HDAdVs 比CRISPR还厉害# Biology - 生物学
s*0
1 楼
amex biz还有一月要收年费了，不久前跟客服打电话说关卡，客服问为啥，我说年费高
，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
j*b
2 楼
版上可有人用过，gene targeting efficiency is almost 100%.
Cell Stem Cell. 2011 Jun 3;8(6):688-94.
Targeted gene correction of laminopathy-associated LMNA mutations in patient
-specific iPSCs.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21596650
Cell Stem Cell. 2011 Jun 3;8(6):688-94.
Targeted gene correction of laminopathy-associated LMNA mutations in patient
-specific iPSCs.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21596650
s*c
3 楼
留着吧，不要太ws
虽然我也考虑过，当时给了我1.75W点
虽然我也考虑过，当时给了我1.75W点
c*n
4 楼
求大牛展开说说。貌似我们学校有个PI就做HGPS的，貌似也用iPSC。。
z*n
5 楼
牛逼啊
z*t
6 楼
我觉得crispr胜在便宜易用，adv基本还是targeting vector的东西，对非es cell的
somatic细胞比较好用。
patient
【在 j*b 的大作中提到】
: 版上可有人用过，gene targeting efficiency is almost 100%.
: Cell Stem Cell. 2011 Jun 3;8(6):688-94.
: Targeted gene correction of laminopathy-associated LMNA mutations in patient
: -specific iPSCs.
: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21596650
somatic细胞比较好用。
patient
【在 j*b 的大作中提到】
: 版上可有人用过，gene targeting efficiency is almost 100%.
: Cell Stem Cell. 2011 Jun 3;8(6):688-94.
: Targeted gene correction of laminopathy-associated LMNA mutations in patient
: -specific iPSCs.
: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21596650
i*j
7 楼
受教
d*i
8 楼
patient
http://ac.els-cdn.com/S1934590911003419/1-s2.0-S193459091100341
这个comment里的表上写的是46%。
【在 j*b 的大作中提到】
: 版上可有人用过，gene targeting efficiency is almost 100%.
: Cell Stem Cell. 2011 Jun 3;8(6):688-94.
: Targeted gene correction of laminopathy-associated LMNA mutations in patient
: -specific iPSCs.
: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21596650
A*n
9 楼
哈哈 长见识
【在 s*******0 的大作中提到】
: amex biz还有一月要收年费了，不久前跟客服打电话说关卡，客服问为啥，我说年费高
: ，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
: 那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
【在 s*******0 的大作中提到】
: amex biz还有一月要收年费了，不久前跟客服打电话说关卡，客服问为啥，我说年费高
: ，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
: 那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
j*b
10 楼
加上negative selection,接近100% （文章中）
老鼠ES，加上negative selection，也只有15%左右
【在 d****i 的大作中提到】
:
: patient
: http://ac.els-cdn.com/S1934590911003419/1-s2.0-S193459091100341
: 这个comment里的表上写的是46%。
老鼠ES，加上negative selection，也只有15%左右
【在 d****i 的大作中提到】
:
: patient
: http://ac.els-cdn.com/S1934590911003419/1-s2.0-S193459091100341
: 这个comment里的表上写的是46%。
f*w
11 楼
有点下限吧
【在 s*******0 的大作中提到】
: amex biz还有一月要收年费了，不久前跟客服打电话说关卡，客服问为啥，我说年费高
: ，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
: 那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
【在 s*******0 的大作中提到】
: amex biz还有一月要收年费了，不久前跟客服打电话说关卡，客服问为啥，我说年费高
: ，客服大概是看我花销还可以，就说给1.5万点怎么样，我答应了。很快点就到账了。
: 那拿了点之后，这张卡以后还能关吗？要保持开多久点才不会被扣回去呢？thnx
n*k
12 楼
这应该同CRISPER没得比！筛选达到100%，不双筛呢！而且同源臂长很多了，而且与具
体位点影响大了。我的KO单选，ES里面基本效率是20-50%, 为什么，ES 高表达呀。同
理在这篇文章了，所以复杂着呢。
【在 j*b 的大作中提到】
: 加上negative selection,接近100% （文章中）
: 老鼠ES，加上negative selection，也只有15%左右
体位点影响大了。我的KO单选，ES里面基本效率是20-50%, 为什么，ES 高表达呀。同
理在这篇文章了，所以复杂着呢。
【在 j*b 的大作中提到】
: 加上negative selection,接近100% （文章中）
: 老鼠ES，加上negative selection，也只有15%左右
i*g
13 楼
re 要是我都不好意思这么发帖。。
有点下限吧
【在 f*******w 的大作中提到】
: 有点下限吧
有点下限吧
【在 f*******w 的大作中提到】
: 有点下限吧
j*b
14 楼
不双筛是46%
如果不是promoter trap,用CRISPR做Knockin的效率是多少？
文章里用的可是人ESC。难度很大
不一定同源臂越长，重组越高。比如用BAC，200kb 直接做KO vector,效果很差
【在 n********k 的大作中提到】
: 这应该同CRISPER没得比！筛选达到100%，不双筛呢！而且同源臂长很多了，而且与具
: 体位点影响大了。我的KO单选，ES里面基本效率是20-50%, 为什么，ES 高表达呀。同
: 理在这篇文章了，所以复杂着呢。
如果不是promoter trap,用CRISPR做Knockin的效率是多少？
文章里用的可是人ESC。难度很大
不一定同源臂越长，重组越高。比如用BAC，200kb 直接做KO vector,效果很差
【在 n********k 的大作中提到】
: 这应该同CRISPER没得比！筛选达到100%，不双筛呢！而且同源臂长很多了，而且与具
: 体位点影响大了。我的KO单选，ES里面基本效率是20-50%, 为什么，ES 高表达呀。同
: 理在这篇文章了，所以复杂着呢。
c*8
15 楼
拿了点还关未免太猥琐。不要太过了。省得以后AMEX给好处拿不到就亏大了
d*i
16 楼
如果真是这样的效率，其实已经很好了，但是好几百kb的操作肯定比CRISPR的几百bp的
操作难度要大。两个技术各有优缺点。
操作难度要大。两个技术各有优缺点。
g*n
17 楼
既然给点挽留也答应了，就留着吧
等明年收年费前想关再关呗
等明年收年费前想关再关呗
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