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myc-tag放在融合蛋白中间会被抗体识别吗？

myc-tag放在融合蛋白中间会被抗体识别吗？# Biology - 生物学

k*n2017-07-05 07:07

1 楼

图两幅

g*n2017-07-05 07:07

2 楼

我的目标蛋白在C-term加了两个tag，其中的myc-tag放在倒数第二个，最后一个tag有
45个氨基酸，有的人说myc-tag必须在两端才能被识别，请问我这种情况做WB的话能被
抗体识别吗（比如9E10）?
谢谢！

o*12017-07-05 07:07

3 楼

wow, the 1st, who is she ?

【在 k**n 的大作中提到】

: 图两幅

m*o2017-07-05 07:07

4 楼

“有的人说myc-tag必须在两端才能被识别”
这个有实验根据？
楼主可以亲自试一下，然后来给大家汇报以下

m*d2017-07-05 07:07

5 楼

http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html

【在 o******1 的大作中提到】

: wow, the 1st, who is she ?

m*u2017-07-05 07:07

6 楼

你们问这种问题，真是学生物的？

w*n2017-07-05 07:07

7 楼

像假的的。。。。

m*u2017-07-05 07:07

8 楼

只要能暴露在表面，为什么不能被抗体识别？融合蛋白放在头上（两端），蛋白本身能
折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
不能保证你的蛋白能够成功。
我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。

b*e2017-07-05 07:07

9 楼

doable yah

【在 m**d 的大作中提到】

: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html

N*e2017-07-05 07:07

10 楼

myc-tag放在中间可以被识别。
前提是你对你的蛋白质上的domain和功能有很好的了解。不要插在其中，myc-tag尽量
能够暴露在外。
放在两端也可能会破坏蛋白质功能，比如N端信号肽。又比如KASH protein，myc放在C
端一定不行。
最简单的是BLAST一下，看看那个地方不保守就放哪里。

H*72017-07-05 07:07

11 楼

horrible voice

【在 m**d 的大作中提到】

: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html

g*n2017-07-05 07:07

12 楼

谢谢大家的回复

H*72017-07-05 07:07

13 楼

又是拉长的

【在 k**n 的大作中提到】

: 图两幅

j*n2017-07-05 07:07

14 楼

他是western，不存在表面不表面的问题，早都变性、暴露了

【在 m******u 的大作中提到】

: 只要能暴露在表面，为什么不能被抗体识别？融合蛋白放在头上（两端），蛋白本身能
: 折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
: 折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
: 最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
: 不能保证你的蛋白能够成功。
: 我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。