h*u
2 楼
不知铺地板是否有季节性，一年中什么时候最适合铺地板？或者可能无所谓？
z*o
3 楼
版上高人多，我想请教几个CRISPR library的问题，
我现在要做一个新物种的CRISPR的library screening，该物种基因组序列已知，也有
圈内人士做了简易的sgRNA预测程序，很多单基因的ko或者大片断的ki都已成功，只是
addgene上没有该物种的库。现在的问题是，我如果要从头建库，要花多少钱？有公司
愿意提供类似的建库服务吗？这个库是先大规模合成sgRNA然后包装进virus里面吗？
望有相关经验的给点提示，多谢。
我现在要做一个新物种的CRISPR的library screening，该物种基因组序列已知，也有
圈内人士做了简易的sgRNA预测程序，很多单基因的ko或者大片断的ki都已成功，只是
addgene上没有该物种的库。现在的问题是，我如果要从头建库，要花多少钱？有公司
愿意提供类似的建库服务吗？这个库是先大规模合成sgRNA然后包装进virus里面吗？
望有相关经验的给点提示，多谢。
r*d
4 楼
google
d*s
5 楼
有关系，最好是一年的平均温度时候铺。否则40度时候铺，到了夏天80度，温差太大，
就有麻烦。
【在 h***u 的大作中提到】
: 不知铺地板是否有季节性，一年中什么时候最适合铺地板？或者可能无所谓？
就有麻烦。
【在 h***u 的大作中提到】
: 不知铺地板是否有季节性，一年中什么时候最适合铺地板？或者可能无所谓？
j*n
6 楼
和你平时做的没啥区别 流程是一摸一样的
就是gRNA是合成oligo pool
克隆的时候要保证效率够高
最好能cover 100x library
我们都是自己建库 没啥困难的
合成oligo不贵 我们用的90k oligo大概4-5k刀的样子
至于有没提供建库服务以及收费就不清楚了
【在 z*******o 的大作中提到】
: 版上高人多，我想请教几个CRISPR library的问题，
: 我现在要做一个新物种的CRISPR的library screening，该物种基因组序列已知，也有
: 圈内人士做了简易的sgRNA预测程序，很多单基因的ko或者大片断的ki都已成功，只是
: addgene上没有该物种的库。现在的问题是，我如果要从头建库，要花多少钱？有公司
: 愿意提供类似的建库服务吗？这个库是先大规模合成sgRNA然后包装进virus里面吗？
: 望有相关经验的给点提示，多谢。
就是gRNA是合成oligo pool
克隆的时候要保证效率够高
最好能cover 100x library
我们都是自己建库 没啥困难的
合成oligo不贵 我们用的90k oligo大概4-5k刀的样子
至于有没提供建库服务以及收费就不清楚了
【在 z*******o 的大作中提到】
: 版上高人多，我想请教几个CRISPR library的问题，
: 我现在要做一个新物种的CRISPR的library screening，该物种基因组序列已知，也有
: 圈内人士做了简易的sgRNA预测程序，很多单基因的ko或者大片断的ki都已成功，只是
: addgene上没有该物种的库。现在的问题是，我如果要从头建库，要花多少钱？有公司
: 愿意提供类似的建库服务吗？这个库是先大规模合成sgRNA然后包装进virus里面吗？
: 望有相关经验的给点提示，多谢。
s*u
7 楼
见过7 eleven 有。不过不让用信用卡买。
【在 k******1 的大作中提到】
: 家门口的这两家都不让用信用卡.
【在 k******1 的大作中提到】
: 家门口的这两家都不让用信用卡.
l*o
8 楼
可是家里一般都会开暖气的吧？
【在 d*****s 的大作中提到】
: 有关系，最好是一年的平均温度时候铺。否则40度时候铺，到了夏天80度，温差太大，
: 就有麻烦。
【在 d*****s 的大作中提到】
: 有关系，最好是一年的平均温度时候铺。否则40度时候铺，到了夏天80度，温差太大，
: 就有麻烦。
z*o
9 楼
多谢指点，你合成gRNA是根据网上预测的进行的吗?
【在 j****n 的大作中提到】
: 和你平时做的没啥区别 流程是一摸一样的
: 就是gRNA是合成oligo pool
: 克隆的时候要保证效率够高
: 最好能cover 100x library
: 我们都是自己建库 没啥困难的
: 合成oligo不贵 我们用的90k oligo大概4-5k刀的样子
: 至于有没提供建库服务以及收费就不清楚了
【在 j****n 的大作中提到】
: 和你平时做的没啥区别 流程是一摸一样的
: 就是gRNA是合成oligo pool
: 克隆的时候要保证效率够高
: 最好能cover 100x library
: 我们都是自己建库 没啥困难的
: 合成oligo不贵 我们用的90k oligo大概4-5k刀的样子
: 至于有没提供建库服务以及收费就不清楚了
c*2
10 楼
try another CVS. Only CVS works.
e*t
11 楼
我觉得湿度影响很大。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 可是家里一般都会开暖气的吧？
【在 l*****o 的大作中提到】
: 可是家里一般都会开暖气的吧？
d*s
12 楼
是新地板和subfloor湿度相差不能超过10%
【在 e********t 的大作中提到】
: 我觉得湿度影响很大。
【在 e********t 的大作中提到】
: 我觉得湿度影响很大。
R*R
13 楼
秋天。
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