: 我还是用HRP和AP的
n*k
25 楼
Ding一下，在我朋友实验室带一阵子来，新手（甚至是薄厚）那叫一个浪费！有些简直
是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
爽的，测序太耗钱的说
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
爽的，测序太耗钱的说
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
n*k
26 楼
你是真穷。。。不过我其实也回收过二抗，有时越用越干净。。。你以前最组化很少吧
，产品说明上有警告的。。。
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
，产品说明上有警告的。。。
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
C*e
27 楼
没用重复用过2抗
不过多谢提醒
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
不过多谢提醒
【在 s******y 的大作中提到】
: 如果非要加，就只能加在一抗，而且必须额外多洗几次。
: 而且那时候我很傻，连二抗都加了（因为我是穷出身，主动想为老板省钱，
: 想反复用）。
: 后来我就再也不重复用二抗了。
s*y
28 楼
我在研究生院的时候从来没有做过western blot...
细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
会干净一些吧？
【在 n********k 的大作中提到】
: 你是真穷。。。不过我其实也回收过二抗，有时越用越干净。。。你以前最组化很少吧
: ，产品说明上有警告的。。。
细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
会干净一些吧？
【在 n********k 的大作中提到】
: 你是真穷。。。不过我其实也回收过二抗，有时越用越干净。。。你以前最组化很少吧
: ，产品说明上有警告的。。。
f*8
29 楼
不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
【在 s******y 的大作中提到】
: 你是不是刚进实验室？如果是的话，忍一阵子吧。
: 一般都要经过这个阶段的。我以前刚进实验室的时候我老板恨不得盯着我用pipet,
: 一开始也是有点不爽，但是后来还是从她那里学到不少小窍门，还是很有用的。
: 相反，我第一个博士后的老板是那种三不管的，把我往实验室一扔自生自灭那种，
: 虽然貌似自由，但是后来让我挣扎了很久，很多东西我是非常久之后才发现自己
: 做错的了。比方说那时候在第一个老板那里用的是牛奶，但是觉得一抗太贵，
: 我很自觉的把一抗存起来用，然后很傻很想当然的往里面加了点sodium azide,
: 结果western blot 的结果总是抽风，时而好时而不好，什么一抗二抗的浓度
: 我调了又调，死活查不出原因。后来过了很久，才发现是这个azide的问题。
: 如果老板对我多关心一点，而不是简单的让我自己去调一抗二抗的浓度，
C*e
30 楼
我也是从个比较比较节省的实验室出来的
以前连用gel code blue染胶倒多一点老板都会说
现在实验室太浪费了
让我很不适应
但是我又不是老板
没有立场指手划脚
【在 n********k 的大作中提到】
: Ding一下，在我朋友实验室带一阵子来，新手（甚至是薄厚）那叫一个浪费！有些简直
: 是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
: 室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
: 不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
: 醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
: 爽的，测序太耗钱的说
以前连用gel code blue染胶倒多一点老板都会说
现在实验室太浪费了
让我很不适应
但是我又不是老板
没有立场指手划脚
【在 n********k 的大作中提到】
: Ding一下，在我朋友实验室带一阵子来，新手（甚至是薄厚）那叫一个浪费！有些简直
: 是胡搞，有我朋友的责任，他大实验室呆久了，太hands off,又太忙 。在我薄厚实验
: 室也存在这样的问题。。。细心和实验能力强的中国老板可能都会注意到这一点，相反
: 不少老外不是NICE，而是他们压根自己做学生，薄厚就那样。。。我在前三年时不时提
: 醒老板注意别太浪费。。。她最近两年真是好多了，钱多了却知道计算着过了，我很不
: 爽的，测序太耗钱的说
s*y
31 楼
啊？那就有点比较micromanagment 了。同情你一下。。。
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
n*k
32 楼
组化做信号耳机放大是也用hrp 的
【在 s******y 的大作中提到】
: 我在研究生院的时候从来没有做过western blot...
: 细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
: 常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
: 另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
: 会干净一些吧？
【在 s******y 的大作中提到】
: 我在研究生院的时候从来没有做过western blot...
: 细胞组化倒是常作，但是azide 并不影响抗体结合，所以immunochemistry 里面
: 常常用它的，所以我当时就把这个习惯带到western blot 里去了。
: 另外，二抗并不是越用越干净吧，我猜其实是越用越弱了，然后弱的信号看起来都
: 会干净一些吧？
l*1
33 楼
你的汉字输入 就这样了 还海归同济啊
组化做信号耳机(二次) 放大是也用hrp 的?
【在 n********k 的大作中提到】
: 组化做信号耳机放大是也用hrp 的
组化做信号耳机(二次) 放大是也用hrp 的?
【在 n********k 的大作中提到】
: 组化做信号耳机放大是也用hrp 的
l*1
34 楼
下次再mean 你
就用法语回答她/他:
Je ne vois jamais qui secouent ce que les plaques avant agitation,
avez-vous voir des choses?
=i never see whom shaked that shaker plates before, did you see stuff?
from
//translate.google.fr/?hl=fr
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
就用法语回答她/他:
Je ne vois jamais qui secouent ce que les plaques avant agitation,
avez-vous voir des choses?
=i never see whom shaked that shaker plates before, did you see stuff?
from
//translate.google.fr/?hl=fr
郁闷
【在 f*********8 的大作中提到】
: 不算刚进，都一年半都多了，是薄厚，我以为他们觉得我还可以的啊 。反正越想越郁闷
f*8
35 楼
我今天又摇，她竟然把shaker停掉了，也不跟我说一下，太让人生气了。我明天还得摇
，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
tetracycline,
plates
,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
报告。真郁闷。
【在 f*********8 的大作中提到】
: 夫妻店，真是不好呆。
: 在做bacterial artificial chromosome constructs，实验室没人做过,大家都比较紧
: 张。我在筛clone,按照别人给的protocol,clone 长出来后，先挑在100微升的LB,长一
: 会，再分开几部分作functional test, pcr,之类的筛选。因为medium有tetracycline,
: 要避光，我就把含有colony的eppen tube放在盒子里，shaking,这样既避光，也方便。
: 然后，下午老板问我了这个问题，他说，老板娘告诉他，somebody is shaking plates
: (其实他们知道是我，因为用的是30度 shaker,就我在用，他们有时要避光的plates,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 这样的常识我还是知道的。就算一时糊涂，也是浪费一些电而已。在这个实验室，我已
: 经是小心小心再小心了。知道老板娘，什么都看在眼里。可是你别看错啊，还马上打报告。真郁闷。
n*k
36 楼
You shall talk to your boss--someone turned off the shaker while you were
doing experiments...Or email to the entirely lab saying you are doing blabla
blabla...pls don't turn off the shaker blablablaaa
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我今天又摇，她竟然把shaker停掉了，也不跟我说一下，太让人生气了。我明天还得摇
: ，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
: 跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 报告。真郁闷。
doing experiments...Or email to the entirely lab saying you are doing blabla
blabla...pls don't turn off the shaker blablablaaa
【在 f*********8 的大作中提到】
: 我今天又摇，她竟然把shaker停掉了，也不跟我说一下，太让人生气了。我明天还得摇
: ，我得找机会给她看看，我里面摇得是eppen tube,是管子，不是agar plates. 我昨天
: 跟老板说了，难道她还以为我撒谎？真是令人发指。
:
: tetracycline,
: plates
: ,也是放在盒子里，在放在这个shaker,因为没有另外的30度incubator）
: 报告。真郁闷。
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