conditional KO动物的育种方法？# Biology - 生物学
q*p
1 楼
我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
花了$1249.
虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
花了$1249.
虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
w*j
2 楼
小弟课题中的一个cKO mice 最近一直在育种
假设基因是A
目前用A flox/flox 和 A flox/wt;MX1-Cre杂交，且已经获得了A flox/flox;Mx1-Cre
那么，现在最好的方法是不是拿A flox/flox;Mx1-Cre mice和A flox/flox杂交？
这样下来的小鼠一半是A flox/flox;Mx1-Cre mice，另外一半是A flox/flox，后者正
好是对照
假设基因是A
目前用A flox/flox 和 A flox/wt;MX1-Cre杂交，且已经获得了A flox/flox;Mx1-Cre
那么，现在最好的方法是不是拿A flox/flox;Mx1-Cre mice和A flox/flox杂交？
这样下来的小鼠一半是A flox/flox;Mx1-Cre mice，另外一半是A flox/flox，后者正
好是对照
c*e
3 楼
用来挖矿？
t*k
4 楼
我就是这么养的，flflcre＋ x flfl++
z*3
5 楼
要看你用来干嘛。用quadro打游戏肯定就是笑话。
n*w
6 楼
Except when your homo (Cre+ f/f male) has some sort of phenotype that
affects
breeding, using a het (Cre+ f/wt) may be better. The downside of this is
you get fewer experimental mice but you can overcome that by setting up more
breeders. Also this strategy has built-in controls for Cre toxicity and you
don't need a separate Cre wt breeding line ongoing as a control.
affects
breeding, using a het (Cre+ f/wt) may be better. The downside of this is
you get fewer experimental mice but you can overcome that by setting up more
breeders. Also this strategy has built-in controls for Cre toxicity and you
don't need a separate Cre wt breeding line ongoing as a control.
h*l
7 楼
当年我老买了680唯一的作用就是跑分
D*a
8 楼
可以啊 如果有问题就按3楼的
v*e
9 楼
科学计算的？我想做模拟，只需要32位，但是显存越大越好，titan X正合适
z*a
10 楼
接lz的问题问一下
genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
P*H
11 楼
但是有什么用呢？
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
n*w
12 楼
你怎么知道是假阳性而不是单纯的信号弱？
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
t*z
13 楼
然并卵
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
z*u
14 楼
Mx1-Cre是个inducible cre line. 需要interefon 诱导才有cre 活性。 理论讲homo是
正常的无phenotype. 所以一般来说你可以直接generate Mx1-Cre; flox/flox line,
并用其传代，这样比例高很多。
正常的无phenotype. 所以一般来说你可以直接generate Mx1-Cre; flox/flox line,
并用其传代，这样比例高很多。
N*d
15 楼
主力机没有独立显卡。
独立显卡行业死是迟早的事，对显卡有需求的是小众，支撑不了市场
独立显卡行业死是迟早的事，对显卡有需求的是小众，支撑不了市场
z*u
16 楼
常见于制备的tail solution比较杂的情形。实在不相信就每次genotype加一个纯水样
本作为隐形对照。
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
本作为隐形对照。
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
I*n
17 楼
长期看我们都要死
【在 N**********d 的大作中提到】
: 主力机没有独立显卡。
: 独立显卡行业死是迟早的事，对显卡有需求的是小众，支撑不了市场
【在 N**********d 的大作中提到】
: 主力机没有独立显卡。
: 独立显卡行业死是迟早的事，对显卡有需求的是小众，支撑不了市场
o*a
18 楼
your cre transgene will be heterozygous if you make cross like that. In mice
, how can you make sure that there is no translocation of gene ?
Cre
【在 w***j 的大作中提到】
: 小弟课题中的一个cKO mice 最近一直在育种
: 假设基因是A
: 目前用A flox/flox 和 A flox/wt;MX1-Cre杂交，且已经获得了A flox/flox;Mx1-Cre
: 那么，现在最好的方法是不是拿A flox/flox;Mx1-Cre mice和A flox/flox杂交？
: 这样下来的小鼠一半是A flox/flox;Mx1-Cre mice，另外一半是A flox/flox，后者正
: 好是对照
, how can you make sure that there is no translocation of gene ?
Cre
【在 w***j 的大作中提到】
: 小弟课题中的一个cKO mice 最近一直在育种
: 假设基因是A
: 目前用A flox/flox 和 A flox/wt;MX1-Cre杂交，且已经获得了A flox/flox;Mx1-Cre
: 那么，现在最好的方法是不是拿A flox/flox;Mx1-Cre mice和A flox/flox杂交？
: 这样下来的小鼠一半是A flox/flox;Mx1-Cre mice，另外一半是A flox/flox，后者正
: 好是对照
j*2
19 楼
过一年就价格腰斩，这一年内你除了打几次游戏，跑几次分，上mitbbs发个关于它的炫
耀贴之外，你得到了什么？
耀贴之外，你得到了什么？
D*a
20 楼
bench/枪/水/primer/All太脏了
digestion的时候污染了
或者其实就是阳性的
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
digestion的时候污染了
或者其实就是阳性的
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
q*p
21 楼
不打游戏不跑分，做CAD用的。
如果跑分，最多也就GTX 780的水平，只是双精度开启了没屏蔽、同时对CAD有优化的驱
动。
【在 j********2 的大作中提到】
: 过一年就价格腰斩，这一年内你除了打几次游戏，跑几次分，上mitbbs发个关于它的炫
: 耀贴之外，你得到了什么？
如果跑分，最多也就GTX 780的水平，只是双精度开启了没屏蔽、同时对CAD有优化的驱
动。
【在 j********2 的大作中提到】
: 过一年就价格腰斩，这一年内你除了打几次游戏，跑几次分，上mitbbs发个关于它的炫
: 耀贴之外，你得到了什么？
t*k
22 楼
CFF x FF
w*6
23 楼
这不是扯淡么，大多数人根本不用 CAD 或者其他需要独立显卡的，需要的自然回去买。
【在 q*p 的大作中提到】
: 不打游戏不跑分，做CAD用的。
: 如果跑分，最多也就GTX 780的水平，只是双精度开启了没屏蔽、同时对CAD有优化的驱
: 动。
【在 q*p 的大作中提到】
: 不打游戏不跑分，做CAD用的。
: 如果跑分，最多也就GTX 780的水平，只是双精度开启了没屏蔽、同时对CAD有优化的驱
: 动。
w*j
24 楼
谢谢各位老兄们！祝大家都发牛文，都找到好位置！
E*e
25 楼
太明显了，这的智商你最低
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
【在 q*p 的大作中提到】
: 我买了个new other的nvidia quadro k5200，8GB显存。
: 花了$1249.
: 虽然比titan X略贵，但是性能和稳定性比较均衡。
w*j
26 楼
more
you
谢谢！看来遇上专家了，我不太懂小鼠这一块，希望您多指教！
我有另外一个动物，类似这个project（但不是这个）
http://www.mousephenotype.org/martsearch_ikmc_project/martsearc
出现了很麻烦的情况，用flp mice cross后去掉frt后就一直不生了，所以一直得不到
flox/flox小鼠
现在是想直接拿这个小鼠和cre杂交，但是上面有三个loxp位点，而且似乎frt及Lacz这
一段也无法去除，如果杂交出来，算是ko mice吗？
【在 n***w 的大作中提到】
: Except when your homo (Cre+ f/f male) has some sort of phenotype that
: affects
: breeding, using a het (Cre+ f/wt) may be better. The downside of this is
: you get fewer experimental mice but you can overcome that by setting up more
: breeders. Also this strategy has built-in controls for Cre toxicity and you
: don't need a separate Cre wt breeding line ongoing as a control.
c*h
27 楼
没需求买来干啥？发帖bso？
那是傻
那是傻
w*j
28 楼
谢谢！看来遇上专家了，我不太懂小鼠这一块，希望您多指教！
我有另外一个动物，类似这个project（但不是这个）
http://www.mousephenotype.org/martsearch_ikmc_project/martsearc
出现了很麻烦的情况，用flp mice cross后去掉frt后就一直不生了，所以一直得不到
flox/flox小鼠
现在是想直接拿这个小鼠和cre杂交，但是上面有三个loxp位点，而且似乎frt及Lacz这
一段也无法去除，如果杂交出来，算是ko mice吗？
【在 D*a 的大作中提到】
: 可以啊 如果有问题就按3楼的
D*3
29 楼
N年前的GXT460还不用，嫌吵
一直在用内置显卡
一直在用内置显卡
s*n
30 楼
原则上Cre;flox/flox X flox/flox 是可以的。
但是最好还是要加一个 Cre;flox/+的做对照，否则无法排除Cre本身的影响 （Cre本身
的表达，以及Cre-tg的遗传背景影响）
但是最好还是要加一个 Cre;flox/+的做对照，否则无法排除Cre本身的影响 （Cre本身
的表达，以及Cre-tg的遗传背景影响）
N*d
31 楼
最终都将集成到猪板上。
机器吵主要是风扇，尤其半径小的。比如显卡，南桥风扇
我以前有一块显卡风扇，转到掉出来
机器吵主要是风扇，尤其半径小的。比如显卡，南桥风扇
我以前有一块显卡风扇，转到掉出来
J*X
32 楼
1，器械或试剂受污染了，清理器械，用全新的试剂。
2，样品间交叉污染，剪子每剪一次要擦干净，还可以稀释样品。
另外，PCR cycle可以减少一些，30次够的话就不要35次。
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
2，样品间交叉污染，剪子每剪一次要擦干净，还可以稀释样品。
另外，PCR cycle可以减少一些，30次够的话就不要35次。
【在 z**a 的大作中提到】
: 接lz的问题问一下
: genotyping时候cre经常有些浅的假阳性 是怎么回事？
s*m
33 楼
我买了啊，二手HD 6400，目前没有任何不够用的地方，30刀。
D*a
34 楼
你的老鼠是你自己做的还是买的？别人做成功过么？
有的老鼠就是不育，你重复了也不育吗？
现在是在做老鼠的过程中？还是做实验的过程中？
你最终要比较的是神马和神马？要lacz吗？还是只是不要exon 还是希望吧neo搞掉，还
是神马？
【在 w***j 的大作中提到】
:
: 谢谢！看来遇上专家了，我不太懂小鼠这一块，希望您多指教！
: 我有另外一个动物，类似这个project（但不是这个）
: http://www.mousephenotype.org/martsearch_ikmc_project/martsearc
: 出现了很麻烦的情况，用flp mice cross后去掉frt后就一直不生了，所以一直得不到
: flox/flox小鼠
: 现在是想直接拿这个小鼠和cre杂交，但是上面有三个loxp位点，而且似乎frt及Lacz这
: 一段也无法去除，如果杂交出来，算是ko mice吗？
有的老鼠就是不育，你重复了也不育吗？
现在是在做老鼠的过程中？还是做实验的过程中？
你最终要比较的是神马和神马？要lacz吗？还是只是不要exon 还是希望吧neo搞掉，还
是神马？
【在 w***j 的大作中提到】
:
: 谢谢！看来遇上专家了，我不太懂小鼠这一块，希望您多指教！
: 我有另外一个动物，类似这个project（但不是这个）
: http://www.mousephenotype.org/martsearch_ikmc_project/martsearc
: 出现了很麻烦的情况，用flp mice cross后去掉frt后就一直不生了，所以一直得不到
: flox/flox小鼠
: 现在是想直接拿这个小鼠和cre杂交，但是上面有三个loxp位点，而且似乎frt及Lacz这
: 一段也无法去除，如果杂交出来，算是ko mice吗？
t*z
35 楼
好像很久没有看到你出没了。
【在 c*****h 的大作中提到】
: 没需求买来干啥？发帖bso？
: 那是傻
【在 c*****h 的大作中提到】
: 没需求买来干啥？发帖bso？
: 那是傻
w*j
36 楼
买的 从EMMA买的 别人没有做过 所以不清楚
现在还在做ko老鼠的过程中，另外去做了个组织特异性的transgenic mice 还没做成
要求很简单 只要做把这个蛋白去掉就行 lacz和neo的存在只要不影响蛋白功能 就没
有关系
【在 D*a 的大作中提到】
: 你的老鼠是你自己做的还是买的？别人做成功过么？
: 有的老鼠就是不育，你重复了也不育吗？
: 现在是在做老鼠的过程中？还是做实验的过程中？
: 你最终要比较的是神马和神马？要lacz吗？还是只是不要exon 还是希望吧neo搞掉，还
: 是神马？
n*w
37 楼
http://ko.cwru.edu/services/chimeras.shtml
Check this page. I haven't never used FLP-FRT system.
【在 w***j 的大作中提到】
:
: 买的 从EMMA买的 别人没有做过 所以不清楚
: 现在还在做ko老鼠的过程中，另外去做了个组织特异性的transgenic mice 还没做成
: 要求很简单 只要做把这个蛋白去掉就行 lacz和neo的存在只要不影响蛋白功能 就没
: 有关系
Check this page. I haven't never used FLP-FRT system.
【在 w***j 的大作中提到】
:
: 买的 从EMMA买的 别人没有做过 所以不清楚
: 现在还在做ko老鼠的过程中，另外去做了个组织特异性的transgenic mice 还没做成
: 要求很简单 只要做把这个蛋白去掉就行 lacz和neo的存在只要不影响蛋白功能 就没
: 有关系
w*j
38 楼
Thank you very mcuh!
【在 n***w 的大作中提到】
: http://ko.cwru.edu/services/chimeras.shtml
: Check this page. I haven't never used FLP-FRT system.
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