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l*n
1 楼
p*e
2 楼
张靓颖要结婚了，本来是好事，但却被母亲的一纸控诉准老公冯柯的长文搞得声泪俱下。丈母娘看不上准女婿，一条一条把女婿做过的事儿都列出来让大家评判，这婚张靓颖结的真难受。
不管事实真相如何，冯柯有没有控制张靓颖的钱财和人，这些作为一个路人看来永远都不会有真相。但大家看到的能确定的事实却是张靓颖确实死心塌地跟了冯柯13年才转正，这段感情路靓颖真的不容易。
看看张靓颖的人生路，冯柯的确扮演了非常重要以至于无可替代的角色。
张靓颖出身单亲家庭，家境一般，小小年纪就要唱歌养家，对于父爱的渴望可想而知。19岁认识比她大十几岁的冯柯，确定下恋情之后因为冯柯不让公布也就没有承认，那个时候冯柯对她而言就有了爱的归属的意义了吧，所以才事事听从冯柯的安排。后者又帮她走过了超女选秀的全部，直到她成名，这样一个如父如兄的男人，张靓颖如果不是出于真爱，怎么可能忍受小三的骂名还是要和他在一起。
从当初张靓颖“逼婚”到现在终于修成正果，也许冯柯最开始不是认真的，但最终这个姑娘的执着也该把他打动了。
与其说张靓颖爱的无法自拔，不如说这个被“养成”的姑娘不懂如何放手，她的爱是冯柯激发出来的，谁也替代不了。
不管事实真相如何，冯柯有没有控制张靓颖的钱财和人，这些作为一个路人看来永远都不会有真相。但大家看到的能确定的事实却是张靓颖确实死心塌地跟了冯柯13年才转正，这段感情路靓颖真的不容易。
看看张靓颖的人生路，冯柯的确扮演了非常重要以至于无可替代的角色。
张靓颖出身单亲家庭，家境一般，小小年纪就要唱歌养家，对于父爱的渴望可想而知。19岁认识比她大十几岁的冯柯，确定下恋情之后因为冯柯不让公布也就没有承认，那个时候冯柯对她而言就有了爱的归属的意义了吧，所以才事事听从冯柯的安排。后者又帮她走过了超女选秀的全部，直到她成名，这样一个如父如兄的男人，张靓颖如果不是出于真爱，怎么可能忍受小三的骂名还是要和他在一起。
从当初张靓颖“逼婚”到现在终于修成正果，也许冯柯最开始不是认真的，但最终这个姑娘的执着也该把他打动了。
与其说张靓颖爱的无法自拔，不如说这个被“养成”的姑娘不懂如何放手，她的爱是冯柯激发出来的，谁也替代不了。
j*j
3 楼
【 以下文字转载自 Military2 讨论区 】
发信人: yanwang08 (rising), 信区: Military2
标 题: 珊瑚海海战 动画
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 16 00:15:33 2010, 美东)
小鬼子号称的王牌： 岩本彻三
http://baike.baidu.com/view/2720981.htm
发信人: yanwang08 (rising), 信区: Military2
标 题: 珊瑚海海战 动画
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 16 00:15:33 2010, 美东)
小鬼子号称的王牌： 岩本彻三
http://baike.baidu.com/view/2720981.htm
h*o
4 楼
侏儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕
2003年大连理工大学电子系考研失利的青岛二中学生侏儒婊子邢慧强被中国海洋大学电
子系破格录取为中国海洋大学电子系的硕士，如果给半婊子中国海洋大学加上一个形容
词的话，我希望是全婊子，如果要给这个全婊子中国海洋大学加上一个期限的话，我希
望是一万年。如果给半婊子邢慧强加上一个形容词的话，我希望是全婊子侏儒，如果给
全婊子侏儒邢慧强加上一个期限的话，我希望是一万年。喝孟婆汤过奈何桥去投胎吧，
全婊子侏儒邢慧强。到2020年基本实现全国人民百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研
黑幕半婊子邢慧强”，把百度“半婊子中国海洋大学半婊子邢慧强半婊子保研黑幕”全
面推向21世纪，坚持百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕半婊子邢慧强”一万年
不动摇，把“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”百度成婊子。此处应该有掌声.大
家都来为侏儒婊子邢慧强喝彩，大家都来为半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕喝彩。
曾经青岛二中出了个侏儒婊子邢慧强，我没有珍惜，等到我失去的时候我才后悔。如果
上天再给我一次机会的话，我会对这个青岛二中的侏儒婊子说：“半婊子中国海洋大学
半婊子保研黑幕”，如果非要给“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”加上一个期限
的话，我希望是一万年。
全国人民跟我一起各种百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”，全国人民跟我一
起发誓把“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”百度成婊子。侏儒侏儒婊子邢慧强，
侏儒侏儒婊子中国海洋大学。
一般人我不告诉他，这个青岛二中的侏儒婊子邢慧强毕业于大连理工大学电子系99级
994班，这个侏儒婊子在大连理工大学电子系994班还当了个学习委员，大二故意把数据
库挂了，想得瑟得瑟青岛二中的水平，考研考了282分，暗中被中国海洋大学秘密转到
半婊子中国海洋大学电子系读硕士，这个侏儒婊子还拿了奖学金，大家可以到青岛二中
看看这个侏儒婊子，听说在青岛海信工作，全国人民都来瞻仰这个海信的侏儒婊子。今
天你百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”了吗？侏儒天天有，天天都要百度啊。
就青岛二中这个侏儒婊子邢慧强，2003年我俩还故意在烟台出了场车祸，全世界的人民
看过来，看过来，不要被“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”吓坏，其实“半婊子
中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱。
对面的“侏儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”看过来，看过来，看过
来，其实“侏儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱，不要被“侏
儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”样子吓坏，其实“侏儒婊子邢慧强
半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱，侏儒婊，邢慧婊，侏儒邢慧强婊。大家
跟我一起念。
侏儒婊，侏儒婊，侏儒侏儒邢慧婊，邢慧婊邢慧婊，邢慧邢慧侏儒婊，邢慧强婊邢慧强
婊，邢慧强婊完中国海洋大学婊,2014年到了，新年侏儒婊，马年到了，新年新气象，
去青岛二中看看这个侏儒婊子邢慧强，在大连理工大学电子系1999年从青岛二中保送到
大连理工大学电子系994班，这个傻逼侏儒婊还当了个学习委员，拿了奖学金，大二故
意把数据库挂了，嘚瑟嘚瑟青岛二中的水平，结果弄砸了，这个侏儒婊子考研考了282
分，被半婊子中国海洋大学半婊子海大电子系破格录取为半婊子中国海洋大学电子系的
硕士，毕业去青岛海信工作，被外派到南非个沃达丰谈判，全国人民一起来看看海信青
岛二中中国海洋大学这个侏儒婊子，半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕来了
2014来了，新年侏儒婊，2014侏儒婊，世界杯侏儒婊，全国人民来青岛看青岛海信青岛
二中中国海洋大学侏儒婊子邢慧强。看我的嘴型“侏儒婊”
新年新年半婊子幕，半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕，把半婊子中国海洋大学半婊
子保研黑幕百度成婊子
2003年大连理工大学电子系考研失利的青岛二中学生侏儒婊子邢慧强被中国海洋大学电
子系破格录取为中国海洋大学电子系的硕士，如果给半婊子中国海洋大学加上一个形容
词的话，我希望是全婊子，如果要给这个全婊子中国海洋大学加上一个期限的话，我希
望是一万年。如果给半婊子邢慧强加上一个形容词的话，我希望是全婊子侏儒，如果给
全婊子侏儒邢慧强加上一个期限的话，我希望是一万年。喝孟婆汤过奈何桥去投胎吧，
全婊子侏儒邢慧强。到2020年基本实现全国人民百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研
黑幕半婊子邢慧强”，把百度“半婊子中国海洋大学半婊子邢慧强半婊子保研黑幕”全
面推向21世纪，坚持百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕半婊子邢慧强”一万年
不动摇，把“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”百度成婊子。此处应该有掌声.大
家都来为侏儒婊子邢慧强喝彩，大家都来为半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕喝彩。
曾经青岛二中出了个侏儒婊子邢慧强，我没有珍惜，等到我失去的时候我才后悔。如果
上天再给我一次机会的话，我会对这个青岛二中的侏儒婊子说：“半婊子中国海洋大学
半婊子保研黑幕”，如果非要给“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”加上一个期限
的话，我希望是一万年。
全国人民跟我一起各种百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”，全国人民跟我一
起发誓把“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”百度成婊子。侏儒侏儒婊子邢慧强，
侏儒侏儒婊子中国海洋大学。
一般人我不告诉他，这个青岛二中的侏儒婊子邢慧强毕业于大连理工大学电子系99级
994班，这个侏儒婊子在大连理工大学电子系994班还当了个学习委员，大二故意把数据
库挂了，想得瑟得瑟青岛二中的水平，考研考了282分，暗中被中国海洋大学秘密转到
半婊子中国海洋大学电子系读硕士，这个侏儒婊子还拿了奖学金，大家可以到青岛二中
看看这个侏儒婊子，听说在青岛海信工作，全国人民都来瞻仰这个海信的侏儒婊子。今
天你百度“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”了吗？侏儒天天有，天天都要百度啊。
就青岛二中这个侏儒婊子邢慧强，2003年我俩还故意在烟台出了场车祸，全世界的人民
看过来，看过来，不要被“半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”吓坏，其实“半婊子
中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱。
对面的“侏儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”看过来，看过来，看过
来，其实“侏儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱，不要被“侏
儒婊子邢慧强半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”样子吓坏，其实“侏儒婊子邢慧强
半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕”很可爱，侏儒婊，邢慧婊，侏儒邢慧强婊。大家
跟我一起念。
侏儒婊，侏儒婊，侏儒侏儒邢慧婊，邢慧婊邢慧婊，邢慧邢慧侏儒婊，邢慧强婊邢慧强
婊，邢慧强婊完中国海洋大学婊,2014年到了，新年侏儒婊，马年到了，新年新气象，
去青岛二中看看这个侏儒婊子邢慧强，在大连理工大学电子系1999年从青岛二中保送到
大连理工大学电子系994班，这个傻逼侏儒婊还当了个学习委员，拿了奖学金，大二故
意把数据库挂了，嘚瑟嘚瑟青岛二中的水平，结果弄砸了，这个侏儒婊子考研考了282
分，被半婊子中国海洋大学半婊子海大电子系破格录取为半婊子中国海洋大学电子系的
硕士，毕业去青岛海信工作，被外派到南非个沃达丰谈判，全国人民一起来看看海信青
岛二中中国海洋大学这个侏儒婊子，半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕来了
2014来了，新年侏儒婊，2014侏儒婊，世界杯侏儒婊，全国人民来青岛看青岛海信青岛
二中中国海洋大学侏儒婊子邢慧强。看我的嘴型“侏儒婊”
新年新年半婊子幕，半婊子中国海洋大学半婊子保研黑幕，把半婊子中国海洋大学半婊
子保研黑幕百度成婊子
Z*N
5 楼
Hi everyone,
I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
splicing? If so, any suggestion?
Many Thanks.
I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
splicing? If so, any suggestion?
Many Thanks.
f*t
6 楼
T*n
7 楼
只有自己知道
Y*e
8 楼
这是什么？
看到三菱了。
看到三菱了。
Z*N
9 楼
ding
p*e
10 楼
张靓颖要结婚了，本来是好事，但却被母亲的一纸控诉准老公冯柯的长文搞得声泪俱下。丈母娘看不上准女婿，一条一条把女婿做过的事儿都列出来让大家评判，这婚张靓颖结的真难受。
不管事实真相如何，冯柯有没有控制张靓颖的钱财和人，这些作为一个路人看来永远都不会有真相。但大家看到的能确定的事实却是张靓颖确实死心塌地跟了冯柯13年才转正，这段感情路靓颖真的不容易。
看看张靓颖的人生路，冯柯的确扮演了非常重要以至于无可替代的角色。
张靓颖出身单亲家庭，家境一般，小小年纪就要唱歌养家，对于父爱的渴望可想而知。19岁认识比她大十几岁的冯柯，确定下恋情之后因为冯柯不让公布也就没有承认，那个时候冯柯对她而言就有了爱的归属的意义了吧，所以才事事听从冯柯的安排。后者又帮她走过了超女选秀的全部，直到她成名，这样一个如父如兄的男人，张靓颖如果不是出于真爱，怎么可能忍受小三的骂名还是要和他在一起。
从当初张靓颖“逼婚”到现在终于修成正果，也许冯柯最开始不是认真的，但最终这个姑娘的执着也该把他打动了。
与其说张靓颖爱的无法自拔，不如说这个被“养成”的姑娘不懂如何放手，她的爱是冯柯激发出来的，谁也替代不了。
不管事实真相如何，冯柯有没有控制张靓颖的钱财和人，这些作为一个路人看来永远都不会有真相。但大家看到的能确定的事实却是张靓颖确实死心塌地跟了冯柯13年才转正，这段感情路靓颖真的不容易。
看看张靓颖的人生路，冯柯的确扮演了非常重要以至于无可替代的角色。
张靓颖出身单亲家庭，家境一般，小小年纪就要唱歌养家，对于父爱的渴望可想而知。19岁认识比她大十几岁的冯柯，确定下恋情之后因为冯柯不让公布也就没有承认，那个时候冯柯对她而言就有了爱的归属的意义了吧，所以才事事听从冯柯的安排。后者又帮她走过了超女选秀的全部，直到她成名，这样一个如父如兄的男人，张靓颖如果不是出于真爱，怎么可能忍受小三的骂名还是要和他在一起。
从当初张靓颖“逼婚”到现在终于修成正果，也许冯柯最开始不是认真的，但最终这个姑娘的执着也该把他打动了。
与其说张靓颖爱的无法自拔，不如说这个被“养成”的姑娘不懂如何放手，她的爱是冯柯激发出来的，谁也替代不了。
p*e
11 楼
感觉一群蜜蜂，嗡嗡嗡，呵呵
【在 j***j 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military2 讨论区 】
: 发信人: yanwang08 (rising), 信区: Military2
: 标 题: 珊瑚海海战 动画
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 16 00:15:33 2010, 美东)
: 小鬼子号称的王牌： 岩本彻三
: http://baike.baidu.com/view/2720981.htm
【在 j***j 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military2 讨论区 】
: 发信人: yanwang08 (rising), 信区: Military2
: 标 题: 珊瑚海海战 动画
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 16 00:15:33 2010, 美东)
: 小鬼子号称的王牌： 岩本彻三
: http://baike.baidu.com/view/2720981.htm
h*g
12 楼
不知道，帮顶。PS，你真够Lucky的
a
g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
【在 Z*****N 的大作中提到】
: Hi everyone,
: I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
: knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
: splicing? If so, any suggestion?
: Many Thanks.
a
g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
【在 Z*****N 的大作中提到】
: Hi everyone,
: I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
: knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
: splicing? If so, any suggestion?
: Many Thanks.
T*n
13 楼
只有自己知道
H*N
14 楼
not likely, but I would test it in cell culture first considering the effort
involved in generating a K/I mouse.
involved in generating a K/I mouse.
n*u
15 楼
实在是不能理解。。。。
那个冯真的是要什么没什么
那个冯真的是要什么没什么
J*3
16 楼
T变D或E啥的不行吗？实验证明非得T变A？
a
g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
【在 Z*****N 的大作中提到】
: Hi everyone,
: I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
: knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
: splicing? If so, any suggestion?
: Many Thanks.
a
g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
【在 Z*****N 的大作中提到】
: Hi everyone,
: I plan to make a point mutation (ACT->GCT) on the target gene and generate a
: knock-in mice. I found out that ACT just locates exon-intron junction (e.g.[exon A]--intron--[CT exon]). Does the point mutation likely affect RNA
: splicing? If so, any suggestion?
: Many Thanks.
Z*N
17 楼
Unfortunately, T has to been muated to A
n*b
18 楼
only boundary sequence in Intron is nonexceptional (that is to say, intron
has to start with GT,and end with AG). As for the sequence in Exon, it
usually ends with AG, and starts with GT. So It will be OK to change A to G
for your case. But as HENBEN said, you'd better to test it first.
has to start with GT,and end with AG). As for the sequence in Exon, it
usually ends with AG, and starts with GT. So It will be OK to change A to G
for your case. But as HENBEN said, you'd better to test it first.
Z*N
19 楼
Thank everyone. It sounds like the mutated genomic DNA should be test for
splicing before puttng into mice.
Is there any way to test the splicing in vitro or in vivo?
splicing before puttng into mice.
Is there any way to test the splicing in vitro or in vivo?
i*0
20 楼
Normally I just leave the AG GT in the introns unchanged. I do not care
about the end and beginning of the exon.
whatever, when you have the targeted ES cells, you can detect it with RT-PCR.
G
【在 n**b 的大作中提到】
: only boundary sequence in Intron is nonexceptional (that is to say, intron
: has to start with GT,and end with AG). As for the sequence in Exon, it
: usually ends with AG, and starts with GT. So It will be OK to change A to G
: for your case. But as HENBEN said, you'd better to test it first.
about the end and beginning of the exon.
whatever, when you have the targeted ES cells, you can detect it with RT-PCR.
G
【在 n**b 的大作中提到】
: only boundary sequence in Intron is nonexceptional (that is to say, intron
: has to start with GT,and end with AG). As for the sequence in Exon, it
: usually ends with AG, and starts with GT. So It will be OK to change A to G
: for your case. But as HENBEN said, you'd better to test it first.
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