H*7
2 楼
随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
之间人与人的关系新一代比上一代强太多了，比我小时候也强太多了，小时候大家穷的
为一碗醋亲眼看见两家邻居打破了头。
在全民致富的时代中，金钱必然成了社会唯一准绳。也看到一些本来条件很不错的年轻
人因为对自己定位不准确，失衡了，甚至神经出现了问题。我一个朋友说了一句话我觉
得特对，“想发财不痛苦，痛苦的都是自己只有1千块钱的实力确一心想拿3万块钱的工
资那种人。”通常把抱怨社会不公平挂在嘴边的也是这一类人。说到这想起一个乐事儿
，都说国内交通差，车难开，可是真正开车的人好像还都没什么抱怨。我见到一个人从
一开始就抱怨车有多难开，没人遵守交通规则。后来一打听，这位仁兄10几年没工作了
，根本没有车。没车你抱怨什么车难开呀？就这么离奇的故事其实反应了很大的问题，
好多人其实都这样，只不过他们以另一种形式做着同样的事情而已。
随便扯了两句，回国见太多太多人和事了，感慨挺多以后慢慢梳理思绪再说... ...
资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
之间人与人的关系新一代比上一代强太多了，比我小时候也强太多了，小时候大家穷的
为一碗醋亲眼看见两家邻居打破了头。
在全民致富的时代中，金钱必然成了社会唯一准绳。也看到一些本来条件很不错的年轻
人因为对自己定位不准确，失衡了，甚至神经出现了问题。我一个朋友说了一句话我觉
得特对，“想发财不痛苦，痛苦的都是自己只有1千块钱的实力确一心想拿3万块钱的工
资那种人。”通常把抱怨社会不公平挂在嘴边的也是这一类人。说到这想起一个乐事儿
，都说国内交通差，车难开，可是真正开车的人好像还都没什么抱怨。我见到一个人从
一开始就抱怨车有多难开，没人遵守交通规则。后来一打听，这位仁兄10几年没工作了
，根本没有车。没车你抱怨什么车难开呀？就这么离奇的故事其实反应了很大的问题，
好多人其实都这样，只不过他们以另一种形式做着同样的事情而已。
随便扯了两句，回国见太多太多人和事了，感慨挺多以后慢慢梳理思绪再说... ...
z*i
3 楼
找到了两个相互作用的蛋白，各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。但
是，这个两个蛋白公转到hela细胞中，看不到任何的共定位。其中一个蛋白和cilia形
成相关，能到看到它定位在basal body，另一个蛋白功能未知，弥散分布在细胞中，细
胞核信号强一点。自己不是做cilia，对这块不熟悉。请教各位大牛，如何才能看到共
定位？谢谢！
是，这个两个蛋白公转到hela细胞中，看不到任何的共定位。其中一个蛋白和cilia形
成相关，能到看到它定位在basal body，另一个蛋白功能未知，弥散分布在细胞中，细
胞核信号强一点。自己不是做cilia，对这块不熟悉。请教各位大牛，如何才能看到共
定位？谢谢！
N*n
4 楼
当然是Benjemin Moore, 唯一稍微麻烦点的是一定要到他们自己的店里买, 大的连锁
店都没有
还有就是贵
店都没有
还有就是贵
p*w
5 楼
不错
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
g*n
6 楼
你认为那两个蛋白应该在哪种细胞里相互作用，就用那种细胞。co-ip 和 PLA (
proximity ligation assay)可能是快捷的方法。也可以在含有那种细胞的组织上做PLA
。
proximity ligation assay)可能是快捷的方法。也可以在含有那种细胞的组织上做PLA
。
k*o
7 楼
我也推荐Benjemin Moore，他的颜色我觉得都很正
而且网站上自己换油漆弄的3D图跟实际颜色都算吻合，色差较小
而且去要下免费的sample。
而且网站上自己换油漆弄的3D图跟实际颜色都算吻合，色差较小
而且去要下免费的sample。
z*e
8 楼
这贴上首页是钓鱼用的吧？
z*i
9 楼
多谢回复。我现在困惑的是看不到这两个蛋白在细胞中的共定位。至于他们直接的相互
作用，我们已经用多种方法确认，表明他们之间是直接的相互作用。
PLA
【在 g*****n 的大作中提到】
: 你认为那两个蛋白应该在哪种细胞里相互作用，就用那种细胞。co-ip 和 PLA (
: proximity ligation assay)可能是快捷的方法。也可以在含有那种细胞的组织上做PLA
: 。
作用，我们已经用多种方法确认，表明他们之间是直接的相互作用。
PLA
【在 g*****n 的大作中提到】
: 你认为那两个蛋白应该在哪种细胞里相互作用，就用那种细胞。co-ip 和 PLA (
: proximity ligation assay)可能是快捷的方法。也可以在含有那种细胞的组织上做PLA
: 。
g*a
10 楼
Benjemin Moore的网站也在卖，跟代理店价格都一样吗？
好象有：
Natura,Bent,Aura系列，
有什么区别？
买哪个好？
用它网上计算工具，1000平方尺至少要6GAL,对吗？
谢谢！
好象有：
Natura,Bent,Aura系列，
有什么区别？
买哪个好？
用它网上计算工具，1000平方尺至少要6GAL,对吗？
谢谢！
M*1
11 楼
“在国内这种人见到我爸单位一个处长都得乖乖跟孙子似的”
还有脸了
还有脸了
g*n
12 楼
生物物理的方法证明他们相互作用，并不表明他们在细胞里相互作用。在细胞里共定位
（免疫双染）也不表明他们直接相互作用。在组织上做PLA，加上细胞识别，是个可靠
的方法。
（免疫双染）也不表明他们直接相互作用。在组织上做PLA，加上细胞识别，是个可靠
的方法。
h*o
13 楼
漆不都差不多吗，没必要挑剔。
f*9
14 楼
从这里Copy来的吧。玩什么呢？闲的蛋疼吧
http://bbs.wenxuecity.com/backhome/622549.html
http://bbs.wenxuecity.com/backhome/622549.html
D*a
15 楼
我觉得proximity ligation assay检测共定位真是一个靠不住的实验，无论什么两个蛋
白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
c*y
16 楼
你是说那小菲啊，他见我一哥们每次都嬉皮笑脸鞍前马后地哥长哥短的，就想我那哥们
教他怎么赚钱。也难怪，小菲的日子也就将就过得去吧，我那哥们有时候就顺大便提他
一把
教他怎么赚钱。也难怪，小菲的日子也就将就过得去吧，我那哥们有时候就顺大便提他
一把
l*n
17 楼
两个蛋白共转到细胞里。这两个蛋白你可能不是full length?蛋白构想发生变法？
各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。 结合位点在什么地方做了吗？
各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。 结合位点在什么地方做了吗？
d*f
18 楼
你写的？
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
i*0
19 楼
有同感。
【在 D***a 的大作中提到】
: 我觉得proximity ligation assay检测共定位真是一个靠不住的实验，无论什么两个蛋
: 白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
【在 D***a 的大作中提到】
: 我觉得proximity ligation assay检测共定位真是一个靠不住的实验，无论什么两个蛋
: 白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
d*f
20 楼
汪小费能有什么鸟钱，别逗了，他们下面哪些店都是加盟的，一年就几十万加盟费
【在 c****y 的大作中提到】
: 你是说那小菲啊，他见我一哥们每次都嬉皮笑脸鞍前马后地哥长哥短的，就想我那哥们
: 教他怎么赚钱。也难怪，小菲的日子也就将就过得去吧，我那哥们有时候就顺大便提他
: 一把
【在 c****y 的大作中提到】
: 你是说那小菲啊，他见我一哥们每次都嬉皮笑脸鞍前马后地哥长哥短的，就想我那哥们
: 教他怎么赚钱。也难怪，小菲的日子也就将就过得去吧，我那哥们有时候就顺大便提他
: 一把
z*i
21 楼
首先我用IP找到了他们相互作用的domain，一个是全长，另一个蛋白是一个domain；然
后在体外表达并纯化了这个单白，pulldown和native gel，都能都看到很强的相互作用
。作用的位点也找到了，突变之后能减弱相互作用。
【在 l******n 的大作中提到】
: 两个蛋白共转到细胞里。这两个蛋白你可能不是full length?蛋白构想发生变法？
: 各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。 结合位点在什么地方做了吗？
后在体外表达并纯化了这个单白，pulldown和native gel，都能都看到很强的相互作用
。作用的位点也找到了，突变之后能减弱相互作用。
【在 l******n 的大作中提到】
: 两个蛋白共转到细胞里。这两个蛋白你可能不是full length?蛋白构想发生变法？
: 各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。 结合位点在什么地方做了吗？
g*8
22 楼
是啊，楼主朋友有什么好骄傲的？只能说明人家麦肯西合伙人不跟中国的官僚一般见识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
【在 M****1 的大作中提到】
: “在国内这种人见到我爸单位一个处长都得乖乖跟孙子似的”
: 还有脸了
【在 M****1 的大作中提到】
: “在国内这种人见到我爸单位一个处长都得乖乖跟孙子似的”
: 还有脸了
H*N
23 楼
How about doing co-IP with cell lysates after co-transfection? One
possibility is that they only co-localize and interact with other under
specific conditions.
possibility is that they only co-localize and interact with other under
specific conditions.
d*8
24 楼
土了吧，你可知胡总在比费力山丘的陋室的车库地面铺的都是金砖？
至于你信不信，反正我是信了。
识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙
子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一
副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
【在 g******8 的大作中提到】
: 是啊，楼主朋友有什么好骄傲的？只能说明人家麦肯西合伙人不跟中国的官僚一般见识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
至于你信不信，反正我是信了。
识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙
子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一
副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
【在 g******8 的大作中提到】
: 是啊，楼主朋友有什么好骄傲的？只能说明人家麦肯西合伙人不跟中国的官僚一般见识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
p*t
25 楼
另一个功能未知的蛋白可能没有表达成功，可以在C端连一个GFP看看亮不亮，或者转完
细胞之后做个 western 看看大小对不对。
固定之后用抗体看 endogenous 的这两个蛋白呢？这样子看到的共定位会比过表达更可
信。也许只是过表达之后 saturate binding site，所以看到的大部分 cytosolic。
还有一个可能性就是细胞在调控这个蛋白的相互作用，修饰之后就把interaction关掉
了，需要在特定情况才会去修饰。而纯化出来的蛋白没有修饰。
细胞之后做个 western 看看大小对不对。
固定之后用抗体看 endogenous 的这两个蛋白呢？这样子看到的共定位会比过表达更可
信。也许只是过表达之后 saturate binding site，所以看到的大部分 cytosolic。
还有一个可能性就是细胞在调控这个蛋白的相互作用，修饰之后就把interaction关掉
了，需要在特定情况才会去修饰。而纯化出来的蛋白没有修饰。
m*s
26 楼
老胡不应该这么容易被moved的
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
f*f
27 楼
basal body 蛋白跟细胞质蛋白有相互作用太正常了。basal body的这个蛋白主要的
pool可能并不在中心体上，他们的结合可能就发生在cytoplasm中，或是发生在basal
body targeting之前。另外很多中心体蛋白因为tag，fixation原因并不定位中心体，
弥散定位也有可能是假象。还有如果该功能未知蛋白是HSP或相关的，有假阳性可能。
【在 z********i 的大作中提到】
: 找到了两个相互作用的蛋白，各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。但
: 是，这个两个蛋白公转到hela细胞中，看不到任何的共定位。其中一个蛋白和cilia形
: 成相关，能到看到它定位在basal body，另一个蛋白功能未知，弥散分布在细胞中，细
: 胞核信号强一点。自己不是做cilia，对这块不熟悉。请教各位大牛，如何才能看到共
: 定位？谢谢！
pool可能并不在中心体上，他们的结合可能就发生在cytoplasm中，或是发生在basal
body targeting之前。另外很多中心体蛋白因为tag，fixation原因并不定位中心体，
弥散定位也有可能是假象。还有如果该功能未知蛋白是HSP或相关的，有假阳性可能。
【在 z********i 的大作中提到】
: 找到了两个相互作用的蛋白，各种生物物理的方法证明了他们之间的直接相互作用。但
: 是，这个两个蛋白公转到hela细胞中，看不到任何的共定位。其中一个蛋白和cilia形
: 成相关，能到看到它定位在basal body，另一个蛋白功能未知，弥散分布在细胞中，细
: 胞核信号强一点。自己不是做cilia，对这块不熟悉。请教各位大牛，如何才能看到共
: 定位？谢谢！
l*a
28 楼
为了交地产税，老胡都开始挣5毛了。。。万恶的美第阿。。。
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
g*n
29 楼
lz的问题不是理论问题，而是技术问题。转染都做了，现在就是要看的是这两个蛋白是
否真的在自然条件下相互作用。再做转染方面的实验不会有帮助。剩下可用的方法就是
组织PLA了。另外，Y2H可以用，至少表明是在in vivo条件下。
否真的在自然条件下相互作用。再做转染方面的实验不会有帮助。剩下可用的方法就是
组织PLA了。另外，Y2H可以用，至少表明是在in vivo条件下。
z*n
30 楼
老胡是ZZ吧。
【在 l******a 的大作中提到】
: 为了交地产税，老胡都开始挣5毛了。。。万恶的美第阿。。。
【在 l******a 的大作中提到】
: 为了交地产税，老胡都开始挣5毛了。。。万恶的美第阿。。。
b*r
31 楼
这两种蛋白可以相互结合吗？ 在hela 细胞有表达吗？ 如果有，说不定你标价的蛋白
和细胞内的天然蛋白结合。 酵母双杂交不是可以观察蛋白之间的结合吗？
和细胞内的天然蛋白结合。 酵母双杂交不是可以观察蛋白之间的结合吗？
h*i
32 楼
其他的不知道，但麦肯锡的合伙人对一个处长点头哈腰这个我绝对相信，我还见过国企
处长一个电话要买美国奶粉，知名美国律师事务所大合伙人赶紧让在美国的律师
去买了寄回国。客户就是上帝，这个在IBanking, consulting， accounting，law
firm里面特别明显，无论中国还是美国，毕竟服务行业，赚到钱是第一位的。
【在 l******a 的大作中提到】
: 为了交地产税，老胡都开始挣5毛了。。。万恶的美第阿。。。
处长一个电话要买美国奶粉，知名美国律师事务所大合伙人赶紧让在美国的律师
去买了寄回国。客户就是上帝，这个在IBanking, consulting， accounting，law
firm里面特别明显，无论中国还是美国，毕竟服务行业，赚到钱是第一位的。
【在 l******a 的大作中提到】
: 为了交地产税，老胡都开始挣5毛了。。。万恶的美第阿。。。
S*e
33 楼
哪个实验能一锤定音呢？两个蛋白搂在一起，还得证明他们真正干了什么才算术吧？
【在 D***a 的大作中提到】
: 我觉得proximity ligation assay检测共定位真是一个靠不住的实验，无论什么两个蛋
: 白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
【在 D***a 的大作中提到】
: 我觉得proximity ligation assay检测共定位真是一个靠不住的实验，无论什么两个蛋
: 白，或多或少总会有阳性信号。只是一个锦上添花的结果，不能一锤定音。
h*i
34 楼
这有什么有脸没脸的？做服务业就应该这样，老中就是服务意识太差，你去中国城请个
移民律师，办事拖拖拉拉，发个email几天才回，脸色还能难看，搞得好像你求他似的
，这在好点的美国律所是不可想象的。
【在 M****1 的大作中提到】
: “在国内这种人见到我爸单位一个处长都得乖乖跟孙子似的”
: 还有脸了
移民律师，办事拖拖拉拉，发个email几天才回，脸色还能难看，搞得好像你求他似的
，这在好点的美国律所是不可想象的。
【在 M****1 的大作中提到】
: “在国内这种人见到我爸单位一个处长都得乖乖跟孙子似的”
: 还有脸了
a*h
35 楼
这个似乎有涉及到是constant interaction还是transient的。两个蛋白即使in vitro
可以相互作用，但未必在细胞里可以检测得到吧，比如transient的可能就不能。
可以相互作用，但未必在细胞里可以检测得到吧，比如transient的可能就不能。
w*6
36 楼
处长和处长也大有不同了，呵呵。你爸单位的处长太牛了。牛处长多，出去了不受待见
的处长也多，关键是这处长能干点啥。啥叫见到你爸单位处长乖乖的跟孙子一样阿，不
过是各取所需而已。我看到这一句，就觉得此人无比幼稚。人家真的乖，还是装的乖，
这不就是某种文化中的一种基本技能吗？人凭啥当孙子阿，就因为对方是一处长，膜拜处长，
呵呵。装的乖不过是人家实现目标的一种心理策略，要说谁是真的SB,我倒觉的是你口中的
那个处长，自认为人家真的拿他当回事了。搞清楚，人家是在给处长这个职位装孙子，不是给坐在这个职位的人装孙
子，人贵在有自知之明，都是演戏而已，当真就
没劲了。当处长能当一辈子阿，不退二线阿，若得罪了头，不得派发到清水衙门坐冷板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
的处长也多，关键是这处长能干点啥。啥叫见到你爸单位处长乖乖的跟孙子一样阿，不
过是各取所需而已。我看到这一句，就觉得此人无比幼稚。人家真的乖，还是装的乖，
这不就是某种文化中的一种基本技能吗？人凭啥当孙子阿，就因为对方是一处长，膜拜处长，
呵呵。装的乖不过是人家实现目标的一种心理策略，要说谁是真的SB,我倒觉的是你口中的
那个处长，自认为人家真的拿他当回事了。搞清楚，人家是在给处长这个职位装孙子，不是给坐在这个职位的人装孙
子，人贵在有自知之明，都是演戏而已，当真就
没劲了。当处长能当一辈子阿，不退二线阿，若得罪了头，不得派发到清水衙门坐冷板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
j*u
37 楼
蛋白相互作用从物理相互作用开始做是南辕北辙
现有功能readout
再回头做相互作用。
有功能没相互作用还能往下做
有相互作用没功能就废了
现有功能readout
再回头做相互作用。
有功能没相互作用还能往下做
有相互作用没功能就废了
g*7
38 楼
"互相张总，李总的叫着"
国内流行这个称呼.不能说明太大问题.
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
国内流行这个称呼.不能说明太大问题.
【在 H******7 的大作中提到】
: 随着国家经济快速增长，现在国同龄人已经轻而易举拥有了我们在国外根本接触不到的
: 资源。我的很多同学当白领都到了总监级别，也有个别副总裁。一个同学的话说的我印
: 象很深，“在美国一个麦肯锡合伙人就觉得特牛逼了，在国内这种人见到我爸单位一个
: 处长都得乖乖跟孙子似的”（他爸爸是国家某金融机关局级干部）
: 也见到了一些名人，忙得找不到北的菲菲（汪小菲），英语在同龄人中绝对出类拔萃的
: 于再清局长（首先感谢国家）。怎么说呢？我觉得思想水平都比我强多了。
: 出去烧烤了一次，河边炊烟袅袅，年轻人都兴高采烈开车来，互相打招呼。我们这桌碳
: 烧完了，隔壁桌一听立刻给我们拿来他们的，我们也立刻还了几个肥腰子。我侧耳听了
: 听别人的谈话，互相张总，李总的叫着（国内很多年轻人都有第二产业）。互相吹着自
: 己生意上的经历，去哪里看房子，然后相约去别的国家郊游，其乐融融。我感觉陌生人
S*e
39 楼
你这个相当于先证明他们生了个娃，然后帮他们确定关系，transient就是419，
permanent就是领证了。
你这属于懒人方法，但是solid。只是找娃不是什么时候都那么容易。关键得要有灵感
，难！
【在 j*******u 的大作中提到】
: 蛋白相互作用从物理相互作用开始做是南辕北辙
: 现有功能readout
: 再回头做相互作用。
: 有功能没相互作用还能往下做
: 有相互作用没功能就废了
permanent就是领证了。
你这属于懒人方法，但是solid。只是找娃不是什么时候都那么容易。关键得要有灵感
，难！
【在 j*******u 的大作中提到】
: 蛋白相互作用从物理相互作用开始做是南辕北辙
: 现有功能readout
: 再回头做相互作用。
: 有功能没相互作用还能往下做
: 有相互作用没功能就废了
h*e
40 楼
别说这个真处级了，80年代我爸他们水泥厂的供销处处长（股级）都牛得不得了，当时
水泥出厂价和市场价一车差几千，一堆水泥贩子跟爷爷一样地供着，
拜处长，
口中的
，不是给坐在这个职位的人装孙
板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
【在 w*******6 的大作中提到】
: 处长和处长也大有不同了，呵呵。你爸单位的处长太牛了。牛处长多，出去了不受待见
: 的处长也多，关键是这处长能干点啥。啥叫见到你爸单位处长乖乖的跟孙子一样阿，不
: 过是各取所需而已。我看到这一句，就觉得此人无比幼稚。人家真的乖，还是装的乖，
: 这不就是某种文化中的一种基本技能吗？人凭啥当孙子阿，就因为对方是一处长，膜拜处长，
: 呵呵。装的乖不过是人家实现目标的一种心理策略，要说谁是真的SB,我倒觉的是你口中的
: 那个处长，自认为人家真的拿他当回事了。搞清楚，人家是在给处长这个职位装孙子，不是给坐在这个职位的人装孙
: 子，人贵在有自知之明，都是演戏而已，当真就
: 没劲了。当处长能当一辈子阿，不退二线阿，若得罪了头，不得派发到清水衙门坐冷板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
水泥出厂价和市场价一车差几千，一堆水泥贩子跟爷爷一样地供着，
拜处长，
口中的
，不是给坐在这个职位的人装孙
板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
【在 w*******6 的大作中提到】
: 处长和处长也大有不同了，呵呵。你爸单位的处长太牛了。牛处长多，出去了不受待见
: 的处长也多，关键是这处长能干点啥。啥叫见到你爸单位处长乖乖的跟孙子一样阿，不
: 过是各取所需而已。我看到这一句，就觉得此人无比幼稚。人家真的乖，还是装的乖，
: 这不就是某种文化中的一种基本技能吗？人凭啥当孙子阿，就因为对方是一处长，膜拜处长，
: 呵呵。装的乖不过是人家实现目标的一种心理策略，要说谁是真的SB,我倒觉的是你口中的
: 那个处长，自认为人家真的拿他当回事了。搞清楚，人家是在给处长这个职位装孙子，不是给坐在这个职位的人装孙
: 子，人贵在有自知之明，都是演戏而已，当真就
: 没劲了。当处长能当一辈子阿，不退二线阿，若得罪了头，不得派发到清水衙门坐冷板凳阿，看清楚自己半斤八两吧。
b*2
41 楼
扯淡啊
他一个国家总书记能去美国定居？ 退休以后也不行啊
【在 d*******8 的大作中提到】
: 土了吧，你可知胡总在比费力山丘的陋室的车库地面铺的都是金砖？
: 至于你信不信，反正我是信了。
:
: 识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙
: 子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一
: 副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
他一个国家总书记能去美国定居？ 退休以后也不行啊
【在 d*******8 的大作中提到】
: 土了吧，你可知胡总在比费力山丘的陋室的车库地面铺的都是金砖？
: 至于你信不信，反正我是信了。
:
: 识，随便应付他们一下，还真以为自己官大的可以压人了？？不过是一个迫使大家装孙
: 子的官僚制度而已。另外，看到去郊区吃东西互相张总长李总短那一块，觉得虚伪，一
: 副互相奉承应付的姿态。看到就觉得累心
y*n
42 楼
lz能不能给我解释一下为啥精英们巴巴的要把儿子女儿送美国来。
x*g
43 楼
说得是 胡 绵 涛（楼主，Huan2007），不是胡锦涛
【在 b********2 的大作中提到】
: 扯淡啊
: 他一个国家总书记能去美国定居？ 退休以后也不行啊
【在 b********2 的大作中提到】
: 扯淡啊
: 他一个国家总书记能去美国定居？ 退休以后也不行啊
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