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不做药物筛选可以吗？
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不做药物筛选可以吗？# Biology - 生物学
J*y
1 楼
在线等，谢谢！
EB1B,填写４８５的questionair,律师提供的，有一项问
Has any Immigrant Visa Petition ever been filed by you or on your behalf?
情况是ld递过eb2的１４０，lp递过eb3的１４０，都没有递过４８５。immigration
visa petition是指１４０嘛？
这个和４８５上问的
have you ever applied for permanent resident status in US?不是一个意思把？我
觉得这个是说４８５？
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P*e
2 楼
我还等着剪枝呢。
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y*0
3 楼
请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
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b*M
4 楼
fill in" no"
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h*2
5 楼
我种了近2年的桃树，被这次冻雨都压得倒伏在地上了，不知还能不能救回来。
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s*y
6 楼
我不熟悉BAC vector, 不知道你们的稳定转化效率有多少。
但是我们用病毒的时候，因为稳定转化率很高，所以可以直接筛荧光而不用药物。
如果你要拿到稳定转化的细胞株，那么必须有比较高的稳定转化率，如果是类似于普通
质粒那种几万分之一那种概率的话没戏。

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
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b*M
7 楼
go to wenxuecity for step by step instructions on filling forms
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h*e
8 楼
可能红烧肉吃多了

【在 P******e 的大作中提到】
: 我还等着剪枝呢。
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s*r
9 楼
直接筛GFP阳性我搞过，得看是啥位点，基因够不够强，不在乎失败的可以试试
另外双neo可能抗g418浓度会高一点，可以试试多加点加到原来的line开始抗不住

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
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f*c
11 楼
我的桃树叶子原本也是绿油油滴，结果周一的一场大风，叶子全掉了
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y*0
12 楼
多谢二位！

【在 s******r 的大作中提到】
: 直接筛GFP阳性我搞过，得看是啥位点，基因够不够强，不在乎失败的可以试试
: 另外双neo可能抗g418浓度会高一点，可以试试多加点加到原来的line开始抗不住
:
: clone
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c*2
13 楼
if you have a previous I-140 or I-130 that you are the primary beneficiary/
petitioner, you need to say yes.
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h*e
14 楼
这才是正常的，桃树什么的都需要200+小时寒冷时间才能保证明年开花结果

【在 f*****c 的大作中提到】
: 我的桃树叶子原本也是绿油油滴，结果周一的一场大风，叶子全掉了
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s*r
15 楼
看你叙述的像是用BAC同源重组knock-in GFP， 这样的话不筛选基本不太可能吧。。
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f*c
16 楼
我的是被风活活吹掉滴

【在 h******e 的大作中提到】
: 这才是正常的，桃树什么的都需要200+小时寒冷时间才能保证明年开花结果
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m*z
17 楼
基本没戏。就算你的基因表达够强，BAC knockin效率可能远远低于FACS本身带来的
false positive GFP signal的比例。

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
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m*6
18 楼
几区的？我的也是桃树最晚掉，不过现在是全掉了。
肯跌的是，我喷了铜第二天就连下了一个礼拜的雨。
下次喷之前一定要查天气预报。
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P*e
19 楼
忘了报location, 南加zone 10的。

【在 m****6 的大作中提到】
: 几区的？我的也是桃树最晚掉，不过现在是全掉了。
: 肯跌的是，我喷了铜第二天就连下了一个礼拜的雨。
: 下次喷之前一定要查天气预报。
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x*2
20 楼
我的三棵桃树，2棵还都绿的，一棵掉叶不少。
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c*x
21 楼
我家也是，第一年种，cocktail桃树还没变色落叶，李子树光了，樱桃树叶子块不行了
，葡萄叶子刚刚有点变色，我在湾区。

【在 P******e 的大作中提到】
: 我还等着剪枝呢。
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