g*j
2 楼
正在构建一个质粒，挺简单，就是把这个质粒上的gfp换成同样大小的dsRed,质粒的骨
干不变。
连接，转化以后，有不少菌落。
第一天挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度100ug/ml.结果只长了一个。试剂盒提质粒，
solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，跑胶
，没质粒。
第二天，又挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度50ug/ml。4个都长了，试剂盒提质粒。同
样，solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，
跑胶，都有质粒。质粒大小和原质粒dimer 一样大。单切，跑胶，3个切不开，1个切开
后和原质粒单切大小一样。更加确定是形成dimer了。
问题一，为啥会形成dimer呢？
问题二，我是重新做连接，转化呢？还是把那个能切开的切一下，然后稀释，连接，再
转化呢？
干不变。
连接，转化以后，有不少菌落。
第一天挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度100ug/ml.结果只长了一个。试剂盒提质粒，
solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，跑胶
，没质粒。
第二天，又挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度50ug/ml。4个都长了，试剂盒提质粒。同
样，solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，
跑胶，都有质粒。质粒大小和原质粒dimer 一样大。单切，跑胶，3个切不开，1个切开
后和原质粒单切大小一样。更加确定是形成dimer了。
问题一，为啥会形成dimer呢？
问题二，我是重新做连接，转化呢？还是把那个能切开的切一下，然后稀释，连接，再
转化呢？
i*e
3 楼
我儿子估计都不敢吃＞＜
【在 b*******t 的大作中提到】
【在 b*******t 的大作中提到】
e*s
4 楼
觉得你提的更可能是Trash，不是你的目标质粒。
重新来吧。
【在 g***j 的大作中提到】
: 正在构建一个质粒，挺简单，就是把这个质粒上的gfp换成同样大小的dsRed,质粒的骨
: 干不变。
: 连接，转化以后，有不少菌落。
: 第一天挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度100ug/ml.结果只长了一个。试剂盒提质粒，
: solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，跑胶
: ，没质粒。
: 第二天，又挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度50ug/ml。4个都长了，试剂盒提质粒。同
: 样，solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，
: 跑胶，都有质粒。质粒大小和原质粒dimer 一样大。单切，跑胶，3个切不开，1个切开
: 后和原质粒单切大小一样。更加确定是形成dimer了。
重新来吧。
【在 g***j 的大作中提到】
: 正在构建一个质粒，挺简单，就是把这个质粒上的gfp换成同样大小的dsRed,质粒的骨
: 干不变。
: 连接，转化以后，有不少菌落。
: 第一天挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度100ug/ml.结果只长了一个。试剂盒提质粒，
: solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，跑胶
: ，没质粒。
: 第二天，又挑了4个菌落，长在LB里，amp浓度50ug/ml。4个都长了，试剂盒提质粒。同
: 样，solution3 以后离心，结果上清非常浑浊，白色的东西离不下去。继续做，提完，
: 跑胶，都有质粒。质粒大小和原质粒dimer 一样大。单切，跑胶，3个切不开，1个切开
: 后和原质粒单切大小一样。更加确定是形成dimer了。
v*e
5 楼
够恶，呵呵
【在 b*******t 的大作中提到】
【在 b*******t 的大作中提到】
g*j
6 楼
谢谢，是要重做。
另外我想问是不是dimer既有可能是形成一个大环，也有可能形成两个小环套在一起？
不过要是后者，感觉没法一直复制了啊。
【在 e****s 的大作中提到】
: 觉得你提的更可能是Trash，不是你的目标质粒。
: 重新来吧。
另外我想问是不是dimer既有可能是形成一个大环，也有可能形成两个小环套在一起？
不过要是后者，感觉没法一直复制了啊。
【在 e****s 的大作中提到】
: 觉得你提的更可能是Trash，不是你的目标质粒。
: 重新来吧。
c*u
7 楼
恩。我做过这个。杏仁上再涂点果胶更吓人。hiahia
【在 b*******t 的大作中提到】
【在 b*******t 的大作中提到】
c*1
8 楼
怕怕,好形象哦,我最怕老巫婆了
l*z
9 楼
这叫我如何下口----这是我的手啊！！！（同学喊我是巫婆！！）
l*z
10 楼
獭獭，上次是不是你说，烤牛/羊排的时候团几个锡纸团进去？还是妖说的？
昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
R*s
11 楼
其实是我说的
【在 l*****z 的大作中提到】
: 獭獭，上次是不是你说，烤牛/羊排的时候团几个锡纸团进去？还是妖说的？
: 昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
: 奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
【在 l*****z 的大作中提到】
: 獭獭，上次是不是你说，烤牛/羊排的时候团几个锡纸团进去？还是妖说的？
: 昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
: 奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
B*e
12 楼
卡哇伊涅～～～
b*t
13 楼
嘻嘻 蹭~~~
【在 l*****z 的大作中提到】
: 獭獭，上次是不是你说，烤牛/羊排的时候团几个锡纸团进去？还是妖说的？
: 昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
: 奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
【在 l*****z 的大作中提到】
: 獭獭，上次是不是你说，烤牛/羊排的时候团几个锡纸团进去？还是妖说的？
: 昨天试了一下，好主意！！谢谢你们呢！
: 奖励獭獭一个包子，嗖～～～～
b*t
14 楼
PIA!!
【在 R*****s 的大作中提到】
: 其实是我说的
【在 R*****s 的大作中提到】
: 其实是我说的
l*z
15 楼
pia~~~~~
罚你个包子！！
【在 R*****s 的大作中提到】
: 其实是我说的
罚你个包子！！
【在 R*****s 的大作中提到】
: 其实是我说的
b*t
16 楼
lol re!!
【在 l*****z 的大作中提到】
: pia~~~~~
: 罚你个包子！！
【在 l*****z 的大作中提到】
: pia~~~~~
: 罚你个包子！！
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