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怎么增加显微镜的景深啊?
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怎么增加显微镜的景深啊?# PhotoGear - 摄影器材
L*x
1
我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
还是说只要确定了物镜就没法改景深了?
avatar
b*t
2
focus到不同深度就好了,但是如果很厚的话要用long working distance的objective

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

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t*g
3
换低倍物镜。
或者confocal scan了重构。

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

avatar
t*g
4
long WD,还要高NA的话,那价钱就是指数增长了。

objective

【在 b*******t 的大作中提到】
: focus到不同深度就好了,但是如果很厚的话要用long working distance的objective
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p*e
5
佛版一般希望减小景深。。。。。。

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

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x5
6
用电镜,景深大, stereoscope也好些
要不confocal section, 或者micro-CT

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

avatar
b*t
7
这是没有办法的事情。。。

【在 t****g 的大作中提到】
: long WD,还要高NA的话,那价钱就是指数增长了。
:
: objective

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b*t
8
lz要的不是真的景深吧

【在 p********e 的大作中提到】
: 佛版一般希望减小景深。。。。。。
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L*x
9
打算用epifluorescence 看看就好了,不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
清样品了。
如果不重新买镜头,基本就没办法了吧?
现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2
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b*t
10
调物距阿。。真的要一次看清么

【在 L*********x 的大作中提到】
: 打算用epifluorescence 看看就好了,不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
: 清样品了。
: 如果不重新买镜头,基本就没办法了吧?
: 现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2

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t*g
11
nod,我觉得他的真实要求是要long working distance。
太厚了就用两台,一个倒置的看下面,一个up right的看上面一半。

【在 b*******t 的大作中提到】
: 这是没有办法的事情。。。
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L*x
13
真的要一次看清啊,trace motion....

【在 b*******t 的大作中提到】
: 调物距阿。。真的要一次看清么
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b*t
14
看transmission就比较困难了吧

【在 t****g 的大作中提到】
: nod,我觉得他的真实要求是要long working distance。
: 太厚了就用两台,一个倒置的看下面,一个up right的看上面一半。

avatar
t*g
15
不知道,我没有实战经验:)

【在 b*******t 的大作中提到】
: 看transmission就比较困难了吧
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v*a
16
显微镜你也懂啊?

【在 b*******t 的大作中提到】
: 看transmission就比较困难了吧
avatar
b*t
17
多厚?什么substrate?

【在 L*********x 的大作中提到】
: 真的要一次看清啊,trace motion....
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b*t
18
不懂装懂,努力要懂

【在 v***a 的大作中提到】
: 显微镜你也懂啊?
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c*y
19
终于来了一个可以挑战你的光学大牛了。。。

【在 t****g 的大作中提到】
: 不知道,我没有实战经验:)
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t*g
20
没带相机,要不然给你们show一个最近烧的Nikon,六个物镜,几个灯泡,乱七八糟的
filter,一个ccd相机。

【在 c********y 的大作中提到】
: 终于来了一个可以挑战你的光学大牛了。。。
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v*a
21
手机呢

【在 t****g 的大作中提到】
: 没带相机,要不然给你们show一个最近烧的Nikon,六个物镜,几个灯泡,乱七八糟的
: filter,一个ccd相机。

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t*g
22
扔车里了。

【在 v***a 的大作中提到】
: 手机呢
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x*0
23
Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
包子

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

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b*t
24
时间会流逝阿

【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子

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x*0
25
除非被摄物动的很快,不然也应该来得及的吧?
真的动的很快的话就用video camera了,呵呵

【在 b*******t 的大作中提到】
: 时间会流逝阿
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b*t
26
不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
然后逐帧做correlation

【在 x**0 的大作中提到】
: 除非被摄物动的很快,不然也应该来得及的吧?
: 真的动的很快的话就用video camera了,呵呵

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B*G
27
确实,楼主好像对分辨率要求不高,才用了4倍物镜,直接用camcorder加近摄镜试试?
很多实验室都用两三百块钱的小高清camcorder做实验的。

【在 b*******t 的大作中提到】
: 不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
: 不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
: 然后逐帧做correlation

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N*t
28

你想做什么阿,epifluorescence不可能从前到后没有干扰的看清的,上confocal吧
也木有那么难,我刚train过,每天俩小时,七天。。

【在 L*********x 的大作中提到】
: 打算用epifluorescence 看看就好了,不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
: 清样品了。
: 如果不重新买镜头,基本就没办法了吧?
: 现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2

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N*t
29

????

【在 b*******t 的大作中提到】
: 不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
: 不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
: 然后逐帧做correlation

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b*t
30
那些小破ccd很便宜的,一般都是软件record

【在 B*G 的大作中提到】
: 确实,楼主好像对分辨率要求不高,才用了4倍物镜,直接用camcorder加近摄镜试试?
: 很多实验室都用两三百块钱的小高清camcorder做实验的。

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b*t
31
confocal要train那么久!!
我们都是自己搭显微镜的 @[email protected]

【在 N******t 的大作中提到】
:
: ????

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N*t
32

而且要收一千大洋!!黑吧
我train了好多天都没干活,完了老板随口说 it's free, right? 我说。。。您没搞错
吧。。。-_-"

【在 b*******t 的大作中提到】
: confocal要train那么久!!
: 我们都是自己搭显微镜的 @[email protected]

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b*t
33
阿!!还不如买张机票过来跟我玩。。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 而且要收一千大洋!!黑吧
: 我train了好多天都没干活,完了老板随口说 it's free, right? 我说。。。您没搞错
: 吧。。。-_-"

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N*t
34

不是我的钱呀 =(

【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿!!还不如买张机票过来跟我玩。。。
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t*g
35
train 7天才1000块?
你们找的劳模trainer?

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 不是我的钱呀 =(

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b*t
36
叫老板买。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 不是我的钱呀 =(

avatar
v*a
37
partially paid at initial sales

【在 t****g 的大作中提到】
: train 7天才1000块?
: 你们找的劳模trainer?

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N*t
38

pia
7天十四个小时
而且其中一半时间他在喝咖啡让我自己练习

【在 t****g 的大作中提到】
: train 7天才1000块?
: 你们找的劳模trainer?

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N*t
39

我找找明年有没有在你们那开的会。。。
话说明年五月半个月都会在东北部开会也

【在 b*******t 的大作中提到】
: 叫老板买。。
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b*t
40
我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我找找明年有没有在你们那开的会。。。
: 话说明年五月半个月都会在东北部开会也

avatar
b*t
41
我们有san jose的会。。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我找找明年有没有在你们那开的会。。。
: 话说明年五月半个月都会在东北部开会也

avatar
t*g
42
美国开会太无聊,吃喝还得自理。
当年读研的时候,去交大开会,管吃管住,还管玩。

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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N*t
43

劳模?

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
avatar
N*t
44

不用吧,你什么会阿

【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊,吃喝还得自理。
: 当年读研的时候,去交大开会,管吃管住,还管玩。

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N*t
45

啥时侯。。。我和猫爹想春天过去看大树。。

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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v*a
46
你在东岸还是西岸啊

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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N*t
47

给我50个包子告诉你

【在 v***a 的大作中提到】
: 你在东岸还是西岸啊
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N*t
48

懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿~
另外告诉我怎么改昵称?lol

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
avatar
D*I
49
是只要看还是要截图?
样品多厚?

【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品,想在显微镜下从前到后都看清楚,这个怎么调光圈什么的?
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了?

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D*I
50
自理就算了,找机会报销好了
最不好的是管饭然后给吃三明治啊之类的很贱的东西。。

【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊,吃喝还得自理。
: 当年读研的时候,去交大开会,管吃管住,还管玩。

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P*g
51
看了半天,只有这个是正解。
EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
PLUGIN
有两种EDF.看你是什么照片。
如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
这个原理就是软件把每个相片里面(与其他上下相片比)最亮的像素给保留下来了。因
为OUT OF FOCUS的亮度一般没有IN FOCUS的时候亮。
如果是TRANSMITTED LIGHT,比如BRIGHTFIELD,不是荧光(FLUORESCENCE),也是用EDF,但
是用另外的ALGORITHM.因为这个时候,图片中最亮的地方不是样品,而是背景。一般用
BEST CONTRACT什么的ALGORITHM.
总之:要照Z STACK一堆相片,然后POST PROCESSING.

【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子

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b*t
52
美国人阿

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿~
: 另外告诉我怎么改昵称?lol

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b*t
53
5月好像

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿~
: 另外告诉我怎么改昵称?lol

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b*t
54
中间

【在 v***a 的大作中提到】
: 你在东岸还是西岸啊
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b*t
55
............

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿~
: 另外告诉我怎么改昵称?lol

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b*t
56
扎好的,项链要脱掉,还一定要戴皮带
有一次我忘记带了,trainer把他的给我,hll地圈在pg上。。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿~
: 另外告诉我怎么改昵称?lol

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B*G
57
machine shop有啥吓人的?说说看?学校里training最贵的经历是EBeam,假如MBE也让
train的话可能更贵...

【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
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B*G
58
所以找不到同学玩的化,一定要第一天就在会场找两个buddy开始一起混,不然过两天
别人都混成帮了也没人搭理你了,当然要是poster section碰到无知小姑娘的话...

【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊,吃喝还得自理。
: 当年读研的时候,去交大开会,管吃管住,还管玩。

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r*n
59
XYZ终于来了。。。

【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子

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b*t
60
trainer讲很吓人的血淋淋的故事。。。还给我们看他断掉又接上的手指。。。
E beam我们好像免费train的?不记得了

【在 B*G 的大作中提到】
: machine shop有啥吓人的?说说看?学校里training最贵的经历是EBeam,假如MBE也让
: train的话可能更贵...

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L*x
61
谢谢!

【在 P*********g 的大作中提到】
: 看了半天,只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。

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L*x
62
确实动很快,所以很纠结。。。

【在 x**0 的大作中提到】
: 除非被摄物动的很快,不然也应该来得及的吧?
: 真的动的很快的话就用video camera了,呵呵

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P*g
63
问题是有多快,一秒钟就挪一个地方,难。
如果能够做一个5-10个IMAGE的Z STACK, BEFORE IT MOVES,你可以做XYZT。
就是做一个Z STACK,然后紧接着做下一个,同样的地方。
那个Z STACK可以用MAXIMUM PROJECTION压缩成一张清楚的图片。
然后整个TIME LAPSE可以整成一个MOVIE.
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S*A
64
这个在不是很常见么,就是叠很多 focus point 的照片就完了。
专业的还有自动步进和拍摄的器材,100 多张照片随便拍。
不然调一下拍一张烦死你。
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C*y
65
Leica的镜头可以调光圈,但是有限。
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N*t
66

很吓人的阿!你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
了的事么?@@

【在 B*G 的大作中提到】
: machine shop有啥吓人的?说说看?学校里training最贵的经历是EBeam,假如MBE也让
: train的话可能更贵...

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b*t
67
我们trainer就讲了这个故事!!

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 很吓人的阿!你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
: 了的事么?@@

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b*t
68
还有削耳朵什么的

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 很吓人的阿!你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
: 了的事么?@@

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N*t
69

这个是大牛,崇拜

【在 P*********g 的大作中提到】
: 看了半天,只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。

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N*t
70

5月啥时侯??我基本上半个月都在东岸。。

【在 b*******t 的大作中提到】
: 5月好像
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N*t
71

他的腰好粗 @@

【在 b*******t 的大作中提到】
: 扎好的,项链要脱掉,还一定要戴皮带
: 有一次我忘记带了,trainer把他的给我,hll地圈在pg上。。。

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b*t
72
心里默念
上北下南左西右东。。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 他的腰好粗 @@

avatar
N*t
73

我高中的老师,自己把两个指头锯掉了,没街上。。

【在 b*******t 的大作中提到】
: trainer讲很吓人的血淋淋的故事。。。还给我们看他断掉又接上的手指。。。
: E beam我们好像免费train的?不记得了

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b*t
74
@[email protected]

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我高中的老师,自己把两个指头锯掉了,没街上。。

avatar
N*t
75

真的有??=O

【在 b*******t 的大作中提到】
: 还有削耳朵什么的
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b*t
76
不知道真假

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 真的有??=O

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N*t
77

错了,左冬右西~

【在 b*******t 的大作中提到】
: 心里默念
: 上北下南左西右东。。。

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b*t
78
阿。。

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 错了,左冬右西~

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N*t
79

就在自己家的车库里,用电锯@@

【在 b*******t 的大作中提到】
: @[email protected]
avatar
N*t
80

嗯 //点头

【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿。。
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b*t
81
阿 不听不听不听!!!!

【在 N******t 的大作中提到】
:
: 嗯 //点头

avatar
N*t
82

pat pat =X

【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿 不听不听不听!!!!
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