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请教从mouse tissue里提蛋白做Western

请教从mouse tissue里提蛋白做Western# Biology - 生物学

w*q2013-09-04 07:09

1 楼

@好好的的8：能看见飞机啊不能算是隐形的吧
寂寞刀锋发表于10分钟前恩，这个还没刷隐形油漆呢。这种油漆可贵了，内部都要3
块钱一桶，对外得10多块呢。要想
给你刷隐身了得用50块以上。我有个朋友就以20多的高价在内部买了一桶，结果把自己
的一条腿给刷隐身了，更可怕的是
他忘买清除油漆的药水了，到现在他只好对人说自己截肢了。对了，这几年他一直在参
加残疾人运动会，成绩一直很好

g*n2013-09-04 07:09

2 楼

RT
HTC rezound，之前删除过一些verizon自家的垃圾app
现在导致OTA一升级就失败
提示
'Assert failed : apply_patch_check(" /system/app/kindle.apk", "9bba894dffe:
unknown command [2756cf50f5514ba2a1e622ffe335c",]
E:Error in /cache/fumo/otapkg.zip
(status 7)
install aborted'
之前也没有备份那些软件，现在还有的救吗

w*o2013-09-04 07:09

3 楼

目前的protocol是切一小块tissue放到lysis buffer里homogenize，超声，冰上裂解之
后离心取上清测蛋白浓度。存在的主要问题有两个：一是tissue里的脂类成分离心完会
在上面漂着，很难除干净；二是在取tissue的时候有时会混有血导致最后得到的不同
sample的lysate颜色不一致，干扰浓度的测定。请问大家有什么好的经验解决这两个问
题？或者有没有更好的protocol？目前主要在提取mouse mammary gland的tumor
tissue，非常感谢！

v*n2013-09-04 07:09

4 楼

这个问题导致无法ota升级之前就说过，用titanium freeze一下，ota的时候再解开就
行了
现在只能刷回最原始的状态然后一步一步升级了
或者如果你记得删了哪些，找到apk文件放到/system/app/里试试？

【在 g****n 的大作中提到】

: RT
: HTC rezound，之前删除过一些verizon自家的垃圾app
: 现在导致OTA一升级就失败
: 提示
: 'Assert failed : apply_patch_check(" /system/app/kindle.apk", "9bba894dffe:
: unknown command [2756cf50f5514ba2a1e622ffe335c",]
: E:Error in /cache/fumo/otapkg.zip
: (status 7)
: install aborted'
: 之前也没有备份那些软件，现在还有的救吗

s*i2013-09-04 07:09

5 楼

除去脂是非常难的（如果不用超速离心的话），我做过的就是加大体积，每次只取中
层，多离心几次。
出去血液比较简单，用心脏灌流术把血都洗掉就好了
操作方法就是把几十毫升ice-cold PBS 缓缓的从左心室用注射器打入，同时把右心房
用剪子剪断，把血液都冲出来。这种方法可以把绝大部分血细胞清除干净，但是对脾脏
无效，不知道为啥。

【在 w****o 的大作中提到】

: 目前的protocol是切一小块tissue放到lysis buffer里homogenize，超声，冰上裂解之
: 后离心取上清测蛋白浓度。存在的主要问题有两个：一是tissue里的脂类成分离心完会
: 在上面漂着，很难除干净；二是在取tissue的时候有时会混有血导致最后得到的不同
: sample的lysate颜色不一致，干扰浓度的测定。请问大家有什么好的经验解决这两个问
: 题？或者有没有更好的protocol？目前主要在提取mouse mammary gland的tumor
: tissue，非常感谢！

c*92013-09-04 07:09

6 楼

自己刷ROM好了。如果信官方的ROM，很可能会找到自己可刷的去掉垃圾的官ROM呢，还
省了自己删垃圾。

y*i2013-09-04 07:09

7 楼

不要用枪，改用1ml注射器带针头伸到脂层下面去上清可以取的很干净

【在 w****o 的大作中提到】

g*n2013-09-04 07:09

8 楼

现在官方版的clean rom好像还没出来

【在 c****9 的大作中提到】

: 自己刷ROM好了。如果信官方的ROM，很可能会找到自己可刷的去掉垃圾的官ROM呢，还
: 省了自己删垃圾。

w*o2013-09-04 07:09

9 楼

多谢！请问大家每次杀老鼠取tissue之前都做perfusion么？

【在 s*****i 的大作中提到】

: 除去脂是非常难的（如果不用超速离心的话），我做过的就是加大体积，每次只取中
: 层，多离心几次。
: 出去血液比较简单，用心脏灌流术把血都洗掉就好了
: 操作方法就是把几十毫升ice-cold PBS 缓缓的从左心室用注射器打入，同时把右心房
: 用剪子剪断，把血液都冲出来。这种方法可以把绝大部分血细胞清除干净，但是对脾脏
: 无效，不知道为啥。

g*n2013-09-04 07:09

10 楼

能直接到verizon店里找小二刷
然后自己再R O O T吗
网上的教程太烦乱了，不知道该follow哪个了

w*o2013-09-04 07:09

11 楼

good idea！多谢！

【在 y****i 的大作中提到】

: 不要用枪，改用1ml注射器带针头伸到脂层下面去上清可以取的很干净

s*i2013-09-04 07:09

12 楼

这个完全取决于你的实验目的啊，如果你发现血液干扰，当然要perfuse，如果无所谓
，当然怎么方便怎么来

【在 w****o 的大作中提到】

: 多谢！请问大家每次杀老鼠取tissue之前都做perfusion么？