求fat tissue 中提取蛋白protocol ）做western，谢谢# Biology - 生物学
j*x
1 楼
NIW 140, 大家的petition letter一般都几页？十几页？20多页？俺这8页是不是太少
了？
了？
K*R
2 楼
发现fat tissue 如果用裂解液直接煮不行，样品会很粘稠，上样后条带曝光很差。请
教大家有什么好方法吗？非常感谢
教大家有什么好方法吗？非常感谢
b*9
3 楼
using as necessary pages as you should. No rules.
e*s
4 楼
methanol percipitation?
b*M
5 楼
8 pages are perfect. average 7-12pages
K*R
6 楼
？ 这个是什么方法
y*i
7 楼
匀浆，4c离心半小时，弃沉淀弃浮油 取中间层
【在 K**R 的大作中提到】
: 发现fat tissue 如果用裂解液直接煮不行，样品会很粘稠，上样后条带曝光很差。请
: 教大家有什么好方法吗？非常感谢
【在 K**R 的大作中提到】
: 发现fat tissue 如果用裂解液直接煮不行，样品会很粘稠，上样后条带曝光很差。请
: 教大家有什么好方法吗？非常感谢
K*R
8 楼
谢谢您啊，我有两个问题，第一转速是多少？ 12000rcf？
另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解？
【在 y****i 的大作中提到】
: 匀浆，4c离心半小时，弃沉淀弃浮油 取中间层
另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解？
【在 y****i 的大作中提到】
: 匀浆，4c离心半小时，弃沉淀弃浮油 取中间层
y*i
9 楼
用台式离心机的最高转速， 12000够了
lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor（protease, phosphatase等等）
【在 K**R 的大作中提到】
: 谢谢您啊，我有两个问题，第一转速是多少？ 12000rcf？
: 另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解？
lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor（protease, phosphatase等等）
【在 K**R 的大作中提到】
: 谢谢您啊，我有两个问题，第一转速是多少？ 12000rcf？
: 另外直接加lysis buffer 半个小时4度离心 蛋白会不会降解？
K*R
10 楼
谢谢！
【在 y****i 的大作中提到】
: 用台式离心机的最高转速， 12000够了
: lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor（protease, phosphatase等等）
【在 y****i 的大作中提到】
: 用台式离心机的最高转速， 12000够了
: lysis buffer里面根据需要补充各种inhibitor（protease, phosphatase等等）
n*w
11 楼
我就是超声匀浆，四度离心15分钟，收supernatant，测蛋白跑胶
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