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问一个　ＩＦ　的问题

问一个　ＩＦ　的问题# Biology - 生物学

a*n2014-03-15 07:03

1 楼

我想探测一个protein 是不是colocalize with gamma-tubulin at centrosome.
发现如果用methanol fixation可以检测到protein在centrosome上，但是用PFA
fixation 就检测不到centrosome上的信号。
不知道应该相信哪一个结果？
谢谢1

c*a2014-03-15 07:03

2 楼

甲醇fix的应该是真的信号。但是你应该要用其他方法验证一下，比如说生化纯化
centrosome。因为centrosome的信号集中在一点，往往g-tubulin的信号太强的话，各
个channel都会有假象信号。PFA好像一般的centrosome staining protocol都不用。
good luck.

s*r2014-03-15 07:03

3 楼

染microtubule用methanol fix，PFA会破坏结构，染不到不奇怪

【在 a*********n 的大作中提到】

: 我想探测一个protein 是不是colocalize with gamma-tubulin at centrosome.
: 发现如果用methanol fixation可以检测到protein在centrosome上，但是用PFA
: fixation 就检测不到centrosome上的信号。
: 不知道应该相信哪一个结果？
: 谢谢1