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polysome profiling vs ribosome profiling 有什么区别啊?
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polysome profiling vs ribosome profiling 有什么区别啊?# Biology - 生物学
o*4
1
我有个蛋白对于ribosome biogenesis有影响,
怎么检测这种影响呢?哪个protocol更好呢?
不知道这两个protocol有什么区别呢?
谢谢
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m*u
2
这是大小概念的意思吧。后者包含前者。ribosome profile,前面的fraction就是
ribosome 独立的大、小亚基,中间是monosome,后面的fraction就是polysome了。这
个profileing使用来检测活性翻译的mRNA的,所以叫profiling。我看过你另外的那个
帖子了,这个方法不是你想要的。你要的是核糖体活性差异,而不是mRNA的
tanslatiblity的差异。你再想想其他办法,或者至少要多这个方法做些modification
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m*u
3
对你那个帖子的问题就问的很好。这么检测ribosome的含量和活性。ribosome
profiling有点太间接了。对照不仅仅是loading的总蛋白量或总RNA量,我觉得细胞数
才是重要的。因为我在那个回帖中说了,核糖体数目或活性受到影响细胞生长会受到影
响。细想,比用总蛋白或总RNA做profiling,得到的pattern完全一致也是可能的。但
你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定,核糖体少的当然就是信号弱了,一个WB或一个
northern试验就够了。
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o*4
4
“但
你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定”
这个咋做简单? WB没问题, northern 有点麻烦啊

【在 m******u 的大作中提到】
: 对你那个帖子的问题就问的很好。这么检测ribosome的含量和活性。ribosome
: profiling有点太间接了。对照不仅仅是loading的总蛋白量或总RNA量,我觉得细胞数
: 才是重要的。因为我在那个回帖中说了,核糖体数目或活性受到影响细胞生长会受到影
: 响。细想,比用总蛋白或总RNA做profiling,得到的pattern完全一致也是可能的。但
: 你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定,核糖体少的当然就是信号弱了,一个WB或一个
: northern试验就够了。

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