paper help (Analytical Methods)# Chemistry - 化学
n*i
1 楼
请问申请绿卡需要的出生证明（Birth Certificate）是什么样子的呀？我不记得我有
专门的这个证明，那怎么办这个呢？多谢！
专门的这个证明，那怎么办这个呢？多谢！
u*p
2 楼
刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
正身。
和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
，善良，做事情有分寸。。。
第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
了我的博客，又找到了我的QQ。。
双鱼男优柔寡断，不舍的拒绝，双鱼男善良，不懂得拒绝。事发后，双鱼男两条简单的
短信搞定了两个女生，我们好聚好散吧给她。我们一起终老吧给我。
从此双鱼男少了一些敏感，多了一些开朗，少了一些优柔寡断，多了一些坚定，，，
五年了，我真的很庆幸自己找了双鱼男，他善良，对我对身边的人都很好；他不世俗，
能看淡一切；他知道金钱很重要，他也懂得生活；他知道怎么让他爱的人幸福。。。
只要双鱼男爱上你，你就是世界上最幸福的人。
正身。
和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
，善良，做事情有分寸。。。
第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
了我的博客，又找到了我的QQ。。
双鱼男优柔寡断，不舍的拒绝，双鱼男善良，不懂得拒绝。事发后，双鱼男两条简单的
短信搞定了两个女生，我们好聚好散吧给她。我们一起终老吧给我。
从此双鱼男少了一些敏感，多了一些开朗，少了一些优柔寡断，多了一些坚定，，，
五年了，我真的很庆幸自己找了双鱼男，他善良，对我对身边的人都很好；他不世俗，
能看淡一切；他知道金钱很重要，他也懂得生活；他知道怎么让他爱的人幸福。。。
只要双鱼男爱上你，你就是世界上最幸福的人。
y*i
3 楼
中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
胆大，好胜，坚强。
哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
胆大，好胜，坚强。
w*e
4 楼
想用random primer做tissue RNA的RT，然后用GAPDH specific primers做qPCR as QC；
同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
非常感谢！
同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
非常感谢！
h*o
5 楼
Real-time detection of chemical warfare agent simulants in forensic samples
using active capillary plasma ionization with benchtop and field-deployable
mass spectrometers
Morphy Dumlao, Pablo Martinez-Lozano Sinues, Maryia Nudnova and Renato
Zenobi
Anal. Methods, 2014,6, 3604-3609
DOI: 10.1039/C4AY00303A
Link:
http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2014/AY/C4AY00303
Thank you very much.
using active capillary plasma ionization with benchtop and field-deployable
mass spectrometers
Morphy Dumlao, Pablo Martinez-Lozano Sinues, Maryia Nudnova and Renato
Zenobi
Anal. Methods, 2014,6, 3604-3609
DOI: 10.1039/C4AY00303A
Link:
http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2014/AY/C4AY00303
Thank you very much.
f*n
6 楼
中国出生的，办一份出生公证书
s*i
7 楼
哇，幸福的人：）
s*3
8 楼
典型的双子座还差不多 没有所谓典型藤校生这一说
c*r
9 楼
同问^_^
u*p
10 楼
我觉得他是典型的双鱼男，其实没有那么可怕，他可能需要一点点宽容，需要一个懂他
的人，，
大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
【在 s*******i 的大作中提到】
: 哇，幸福的人：）
的人，，
大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
【在 s*******i 的大作中提到】
: 哇，幸福的人：）
d*0
11 楼
典型的藤校生是表面上对人恭恭敬敬，心里面对你BS一万遍
c*r
12 楼
这个很简单，仔细想想就明白了。
当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
是不一样的，所以二者不再可比。
所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
QC；
【在 w******e 的大作中提到】
: 想用random primer做tissue RNA的RT，然后用GAPDH specific primers做qPCR as QC；
: 同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
: 一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
: 非常感谢！
当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
是不一样的，所以二者不再可比。
所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
QC；
【在 w******e 的大作中提到】
: 想用random primer做tissue RNA的RT，然后用GAPDH specific primers做qPCR as QC；
: 同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
: 一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
: 非常感谢！
b*x
13 楼
对口最重要的。。。
所谓的萝卜白菜，。。。。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我觉得他是典型的双鱼男，其实没有那么可怕，他可能需要一点点宽容，需要一个懂他
: 的人，，
: 大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
: 但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
所谓的萝卜白菜，。。。。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我觉得他是典型的双鱼男，其实没有那么可怕，他可能需要一点点宽容，需要一个懂他
: 的人，，
: 大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
: 但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
v*a
14 楼
所谓疼校，大多数已经属于瘦死野驴了，哥大。。。据说法学院的犯罪心理学能波玩，
因为所在地区好啊，嘿嘿
【在 d*****0 的大作中提到】
: 典型的藤校生是表面上对人恭恭敬敬，心里面对你BS一万遍
因为所在地区好啊，嘿嘿
【在 d*****0 的大作中提到】
: 典型的藤校生是表面上对人恭恭敬敬，心里面对你BS一万遍
h*n
15 楼
你是否在实验上验证过你说的"random primer不能用来做qPCR"?
RNA
specific
efficiency
【在 c******r 的大作中提到】
: 这个很简单，仔细想想就明白了。
: 当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
: 的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
: 如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
: polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
: primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
: 是不一样的，所以二者不再可比。
: 所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
: btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
:
RNA
specific
efficiency
【在 c******r 的大作中提到】
: 这个很简单，仔细想想就明白了。
: 当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
: 的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
: 如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
: polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
: primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
: 是不一样的，所以二者不再可比。
: 所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
: btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
:
s*i
16 楼
嗯，有时候反感一个人，是因为还没有走进他的世界。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我觉得他是典型的双鱼男，其实没有那么可怕，他可能需要一点点宽容，需要一个懂他
: 的人，，
: 大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
: 但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我觉得他是典型的双鱼男，其实没有那么可怕，他可能需要一点点宽容，需要一个懂他
: 的人，，
: 大家喜欢纠结双鱼男的敏感，优柔寡断，喜欢活在自己的小世界了。
: 但是双鱼男同样是善良的，重感情的，不世俗，聪明，而且他们会对心爱的人很好。
t*n
17 楼
谁去把金小鱼泡了，我发100个包子。
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
c*r
18 楼
一针见血，确实没有。。。
不过我也懒得去验证这个，浪费时间啊。
因为验证结果很难generalize，而且需要很多的controls。即使这样，这一次好用，不
一定下一次换了primer仍然好用，仍然要花大量时间去validate，不值得啊。
还不如直接specific primers，一次搞定。
【在 h********n 的大作中提到】
: 你是否在实验上验证过你说的"random primer不能用来做qPCR"?
:
: RNA
: specific
: efficiency
不过我也懒得去验证这个，浪费时间啊。
因为验证结果很难generalize，而且需要很多的controls。即使这样，这一次好用，不
一定下一次换了primer仍然好用，仍然要花大量时间去validate，不值得啊。
还不如直接specific primers，一次搞定。
【在 h********n 的大作中提到】
: 你是否在实验上验证过你说的"random primer不能用来做qPCR"?
:
: RNA
: specific
: efficiency
s*8
19 楼
赞 很有道理
【在 s*******i 的大作中提到】
: 嗯，有时候反感一个人，是因为还没有走进他的世界。
【在 s*******i 的大作中提到】
: 嗯，有时候反感一个人，是因为还没有走进他的世界。
B*G
20 楼
还有一条忘了说，胸小...
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
a*o
21 楼
我验证过
扩增效率太低，或者说斜率低，不建议使用
【在 h********n 的大作中提到】
: 你是否在实验上验证过你说的"random primer不能用来做qPCR"?
:
: RNA
: specific
: efficiency
扩增效率太低，或者说斜率低，不建议使用
【在 h********n 的大作中提到】
: 你是否在实验上验证过你说的"random primer不能用来做qPCR"?
:
: RNA
: specific
: efficiency
s*i
22 楼
正中靶心，赞！
【在 b*******x 的大作中提到】
: 对口最重要的。。。
: 所谓的萝卜白菜，。。。。
【在 b*******x 的大作中提到】
: 对口最重要的。。。
: 所谓的萝卜白菜，。。。。
n*8
23 楼
小鱼对沙宝哥有意思。
：）
：）
a*o
24 楼
No problem of multiple primers during reverse transcription step. in qPCR,
one primer pair unless it is radioactive labeled, resolved on gel later.
QC；
【在 w******e 的大作中提到】
: 想用random primer做tissue RNA的RT，然后用GAPDH specific primers做qPCR as QC；
: 同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
: 一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
: 非常感谢！
one primer pair unless it is radioactive labeled, resolved on gel later.
QC；
【在 w******e 的大作中提到】
: 想用random primer做tissue RNA的RT，然后用GAPDH specific primers做qPCR as QC；
: 同时用aptamer specific primers做RT和qPCR。可以在RT这一步把两种primer放在
: 一个reaction里做吗？有什么可能的问题？
: 非常感谢！
u*p
25 楼
我也是双鱼座，可能是同类的原因，比较容易走入他的世界，，
不过我自己倒觉得没有任何理由反感一个无关紧要的人。
我不care的人想让我反感他非常困难。
【在 s*******i 的大作中提到】
: 嗯，有时候反感一个人，是因为还没有走进他的世界。
不过我自己倒觉得没有任何理由反感一个无关紧要的人。
我不care的人想让我反感他非常困难。
【在 s*******i 的大作中提到】
: 嗯，有时候反感一个人，是因为还没有走进他的世界。
h*4
26 楼
你每天真闲，无处不在呀
【在 v******a 的大作中提到】
: 所谓疼校，大多数已经属于瘦死野驴了，哥大。。。据说法学院的犯罪心理学能波玩，
: 因为所在地区好啊，嘿嘿
c*r
27 楼
是，实际上target specific的primer可以run两三对都没问题。
qPCR为啥不能用multiple target specific primers？只要label不同颜色就可以啊？
SYBR当然是不行的，但是TaqMan是可以的哈
【在 a****o 的大作中提到】
: No problem of multiple primers during reverse transcription step. in qPCR,
: one primer pair unless it is radioactive labeled, resolved on gel later.
:
: QC；
qPCR为啥不能用multiple target specific primers？只要label不同颜色就可以啊？
SYBR当然是不行的，但是TaqMan是可以的哈
【在 a****o 的大作中提到】
: No problem of multiple primers during reverse transcription step. in qPCR,
: one primer pair unless it is radioactive labeled, resolved on gel later.
:
: QC；
g*g
28 楼
对的。。。双鱼是这样。。。不care就不付出情感因子。。浪费精力。。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我也是双鱼座，可能是同类的原因，比较容易走入他的世界，，
: 不过我自己倒觉得没有任何理由反感一个无关紧要的人。
: 我不care的人想让我反感他非常困难。
【在 u**p 的大作中提到】
: 我也是双鱼座，可能是同类的原因，比较容易走入他的世界，，
: 不过我自己倒觉得没有任何理由反感一个无关紧要的人。
: 我不care的人想让我反感他非常困难。
v*a
29 楼
你也无处不在啊
【在 h*********4 的大作中提到】
:
: 你每天真闲，无处不在呀
【在 h*********4 的大作中提到】
:
: 你每天真闲，无处不在呀
h*n
30 楼
比如你测某几个gene, 用random primer和poly-T primer然后qPCR得到的结果不一样(
against housekeeping gene)?
能不能详细说说?
【在 a****o 的大作中提到】
: 我验证过
: 扩增效率太低，或者说斜率低，不建议使用
against housekeeping gene)?
能不能详细说说?
【在 a****o 的大作中提到】
: 我验证过
: 扩增效率太低，或者说斜率低，不建议使用
s*i
31 楼
贴子链接能给一下吗？我没找到
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
s*n
32 楼
:D
这是黑各大吗？好像bbs上提ivy十之七八是各大```
dartmouth和brown好像比较注意不要自黑~~~
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
这是黑各大吗？好像bbs上提ivy十之七八是各大```
dartmouth和brown好像比较注意不要自黑~~~
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
c*r
33 楼
那如果只是做用cDNA做半定量的PCR，然后跑胶看基因表达还是不表达，最多粗略估计
一下表达量高还是低，能把两对引物放一起吗？
一下表达量高还是低，能把两对引物放一起吗？
p*t
34 楼
热
f*5
35 楼
是因为男朋友来中国的。
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
【在 y***i 的大作中提到】
: 中产阶级出身，家教良好，从小学芭蕾，练美声，还学中国武术。
: 哥大毕业后，因为对中国感兴趣，就到中国闯江湖。
: 胆大，好胜，坚强。
h*g
36 楼
我现在都是用random primer做RT，然后做QPCR，内参挺准的啊
难道我所有的结果都不可信？
难道我所有的结果都不可信？
l*e
37 楼
absolutely right！
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
h*4
38 楼
我是真闲
【在 v******a 的大作中提到】
: 你也无处不在啊
c*r
39 楼
两对specific的primers，三对都可能可以。
不行的是random，poly-A，specific的primer混用。我确实没这么干过，只是觉得有问
题，所以没啥实际经验。
【在 c*********r 的大作中提到】
: 那如果只是做用cDNA做半定量的PCR，然后跑胶看基因表达还是不表达，最多粗略估计
: 一下表达量高还是低，能把两对引物放一起吗？
不行的是random，poly-A，specific的primer混用。我确实没这么干过，只是觉得有问
题，所以没啥实际经验。
【在 c*********r 的大作中提到】
: 那如果只是做用cDNA做半定量的PCR，然后跑胶看基因表达还是不表达，最多粗略估计
: 一下表达量高还是低，能把两对引物放一起吗？
z*a
40 楼
恩。。。
这个鱼男不错。好像鱼男都挺顾家的。
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
这个鱼男不错。好像鱼男都挺顾家的。
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
v*a
41 楼
好像上海人最喜欢哥大，上海大婶一提她儿子在哥大就 古大，古大，跟老母鸡下了蛋似
的叫得一脸的骄傲
【在 s**********n 的大作中提到】
: :D
: 这是黑各大吗？好像bbs上提ivy十之七八是各大```
: dartmouth和brown好像比较注意不要自黑~~~
的叫得一脸的骄傲
【在 s**********n 的大作中提到】
: :D
: 这是黑各大吗？好像bbs上提ivy十之七八是各大```
: dartmouth和brown好像比较注意不要自黑~~~
p*d
42 楼
这个真的弄糊涂我了，我同意你说random primer对各个RNA的efficiency是不一样的，
可是能保
证GOI和house keeping gene的specific primer就有同样的efficiency吗？序列不同，
efficiency不一样很正常啊，只要是比较的是同样条件下实验组和对照组的差别就可以
了吧？就算
random primer对GOI和house keeping gene的效率不同，最后要比较的还是实验组和对
照组的相
对差别啊。
RNA
specific
efficiency
【在 c******r 的大作中提到】
: 这个很简单，仔细想想就明白了。
: 当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
: 的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
: 如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
: polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
: primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
: 是不一样的，所以二者不再可比。
: 所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
: btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
:
可是能保
证GOI和house keeping gene的specific primer就有同样的efficiency吗？序列不同，
efficiency不一样很正常啊，只要是比较的是同样条件下实验组和对照组的差别就可以
了吧？就算
random primer对GOI和house keeping gene的效率不同，最后要比较的还是实验组和对
照组的相
对差别啊。
RNA
specific
efficiency
【在 c******r 的大作中提到】
: 这个很简单，仔细想想就明白了。
: 当然不可以。random primer不能用来做qPCR。原因是这个是random的，所以对各个RNA
: 的RT efficiency是不一样的，所以以后的qPCR都没意义了。
: 如果要qPCR可以用polyA或者target specific primers。但是也不能混用。原因是
: polyA会RT，而你的specific primers也可以RT，结果是你的target被polyA和specific
: primers分别RT，而QC只被polyA RT。但是poly A和specific primer的RT efficiency
: 是不一样的，所以二者不再可比。
: 所以只能要么用poly A，要么target和control都用specific primers。
: btw，gapdh的做RT是有kit的，买一个就可以了吧？
:
n*y
43 楼
内牛满面顶
我不好，但遇到对口的我也可以非常好
我不好，但遇到对口的我也可以非常好
v*a
44 楼
bf谁，干啥的？
【在 f*******5 的大作中提到】
: 是因为男朋友来中国的。
【在 f*******5 的大作中提到】
: 是因为男朋友来中国的。
m*2
45 楼
我做过8个基因的。用基因specific reverse primers RT,稍微上游一点，一对儿一对
儿的做
real time qPCR。效果不错。
【在 c******r 的大作中提到】
: 是，实际上target specific的primer可以run两三对都没问题。
: qPCR为啥不能用multiple target specific primers？只要label不同颜色就可以啊？
: SYBR当然是不行的，但是TaqMan是可以的哈
儿的做
real time qPCR。效果不错。
【在 c******r 的大作中提到】
: 是，实际上target specific的primer可以run两三对都没问题。
: qPCR为啥不能用multiple target specific primers？只要label不同颜色就可以啊？
: SYBR当然是不行的，但是TaqMan是可以的哈
w*g
46 楼
双鱼男失恋的话会消沉很久吗？
v*a
47 楼
我是闲的蛋疼
【在 h*********4 的大作中提到】
:
: 我是真闲
【在 h*********4 的大作中提到】
:
: 我是真闲
f*r
48 楼
当然可信。前提是，做逆转录的时候，模板mRNA一定不要过量。甚至可以有意识地少放
一点。这样的话，RT之后，基本可以保证所有模板都被逆转录，形成相等量dscDNA。要
的就是这种完全没有特异性的1：1的RT。
那一个样品做上n次，就可以看出，每次RT的效果是恒定的。
【在 h****g 的大作中提到】
: 我现在都是用random primer做RT，然后做QPCR，内参挺准的啊
: 难道我所有的结果都不可信？
一点。这样的话，RT之后，基本可以保证所有模板都被逆转录，形成相等量dscDNA。要
的就是这种完全没有特异性的1：1的RT。
那一个样品做上n次，就可以看出，每次RT的效果是恒定的。
【在 h****g 的大作中提到】
: 我现在都是用random primer做RT，然后做QPCR，内参挺准的啊
: 难道我所有的结果都不可信？
u*p
49 楼
鱼男是很顾家的，他们家庭观念非常强，，
【在 z***a 的大作中提到】
: 恩。。。
: 这个鱼男不错。好像鱼男都挺顾家的。
【在 z***a 的大作中提到】
: 恩。。。
: 这个鱼男不错。好像鱼男都挺顾家的。
u*p
50 楼
恩，找个喜欢的妹妹好好爱她，，，，
【在 n*********y 的大作中提到】
: 内牛满面顶
: 我不好，但遇到对口的我也可以非常好
【在 n*********y 的大作中提到】
: 内牛满面顶
: 我不好，但遇到对口的我也可以非常好
y*o
51 楼
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
u*p
52 楼
我觉得双鱼男女都很难有感情空白期，也不会消沉很久。。
【在 w*****g 的大作中提到】
: 双鱼男失恋的话会消沉很久吗？
【在 w*****g 的大作中提到】
: 双鱼男失恋的话会消沉很久吗？
y*o
53 楼
写得不错
u*p
54 楼
：）
【在 y********o 的大作中提到】
: 写得不错
【在 y********o 的大作中提到】
: 写得不错
n*g
55 楼
这个一定要顶
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
【在 u**p 的大作中提到】
: 刚才看了一个dream版jjww的帖子，下面回帖到，一看就是双鱼男，晕，我要为双鱼男
: 正身。
: 和双鱼男认识五年了，从轰轰烈烈的热恋，慢慢走向平淡，我庆幸找了双鱼男，他细心
: ，善良，做事情有分寸。。。
: 第一眼见到他时候，感觉像是个不食人间烟火的小天使（抱歉我这样形容），没有一点
: 世俗气息的男孩。第一次聊天，他静静地听，我慢慢的叙，像个老朋友。。
: 本来以为见了第一面，不会有第二次了，因为在我眼里他是帅帅的，自己是那么普通，
: 后来他发了短信，说晚上很开心。就这样我们慢慢联系着。。
: 交往一年多，忽然有一天，一个女孩子在QQ找到了我，说她也是他的女朋友，虽然他们
: 两个没有可能，但是没有明确的说分手。女孩思念他的时候百度他的名字，意外的发现
G*o
56 楼
狗狗来了
【在 n*****g 的大作中提到】
: 这个一定要顶
【在 n*****g 的大作中提到】
: 这个一定要顶
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