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如何提高工具病毒感染组织的效率？请支招

如何提高工具病毒感染组织的效率？请支招# Biology - 生物学

b*n2016-10-14 07:10

1 楼

最近有一个很好的想法想要做，但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织，试
过非常多的方法，都无法看到有效的感染。
我试过lentivirus (滴度在10^6)，不同种类的AAV（滴度在10^11）；试过用强免疫抑
制剂处理小鼠；试过用裸鼠来操作病毒感染，效果均很差（只有<10%细胞被感染。）。
病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使
我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二，定会感激不尽（散尽伪币
，尽管知道大家都不用了）。
期待在版友的指导下走过这个瓶颈，谢谢谢谢！

j*i2016-10-14 07:10

2 楼

什么组织?

【在 b*****n 的大作中提到】

: 最近有一个很好的想法想要做，但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织，试
: 过非常多的方法，都无法看到有效的感染。
: 我试过lentivirus (滴度在10^6)，不同种类的AAV（滴度在10^11）；试过用强免疫抑
: 制剂处理小鼠；试过用裸鼠来操作病毒感染，效果均很差（只有<10%细胞被感染。）。
: 病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使
: 我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二，定会感激不尽（散尽伪币
: ，尽管知道大家都不用了）。
: 期待在版友的指导下走过这个瓶颈，谢谢谢谢！

b*n2016-10-14 07:10

3 楼

皮肤

【在 j******i 的大作中提到】

: 什么组织?

j*i2016-10-14 07:10

4 楼

皮肤用lenti很容易感染不过老鼠的皮肤比较薄注射有点难度你的lenti滴度不高啊
没有超离心吧

【在 b*****n 的大作中提到】

: 皮肤

b*n2016-10-14 07:10

5 楼

滴度有1X10^7/ml，经过了10倍浓缩。
能感染上皮不？

啊

【在 j******i 的大作中提到】

: 皮肤用lenti很容易感染不过老鼠的皮肤比较薄注射有点难度你的lenti滴度不高啊
: 没有超离心吧

l*72016-10-14 07:10

6 楼

你要用病毒的易感组织／细胞才对呀。
非易感组织／细胞是很难被感染的，
嵌入新DNA／RNA 后，病毒的感染力会变弱或丢失的。

v*a2016-10-14 07:10

7 楼

病毒有效感染组织细胞的前提之一，是该细胞表面有足够的受体表达。
已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞，因此，可以考虑将该短肽的编码基因和你
的目的基因融合到一起（中间用序列隔开）。这种修饰过的病毒，也许会增强感染效率
。

l*72016-10-14 07:10

8 楼

如果实在不行，你也可使使按普通plasmid处理的方法：
用gene－gun 或 transfection。

j*i2016-10-14 07:10

9 楼

你这个滴度还是不高
不知道你感兴趣的是哪种细胞下面这篇文章用的是intradermal injection
Intradermal Injection of Lentiviral Vectors Corrects Regenerated Human
Dystrophic Epidermolysis Bullosa Skin Tissue in Vivo

【在 b*****n 的大作中提到】

: 滴度有1X10^7/ml，经过了10倍浓缩。
: 能感染上皮不？
:
: 啊

j*i2016-10-14 07:10

10 楼

挺有意思的有参考文献吗

【在 v********a 的大作中提到】

: 病毒有效感染组织细胞的前提之一，是该细胞表面有足够的受体表达。
: 已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞，因此，可以考虑将该短肽的编码基因和你
: 的目的基因融合到一起（中间用序列隔开）。这种修饰过的病毒，也许会增强感染效率
: 。