Protein lysate能放在cold room过夜吗？# Biology - 生物学
d*i
1 楼
以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
会不会降解？
谢谢！
。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
会不会降解？
谢谢！
j*i
2 楼
我觉得没问题啊。牛奶四度都能放一周呢。
【在 d****i 的大作中提到】
: 以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
: 。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
: 会不会降解？
: 谢谢！
【在 d****i 的大作中提到】
: 以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
: 。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
: 会不会降解？
: 谢谢！
s*g
3 楼
应该没有问题。因为裂解液里也有很多化学的inhibitor.
跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
d*i
4 楼
牛奶里面应该没有细胞内那么多各种protease。。。。。。。
【在 j******i 的大作中提到】
: 我觉得没问题啊。牛奶四度都能放一周呢。
d*i
5 楼
跑完的膜上各种蛋白都分开了，即使与某种protease接触也是极少量的接触，所以比较
安全。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 应该没有问题。因为裂解液里也有很多化学的inhibitor.
: 跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
s*g
6 楼
我们实验室烙印把裂解液室温过夜。因为是病人样品，不舍得扔，第二天就跑胶了。结
果好好的。(不推荐这么做啊！)
细胞免疫荧光染色不也有放了抗体，4度过夜的么。
另外蛋白离心也是四度啊。如果死度就玩完了，这种提取方法也就不那么robust了
还有IP-WB不也四度过夜么（我也是放了inhibitor cocktail）？
果好好的。(不推荐这么做啊！)
细胞免疫荧光染色不也有放了抗体，4度过夜的么。
另外蛋白离心也是四度啊。如果死度就玩完了，这种提取方法也就不那么robust了
还有IP-WB不也四度过夜么（我也是放了inhibitor cocktail）？
m*g
7 楼
大多数蛋白没有问题,但一些磷酸化蛋白会有问题.
t*l
8 楼
感觉没问题啊。做CHIP, IP的时候 protein都是incubation overnight
d*i
9 楼
非常感谢大家！还是没敢。。。。。打算找一个不重要的lysate对比一下。
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