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求助：HPLC基线漂移

求助：HPLC基线漂移# Chemistry - 化学

Q*32011-04-17 07:04

1 楼

我就经常能发现很多创业的人喜欢夸大事实的说。我知道这样能让大家感觉自己做的事
情有面子。但是实际上测评你们工作还有你们公司估值的人也是靠着你们的言行举止来
评断你们公司的软实力的。所以真的别说谎。
之前一个朋友跟我说的。一个他以前手下的年轻人自主创业做发明去了。然后夸大事实
说的自己有机房还有厂房，其实自己只有自己那个6个人的小团队。那边投资的觉得可
以啊你要是有厂房就生产几个我们看看啊。这个难坏了这个6人小团队。到了交期也没
做完。东西我朋友说感觉还挺好的。但是骗人这边自然是不能忍的。自然就是连带这几
个小哥们一起打入黑名单。以后要是再自主创业可能还得背上可能会欺诈投资人钱的印
记。
所以这种时候务必不能说谎。一亿飘十亿的那种真的是会作死会死的那种。所以建议大
家千万不要在这个时候犯傻。
其实说的话也要注意技巧。别傻乎乎的就说我没有我不懂我不知道。这些其实投资的人
也看不出你的潜力自然也不会给。说话还是需要注意点技巧的。但是技巧归技巧不能用
欺骗的，欺骗肯定是不行的。欺骗肯定是要以后遭受到报应的。所以务必要注意！

s*a2011-04-17 07:04

2 楼

看着真舒服。。
Coin 都冷冰冰的

s*i2011-04-17 07:04

3 楼

今天早上差点挂掉幸好被人救了
要挂的一瞬间想到的是自己平日的为人如何的糟糕
多么地不懂得宽容和感激
平时只有到了关键时候才会想到攒rp做好事/发誓好好学习工作/计划以后健康生活之类
来求老天保佑（我不信教但是经常用一个宽泛的“老天”来代表各路神灵Orz...）
然后事情过去了又是一如既往不知悔改
于是现在开始很认真地考虑自己生命的问题
如何成为一个善人好人在我每次侥幸渡过难关之后的几小时到几天的时间里面都有想过
但是看来普通的道德情操上的自我培养或励志似乎对我已经没有什么用了
不知道我这种情况信教有没有用

c*r2011-04-17 07:04

4 楼

我做HPLC的时候，最近出现一个问题，基线出现大的漂移。流动相为(A)0.1% TFA/
water, (B)0.1% TFA/acetonitrile, C18 column, 如果是isocratic没有什么问题，但
是走梯度的时候，比如%B从10到30，基线就出现大的漂移，呈现为一条和水平相交30
度甚至更大的直线。我换了柱子，重新配流动相，把B的TFA去掉，用IPA洗流通池都没
有解决问题，还有什么可能？

Q*32011-04-17 07:04

5 楼

不过现在创业的人群真的不如以前那种灵光了。感觉大家都是摸石头过河的那种意味。
不像是以前有冲劲了。但是嘴上还是要注意的。以前挣钱现在要举步维艰是正确的选择
。

g*n2011-04-17 07:04

6 楼

邮票有色彩，适合年轻人。但邮票看得摸不得，趣味少很多。

c*r2011-04-17 07:04

7 楼

走个复杂点的梯度，比如10到30再到10，基线会往下走否？

30

【在 c****r 的大作中提到】

: 我做HPLC的时候，最近出现一个问题，基线出现大的漂移。流动相为(A)0.1% TFA/
: water, (B)0.1% TFA/acetonitrile, C18 column, 如果是isocratic没有什么问题，但
: 是走梯度的时候，比如%B从10到30，基线就出现大的漂移，呈现为一条和水平相交30
: 度甚至更大的直线。我换了柱子，重新配流动相，把B的TFA去掉，用IPA洗流通池都没
: 有解决问题，还有什么可能？

y*h2011-04-17 07:04

8 楼

什么投资人投钱的时候都不检查一下？
要是没给钱就想看成果
没钱怎么开工

A*t2011-04-17 07:04

9 楼

把旧孙象和帆船当墙纸，天天摸。

【在 g******n 的大作中提到】

: 邮票有色彩，适合年轻人。但邮票看得摸不得，趣味少很多。

c*m2011-04-17 07:04

10 楼

change the UV wavelength. ACN has absorption at low wavelength then gives
you a baseline shift.

30

【在 c****r 的大作中提到】

a*u2011-04-17 07:04

11 楼

爐子上燒一下就熱了。
你郵票能怎麼玩？

【在 s*****a 的大作中提到】

: 看着真舒服。。
: Coin 都冷冰冰的

c*r2011-04-17 07:04

12 楼

走过了，如果只是走10（isocratic),基线是平的；走梯度10到30，基线就漂移；再到
10，基线又回到开始的水平，并保持平稳。所以我想问题在于走梯度的时候，也许TFA
或者acetonitrile的问题，可是去掉TFA，换acetonitrile还是如此，不知道什么原因。

【在 c***r 的大作中提到】

: 走个复杂点的梯度，比如10到30再到10，基线会往下走否？
:
: 30

g*n2011-04-17 07:04

13 楼

邮票也可以烧一下，还能有火焰呢。

【在 a**u 的大作中提到】

: 爐子上燒一下就熱了。
: 你郵票能怎麼玩？

c*r2011-04-17 07:04

14 楼

波长214nm,确实有点低，但是以前走同样的波长和梯度，没有这个漂移的问题啊。

【在 c******m 的大作中提到】

: change the UV wavelength. ACN has absorption at low wavelength then gives
: you a baseline shift.
:
: 30

a*u2011-04-17 07:04

15 楼

火焰好玩。還有毛頭像被燒的快感。

【在 g******n 的大作中提到】

: 邮票也可以烧一下，还能有火焰呢。

c*m2011-04-17 07:04

16 楼

are you using the same type of ACN? or from the same vendor? some type of
organic solvent has stronger UV absorbance.
another reason is some thing is stuck on your column and can only be eluted
out by ACN.

【在 c****r 的大作中提到】

: 波长214nm,确实有点低，但是以前走同样的波长和梯度，没有这个漂移的问题啊。

m*u2011-04-17 07:04

17 楼

能赚钱就好！

【在 s*****a 的大作中提到】

: 看着真舒服。。
: Coin 都冷冰冰的

P*e2011-04-17 07:04

18 楼

mobile phase B 10-30% gradient内 baseline linearly increase. 听起来像是
ACN的问题。Try higher wavelength such as 254 nm, if no baseline drifting,
most likely it is the ACN impuritiy problems.有没有试过不同batch或vendor 的
ACN？

题，但
30

【在 c****r 的大作中提到】

f*r2011-04-17 07:04

19 楼

走gradient ACN，baseline 不漂不就不正常了嘛

30

【在 c****r 的大作中提到】

s*c2011-04-17 07:04

20 楼

Remove TFA from both mobile A and B to see if you still have the same
baseline drift. TFA-water-ACN is known for baseline drift and mixing issue.
If removing TFA helps for the baseline, you can add 0.115% TFA in water and
0.1% TFA in ACN to match the absorbance.

TFA
因。

【在 c****r 的大作中提到】

: 走过了，如果只是走10（isocratic),基线是平的；走梯度10到30，基线就漂移；再到
: 10，基线又回到开始的水平，并保持平稳。所以我想问题在于走梯度的时候，也许TFA
: 或者acetonitrile的问题，可是去掉TFA，换acetonitrile还是如此，不知道什么原因。

f*k2011-04-17 07:04

21 楼

把流动相A和B 弄成pre-mixed
比如，把A弄成0.1% TFA, 90% water, 10% ACN,
把B弄成0.1% TFA, 10% water, 90% ACN
这样一来，你的gradient也要相应改变，但是还是可以弄成和你原来差不多的gradient
，你自己算一下就成了。

c*r2011-04-17 07:04

22 楼

谢谢各位解答，是ACN的问题，用了很久这个vendor的ACN一直没有问题，所以没有往这
上面想，没想到这次买来的ACN真的有问题，换了另一个vendor的就好了。