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急问一个克隆弱问题

急问一个克隆弱问题# Biology - 生物学

S*E2012-10-31 07:10

1 楼

虽然装成各种高大上，服装道具什么的
但是昨天听了一耳朵，那个刘涛的姑姑什么的，一开口就是北京胡同大妈啊，编剧一点
都没下功夫啊。哪有半点古装剧的味道，还不如二十年前粗糙烂制的《新白娘子传奇》
，起码人说话文绉绉的。

J*e2012-10-31 07:10

2 楼

老PC机器坏了，IDE硬盘没问题。新买了一台台式机，才发现现在的机器都是SATA了。
在ebay上搞了一个adaptor，插上发现还是不行。
好几年没折腾硬件了，菜鸟级的知识都不懂，是不是有什么简单的要领？

j*j2012-10-31 07:10

3 楼

which one is better?

C*42012-10-31 07:10

4 楼

我有一个酶，切一段双链DNA出来，最后得到的是5端缩进去三个碱基。希望把这个缩进
去的补回来，最好还能伸出去一些碱基。
能否清楚的说一下，到底怎么做？
非常感谢！

b*82012-10-31 07:10

5 楼

学美国古罗马戏，都说英式英语

i*t2012-10-31 07:10

6 楼

ide to usb
数据拷贝出来就好了

【在 J*e 的大作中提到】

: 老PC机器坏了，IDE硬盘没问题。新买了一台台式机，才发现现在的机器都是SATA了。
: 在ebay上搞了一个adaptor，插上发现还是不行。
: 好几年没折腾硬件了，菜鸟级的知识都不懂，是不是有什么简单的要领？

d*u2012-10-31 07:10

7 楼

个人觉得 HTC Radar

u*d2012-10-31 07:10

8 楼

擦！这是在寻找3-5 polymerase吗？不知有没有COW又招。

p*y2012-10-31 07:10

9 楼

服装道具高大上？
服装大红大紫，俗气得很，被批像淘宝买来的。

【在 S***E 的大作中提到】

: 虽然装成各种高大上，服装道具什么的
: 但是昨天听了一耳朵，那个刘涛的姑姑什么的，一开口就是北京胡同大妈啊，编剧一点
: 都没下功夫啊。哪有半点古装剧的味道，还不如二十年前粗糙烂制的《新白娘子传奇》
: ，起码人说话文绉绉的。

h*22012-10-31 07:10

10 楼

http://microcenter.com/product/390652/Masscool_21-port_SATA-ATA
插在PCIe槽的IDE扩展卡

【在 J*e 的大作中提到】

j*j2012-10-31 07:10

11 楼

这个710是不是跟N8一样用的金属外壳？还是塑料外壳？N8的做工真不错，就是软件真
是一坨啊

【在 d*********u 的大作中提到】

: 个人觉得 HTC Radar

C*42012-10-31 07:10

12 楼

晕。。是不是用没有3-5 exo活性的klenow就可以啊？能补齐，然后再加一个A？

【在 u**********d 的大作中提到】

: 擦！这是在寻找3-5 polymerase吗？不知有没有COW又招。

t*t2012-10-31 07:10

13 楼

这种插在旧机器上的PCIe卡支持启动吗？

【在 h**2 的大作中提到】

: http://microcenter.com/product/390652/Masscool_21-port_SATA-ATA
: 插在PCIe槽的IDE扩展卡

b*z2012-10-31 07:10

14 楼

FYI
http://www.phonegg.com/comparison/Comparez.php?p2=2133&p1=1949

j*x2012-10-31 07:10

15 楼

取决于你接下来具体想干吗了，我相信一般会有办法不需要先发明一个新型聚合酶，呵
呵

h*22012-10-31 07:10

16 楼

根据controller不同吧，可能可以
以前主板上的第三方芯片的硬盘控制器可以……but那是写在system bios里的
作从盘肯定没有问题

【在 t**t 的大作中提到】

: 这种插在旧机器上的PCIe卡支持启动吗？

v*s2012-10-31 07:10

17 楼

radar质感好得多，就是只有白色的

s*s2012-10-31 07:10

18 楼

不能把多出那段切掉么

【在 C********4 的大作中提到】

: 我有一个酶，切一段双链DNA出来，最后得到的是5端缩进去三个碱基。希望把这个缩进
: 去的补回来，最好还能伸出去一些碱基。
: 能否清楚的说一下，到底怎么做？
: 非常感谢！

t*t2012-10-31 07:10

19 楼

IDEtoUSB是最简单的。
或者找个老的IDE接口移动硬盘的盒子

【在 J*e 的大作中提到】

s*92012-10-31 07:10

20 楼

Lumia 710支持的频率多，T-Mobile和ATT的网都能用？

【在 b***z 的大作中提到】

: FYI
: http://www.phonegg.com/comparison/Comparez.php?p2=2133&p1=1949

u*d2012-10-31 07:10

21 楼

你的不是5'缩进么，klenow只能补5’突出的吧。加A我记得只有taq才可以，而且是加
在3’。T4 DNA polymerase好像可以把3’突出切掉，不过你要的是补平。

【在 C********4 的大作中提到】

: 晕。。是不是用没有3-5 exo活性的klenow就可以啊？能补齐，然后再加一个A？

t*t2012-10-31 07:10

22 楼

当从盘肯定是没问题。

【在 h**2 的大作中提到】

: 根据controller不同吧，可能可以
: 以前主板上的第三方芯片的硬盘控制器可以……but那是写在system bios里的
: 作从盘肯定没有问题

b*z2012-10-31 07:10

23 楼

710 是塑料壳，有一层软性的涂层，手感可以

w*e2012-10-31 07:10

24 楼

klenow works for your purpose.
no addition of " A"

【在 C********4 的大作中提到】

H*g2012-10-31 07:10

25 楼

Get a NEB catalog.

【在 C********4 的大作中提到】

a*a2012-10-31 07:10

26 楼

如果没理解错，你的意思是这样的吧
AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA
TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT
3" overhang是没有办法补的。
能做的就是用KOD plus之类的高保真PCR酶或者klenow把overhang切掉，然后直接连接
或者用普通PCR酶加A以后做TAclone
一般按照PCR体系不加primer， 95度hotstart5min，然后分别68/72度保温10min就可以
我是懒得用klenow的。。

b*r2012-10-31 07:10

27 楼

这种问题显然最简单的是电话NEB 客服

g*j2012-10-31 07:10

28 楼

还不如找个合适的载体插进去再切出来

s*n2012-10-31 07:10

29 楼

设计primer带有你要的酶切位点（能够使你的5‘伸出来），PCR扩增后再酶切

z*h2012-10-31 07:10

30 楼

Try this new technology. One day work.No kit needed.no colony PCR.
http://aem.asm.org/content/early/2011/12/16/AEM.07105-11.abstra