postnatal小老鼠tamoxifen induce的问题 - 未名空间MITBBS历史存档

postnatal小老鼠tamoxifen induce的问题# Biology - 生物学

t*k2012-11-15 08:11

1 楼

最近在做postnatal小老鼠（大概p0-p4）tamoxifen induce，主要也是研究这个时期的
变化，然后发现有一堆问题。。。
这么小的老鼠，到底是对怀孕的母老鼠用药好呢，还是生出来以后ip好呢？我看到有文
献是对生出来以后的小鼠做ip，然后就试了这个方法，结果针头一出来，oil就滚滚的
出来了（在p10的老鼠里做过，没有这个问题），搞得极度郁闷。一是不知道到底打进
去没，二是这样的话很有可能污染cage，然后污染父母老鼠，搞得之后的后代都不敢用
了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢？
现在头也要大了，不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。

n*w2012-11-15 08:11

2 楼

唉给小小鼠ip。。。
当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的，我就试了一下，结果刷刷
的，小小鼠就给挤出来，最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时，sc不适用于
tamoxifen吧。。。
有些东西，就是得learn in a hard way...

t*k2012-11-15 08:11

3 楼

今天是诸事不宜啊，实验室和动物房之间跑了n趟，不是忘了这个就是忘了那个，然后
再又是tamoxifen这破事，感觉应该说服老板转向研究adult老鼠算了。。。。。

【在 n***w 的大作中提到】

: 唉给小小鼠ip。。。
: 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的，我就试了一下，结果刷刷
: 的，小小鼠就给挤出来，最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时，sc不适用于
: tamoxifen吧。。。
: 有些东西，就是得learn in a hard way...

G*e2012-11-15 08:11

4 楼

核酸是水溶性的，为什么要加有毒的DMSO?
你找错文献了

【在 n***w 的大作中提到】

: 唉给小小鼠ip。。。
: 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的，我就试了一下，结果刷刷
: 的，小小鼠就给挤出来，最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时，sc不适用于
: tamoxifen吧。。。
: 有些东西，就是得learn in a hard way...

z*u2012-11-15 08:11

5 楼

针头太粗了吧。。用最细的26G
要么就是嘴巴灌。给母鼠用造成流产的几率比较大，一死死一窝。
Tamoxifen这个技术真是设计的不好。谁整的哦。远不如doxy 诱导有效，安全。

【在 t******k 的大作中提到】

: 最近在做postnatal小老鼠（大概p0-p4）tamoxifen induce，主要也是研究这个时期的
: 变化，然后发现有一堆问题。。。
: 这么小的老鼠，到底是对怀孕的母老鼠用药好呢，还是生出来以后ip好呢？我看到有文
: 献是对生出来以后的小鼠做ip，然后就试了这个方法，结果针头一出来，oil就滚滚的
: 出来了（在p10的老鼠里做过，没有这个问题），搞得极度郁闷。一是不知道到底打进
: 去没，二是这样的话很有可能污染cage，然后污染父母老鼠，搞得之后的后代都不敢用
: 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢？
: 现在头也要大了，不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。

w*e2012-11-15 08:11

6 楼

从小鼠腿部和腹部交界处进针，用胰岛素注射针，非常细的那种。
多练习，很少流出来，我们以前天天做，没问题

【在 t******k 的大作中提到】

: 最近在做postnatal小老鼠（大概p0-p4）tamoxifen induce，主要也是研究这个时期的
: 变化，然后发现有一堆问题。。。
: 这么小的老鼠，到底是对怀孕的母老鼠用药好呢，还是生出来以后ip好呢？我看到有文
: 献是对生出来以后的小鼠做ip，然后就试了这个方法，结果针头一出来，oil就滚滚的
: 出来了（在p10的老鼠里做过，没有这个问题），搞得极度郁闷。一是不知道到底打进
: 去没，二是这样的话很有可能污染cage，然后污染父母老鼠，搞得之后的后代都不敢用
: 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢？
: 现在头也要大了，不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。

n*w2012-11-15 08:11

7 楼

BrdU在水里最多是10mg/ml...然后我用的剂量是100ug/g body weight....
所以得配高浓度的BrdU... 所以就需要用DMSO...

【在 G********e 的大作中提到】

: 核酸是水溶性的，为什么要加有毒的DMSO?
: 你找错文献了

t*k2012-11-15 08:11

8 楼

其实我用的针头是27的。。。
对我的话灌是最容易的了，让动物房的人做就行，就是小小鼠太小不知道能不能灌，妈
妈的话又有风险。。。

【在 z****u 的大作中提到】

: 针头太粗了吧。。用最细的26G
: 要么就是嘴巴灌。给母鼠用造成流产的几率比较大，一死死一窝。
: Tamoxifen这个技术真是设计的不好。谁整的哦。远不如doxy 诱导有效，安全。

t*k2012-11-15 08:11

9 楼

谢谢，我去试试看。

【在 w*e 的大作中提到】

: 从小鼠腿部和腹部交界处进针，用胰岛素注射针，非常细的那种。
: 多练习，很少流出来，我们以前天天做，没问题

s*r2012-11-15 08:11

10 楼

P1的小老鼠，可以直接打进胃里。

【在 t******k 的大作中提到】

: 最近在做postnatal小老鼠（大概p0-p4）tamoxifen induce，主要也是研究这个时期的
: 变化，然后发现有一堆问题。。。
: 这么小的老鼠，到底是对怀孕的母老鼠用药好呢，还是生出来以后ip好呢？我看到有文
: 献是对生出来以后的小鼠做ip，然后就试了这个方法，结果针头一出来，oil就滚滚的
: 出来了（在p10的老鼠里做过，没有这个问题），搞得极度郁闷。一是不知道到底打进
: 去没，二是这样的话很有可能污染cage，然后污染父母老鼠，搞得之后的后代都不敢用
: 了。但如果对怀孕的母鼠用药的话这个妈妈是不是只能用一次呢？
: 现在头也要大了，不知道大家有没有啥好主意啊。。。。。

t*k2012-11-15 08:11

11 楼

这么狂野的方法？！！

【在 s******r 的大作中提到】

: P1的小老鼠，可以直接打进胃里。

G*e2012-11-15 08:11

12 楼

你确定你用100ug/g？如果你用100ug/g，打一只20g的老鼠也就需要2mg吧，配在水里也
就需要200ul
难道你用100mg/g？这绝对是天价
如果我计算没错的话，那就是你错了，brdu配在水里注射非常容易

【在 n***w 的大作中提到】

: BrdU在水里最多是10mg/ml...然后我用的剂量是100ug/g body weight....
: 所以得配高浓度的BrdU... 所以就需要用DMSO...

n*w2012-11-15 08:11

13 楼

我没算错阿。。。
我确定我用100ug/g body weight。
我下次可以配在水里试一下。
谢谢。

【在 G********e 的大作中提到】

: 你确定你用100ug/g？如果你用100ug/g，打一只20g的老鼠也就需要2mg吧，配在水里也
: 就需要200ul
: 难道你用100mg/g？这绝对是天价
: 如果我计算没错的话，那就是你错了，brdu配在水里注射非常容易

z*u2012-11-15 08:11

14 楼

做啥分析哦。。BrdU要那么高的浓度？

n*w2012-11-15 08:11

15 楼

100ug/g浓度高吗？我就是看了文献里用了这个浓度，所以就上了，反正也work。。。
我就是看retinal cell proliferation...

【在 z****u 的大作中提到】

: 做啥分析哦。。BrdU要那么高的浓度？

t*k2012-11-15 08:11

16 楼

哎今天换了insulin注射器（30g）的还是都漏了，搞得动物房的工作人员都集体开会
讨论具体该咋办了。。。

D*a2012-11-15 08:11

17 楼

你打小奶鼠的话它妈也会去舔啊，还有大家互相吃粑粑，也会吸收tam的吧，当然吸收
得少点。

t*k2012-11-15 08:11

18 楼

那要咋办才好呀，我都有放弃做postnatal的冲动了

【在 D*a 的大作中提到】

: 你打小奶鼠的话它妈也会去舔啊，还有大家互相吃粑粑，也会吸收tam的吧，当然吸收
: 得少点。

t*k2012-11-15 08:11

19 楼

oh yeah 找到一片cell的文章他们是用sc给p0小鼠打tamoxifen的，准备明天去试试看
。。。

【在 n***w 的大作中提到】

: 唉给小小鼠ip。。。
: 当时看了paper说inject brdu (dissolved in dmso)是ip的，我就试了一下，结果刷刷
: 的，小小鼠就给挤出来，最后还是sc好使。。。不过我只要等一两个小时，sc不适用于
: tamoxifen吧。。。
: 有些东西，就是得learn in a hard way...

h*q2012-11-15 08:11

20 楼

温柔一点灌
Tip放嘴里，不插到胃里，找对位置了可以看到它drinking