c*r
2 楼
正在做土壤古细菌鉴定，DNA已经提取出来了，现在用了一个文献的方法用巢式PCR扩增
16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
该是有古细菌DNA的。
我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
请教各位大仙，能否给我一点指导？
谢谢！
16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
该是有古细菌DNA的。
我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
请教各位大仙，能否给我一点指导？
谢谢！
A*0
3 楼
新的信里收到的胖子里面不写dd了，只写deposit 100 or more~
【在 p**********n 的大作中提到】
: 开户的要求，请问现在什么还算呢？amazon payment已经不算了，paypal算不算呢？
: 谢谢
【在 p**********n 的大作中提到】
: 开户的要求，请问现在什么还算呢？amazon payment已经不算了，paypal算不算呢？
: 谢谢
p*n
4 楼
古细菌这种狗东西皮尔厚馅儿小，你有没有用爆米花方法破裂细胞壁？
【在 c*********r 的大作中提到】
: 正在做土壤古细菌鉴定，DNA已经提取出来了，现在用了一个文献的方法用巢式PCR扩增
: 16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
: 该是有古细菌DNA的。
: 我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
: DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
: 请教各位大仙，能否给我一点指导？
: 谢谢！
【在 c*********r 的大作中提到】
: 正在做土壤古细菌鉴定，DNA已经提取出来了，现在用了一个文献的方法用巢式PCR扩增
: 16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
: 该是有古细菌DNA的。
: 我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
: DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
: 请教各位大仙，能否给我一点指导？
: 谢谢！
a*n
5 楼
how much bonus? 150?
【在 A**********0 的大作中提到】
: 新的信里收到的胖子里面不写dd了，只写deposit 100 or more~
【在 A**********0 的大作中提到】
: 新的信里收到的胖子里面不写dd了，只写deposit 100 or more~
c*r
6 楼
我用别的引物发现能P出来，现在的问题是为什么这个特异的引物对做不出来？好几篇
文献都用这个P出来了。加BSA，ACETAMIDE，各种方法我都试过了。
文献都用这个P出来了。加BSA，ACETAMIDE，各种方法我都试过了。
A*0
7 楼
嗯
【在 a*****n 的大作中提到】
: how much bonus? 150?
【在 a*****n 的大作中提到】
: how much bonus? 150?
c*r
8 楼
顺便问一下，什么是爆米花方法？
a*n
9 楼
帮我整一个
【在 A**********0 的大作中提到】
: 嗯
【在 A**********0 的大作中提到】
: 嗯
p*n
10 楼
铁罐子里加高压，然后“砰”...
【在 c*********r 的大作中提到】
: 顺便问一下，什么是爆米花方法？
【在 c*********r 的大作中提到】
: 顺便问一下，什么是爆米花方法？
A*0
11 楼
晚上回家给你发pdf
我已经扫描好了
【在 a*****n 的大作中提到】
: 帮我整一个
我已经扫描好了
【在 a*****n 的大作中提到】
: 帮我整一个
C*e
12 楼
你用通用引物p过么
出不出条带？
【在 c*********r 的大作中提到】
: 正在做土壤古细菌鉴定，DNA已经提取出来了，现在用了一个文献的方法用巢式PCR扩增
: 16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
: 该是有古细菌DNA的。
: 我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
: DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
: 请教各位大仙，能否给我一点指导？
: 谢谢！
出不出条带？
【在 c*********r 的大作中提到】
: 正在做土壤古细菌鉴定，DNA已经提取出来了，现在用了一个文献的方法用巢式PCR扩增
: 16SDNA，但是一直不成功。用别的文献方法，别的引物能够扩增出来条带，说明里面应
: 该是有古细菌DNA的。
: 我用的文献方法是：cindy H. Nakatsu (2000): soil community analysis using
: DGGE of 16S rDNA Polymerase Chain reaction products.
: 请教各位大仙，能否给我一点指导？
: 谢谢！
c*r
13 楼
我试过别的引物，出条带！
h*r
14 楼
用nanodrop看一下DNA浓度和质量，然后严格的控制加入的模板量。好像太多也不容易
出来，默认你是用kit提的DNA
仅供参考。
出来，默认你是用kit提的DNA
仅供参考。
c*r
15 楼
非常感谢你的建议！
A*e
16 楼
别的引物是啥引物？ 要不是古细菌特异引物， 十有八九扩出来的是真细菌。
g*j
17 楼
不保守？
换更短的引物？
换更短的引物？
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