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有人做过potassium depletion 的实验吗?
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有人做过potassium depletion 的实验吗?# Biology - 生物学
G*s
1
rt。
看了几篇paper,是关于potassium depletion的。 其中potassium depletion buffer
的地方,我不太明白. 几篇paper中,buffer的组成是:Hepes, NaCL, CaCl2, MgCl2,
glucose (PH 7.4),对于不同的paper(都是HEp-2 cells),组成和concentration都
不不一样,比如有的不含MgCl2 和glucose,但共同点是都有Hepes这个buffer。其中一
篇paper解释加入CaCl2是因为他们实验中的某种protein binding需要Ca+,但关于其他
成分,没有说明。
我的问题是:如果我做一个不同cell line的实验,那么这个potassium depletion
buffer我应该怎么做?比如能用PBS代替Hepes吗?要怎么加入各种成分才能最大程度上
保持和普通实验的一致性呢?(普通实验就是incubated with growth medium, RPMI
1640)。
没有什么头绪,有点乱,让大家见笑了。谢谢!!!
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L*t
2
HEPES是缓冲,如果实验环境没有二氧化碳的话更有必要。普通的PBS里面含钾,肯定不
能用。除非你自己用磷酸钠和氯化钠配PBS
http://cshprotocols.cshlp.org/content/2007/4/pdb.rec10917
最简单的方法就是HBSS里用钠盐取代钾盐,对照组用普通的1x HBSS就行了。
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