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老鼠关节RNA提取# Biology - 生物学
s*c
1
找了那么长时间工作(两年多, 但是真正失业的时间并不长, 就是找不到正式的给
办H1的工作), 人生观越发消极了, 任何事情都不抱希望, 任何人都不相信。。
。。
也想过再找不到正式工作,就不再卖身中介公司做钟点工, 回家生娃算了,年纪也不
小了。可是又很不甘心,读了这么多年书, 到处打工混经验究竟是为什么呢。一旦回
家,估计几年都出不来,本来经验就不多, 也没身份(LG绿卡要排N年),再有大GAP
, 专业也不是热门,出来还能找的到工作么。 还是在消费很高的地方,一人养家压
力太大了。
郁闷ING, 上来树个洞。
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a*g
2
大家好,我在做老鼠关节炎模型,需要提取RNA,但是不理想。有没人做过这个可以分析
下经验的?谢谢我先把踝关节剪下 (长1cm左右),然后液氮冷冻,放-80保存。裂解
是用Roche的Megbead,RNA提取是按照Qiagen的纤维组织RNA提取Kit。没有做DNase消化
。用Agilent2100检测,很多样品只有很粗的一条带,在18s band附近,估计是genomic
DNA?
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f*4
3
骑着驴,随时准备着找马
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x*d
4
Qiagen Fibrous Tissue kit自带一个小的DNase kit,要做DNase digest的。你的RIN
多少? 也有可能是有降解。
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r*e
5
百无一用是书生
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a*g
6
最好的一个是8.4,很多都无法计算,只有一条带

RIN

【在 x*****d 的大作中提到】
: Qiagen Fibrous Tissue kit自带一个小的DNase kit,要做DNase digest的。你的RIN
: 多少? 也有可能是有降解。

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J*i
7
吐槽不是这么用的...
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p*y
8
RIN8.4的应该没什么问题
其他的应该就是RNA降解了吧
如果你只是做RT-PCR的话,可能还能用
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s*c
9
恩, 晕头了, 应该是 树个洞

【在 J*******i 的大作中提到】
: 吐槽不是这么用的...
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a*g
10
是能用,可是CT值比较高,30-40,这样RNA降解后的结果可信吗?
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f*7
11
感觉就是没事的时候还是要坚持学算法和数据结构,随时准备跳。
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x*d
12

一般RIN 7以上就可以了. 你这个只有一条带也有可能是Agilent的Chip有问题. 要是怕
降解就用RNA Later ICE试试.

【在 a*******g 的大作中提到】
: 最好的一个是8.4,很多都无法计算,只有一条带
:
: RIN

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h*d
13
我讨厌算法和数据结构...但除了这些又不知道能回答出什么
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G*h
14
平常心平常心,你主要是被身份给压住了,抛开身份作contractor虽然稳定性不强,经
验慢慢积累起来薪水可以很高。总会有柳暗花明的时候,到时候你就会觉得自己经历过
一些艰难,以后可以很自信处变不惊。
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q*d
15
别气馁,总算还是一家人在一起,钟点工比没工强,至少不会有gap。有的时候就是要
等机会的,说不定明天机会就来啦。
你现在还没娃,所以时间大把大把的都是自己的,可以做的事情很多,可以用好多时间
来学东西然后准备将来,等你真的有了娃,你就会觉得没时间干这个,干那个了,所以
好好珍惜。

GAP

【在 s***c 的大作中提到】
: 找了那么长时间工作(两年多, 但是真正失业的时间并不长, 就是找不到正式的给
: 办H1的工作), 人生观越发消极了, 任何事情都不抱希望, 任何人都不相信。。
: 。。
: 也想过再找不到正式工作,就不再卖身中介公司做钟点工, 回家生娃算了,年纪也不
: 小了。可是又很不甘心,读了这么多年书, 到处打工混经验究竟是为什么呢。一旦回
: 家,估计几年都出不来,本来经验就不多, 也没身份(LG绿卡要排N年),再有大GAP
: , 专业也不是热门,出来还能找的到工作么。 还是在消费很高的地方,一人养家压
: 力太大了。
: 郁闷ING, 上来树个洞。

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r*y
16
bless
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p*j
17
是挺难的,不过现在经济好点了,不要放弃
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w*z
18
趁着年轻,搞得动,快搞阿
俺有N个娃,最近复习了2个月,(天天等娃睡了,才能看书。要看那些十几年没看过的
算法题,也够痛苦的)好不容易换了工作,(工资涨了10%,title还降了一级)新公司
,有点忙。觉得老腰快不行了。(职业病)今天早上,腰疼发作,都疼得tmd吐了。
还是年轻好啊!趁着能折腾,快折腾。到老了,就什么都晚了。
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s*c
19
谢谢大家鼓励,我现在就是混一天算一天,再找找下家,这样的生活不知道什么时候能
到头。。。
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D*y
20
bless, bless and bless!
大家都说现在经济形势在变好
一定能找到工作的!
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c*e
21
我只是觉得绿卡太重要了
刚刚接了一recruiter的电话,一开始还兴高采烈地表示对我有兴趣,一听我要sponsor
,立马说现在多么地供大于求,然后跟我说88了。实在是心情低落到爆~~~~~~~~~
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