L*x
9 楼
打算用epifluorescence 看看就好了,不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
清样品了。
如果不重新买镜头,基本就没办法了吧?
现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2
清样品了。
如果不重新买镜头,基本就没办法了吧?
现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2
N*r
12 楼
大师已经有讲解:
http://www.mitbbs.com/mitbbs_article.php?board=PhotoGear&id=313
............2*N*d*s*f^2*(s-f)
DOF=s2-s1= -------------------
............f^4-N^2*d^2*(s-f)^2
N=f/D
http://www.mitbbs.com/mitbbs_article.php?board=PhotoGear&id=313
............2*N*d*s*f^2*(s-f)
DOF=s2-s1= -------------------
............f^4-N^2*d^2*(s-f)^2
N=f/D
b*t
31 楼
confocal要train那么久!!
我们都是自己搭显微镜的 @[email protected]
【在 N******t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
:
: ????
我们都是自己搭显微镜的 @[email protected]
【在 N******t 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
:
: ????
N*t
32 楼
而且要收一千大洋!!黑吧
我train了好多天都没干活,完了老板随口说 it's free, right? 我说。。。您没搞错
吧。。。-_-"
【在 b*******t 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: confocal要train那么久!!
: 我们都是自己搭显微镜的 @[email protected]
P*g
51 楼
看了半天,只有这个是正解。
EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
PLUGIN
有两种EDF.看你是什么照片。
如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
这个原理就是软件把每个相片里面(与其他上下相片比)最亮的像素给保留下来了。因
为OUT OF FOCUS的亮度一般没有IN FOCUS的时候亮。
如果是TRANSMITTED LIGHT,比如BRIGHTFIELD,不是荧光(FLUORESCENCE),也是用EDF,但
是用另外的ALGORITHM.因为这个时候,图片中最亮的地方不是样品,而是背景。一般用
BEST CONTRACT什么的ALGORITHM.
总之:要照Z STACK一堆相片,然后POST PROCESSING.
【在 x**0 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子
EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
PLUGIN
有两种EDF.看你是什么照片。
如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
这个原理就是软件把每个相片里面(与其他上下相片比)最亮的像素给保留下来了。因
为OUT OF FOCUS的亮度一般没有IN FOCUS的时候亮。
如果是TRANSMITTED LIGHT,比如BRIGHTFIELD,不是荧光(FLUORESCENCE),也是用EDF,但
是用另外的ALGORITHM.因为这个时候,图片中最亮的地方不是样品,而是背景。一般用
BEST CONTRACT什么的ALGORITHM.
总之:要照Z STACK一堆相片,然后POST PROCESSING.
【在 x**0 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子
L*x
61 楼
谢谢!
【在 P*********g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 看了半天,只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
【在 P*********g 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 看了半天,只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
P*g
63 楼
问题是有多快,一秒钟就挪一个地方,难。
如果能够做一个5-10个IMAGE的Z STACK, BEFORE IT MOVES,你可以做XYZT。
就是做一个Z STACK,然后紧接着做下一个,同样的地方。
那个Z STACK可以用MAXIMUM PROJECTION压缩成一张清楚的图片。
然后整个TIME LAPSE可以整成一个MOVIE.
如果能够做一个5-10个IMAGE的Z STACK, BEFORE IT MOVES,你可以做XYZT。
就是做一个Z STACK,然后紧接着做下一个,同样的地方。
那个Z STACK可以用MAXIMUM PROJECTION压缩成一张清楚的图片。
然后整个TIME LAPSE可以整成一个MOVIE.
S*A
64 楼
这个在不是很常见么,就是叠很多 focus point 的照片就完了。
专业的还有自动步进和拍摄的器材,100 多张照片随便拍。
不然调一下拍一张烦死你。
专业的还有自动步进和拍摄的器材,100 多张照片随便拍。
不然调一下拍一张烦死你。
C*y
65 楼
Leica的镜头可以调光圈,但是有限。
N*t
69 楼
这个是大牛,崇拜
【在 P*********g 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 看了半天,只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH,或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光,你CAPTURE Z STACK,CONFOCAL可以,普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片,在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离(在Z方向)必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱,也有人用手动聚焦,照若干张,算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西--就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
b*t
74 楼
@[email protected]
【在 N******t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
:
: 我高中的老师,自己把两个指头锯掉了,没街上。。
【在 N******t 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
:
: 我高中的老师,自己把两个指头锯掉了,没街上。。
N*t
79 楼
就在自己家的车库里,用电锯@@
【在 b*******t 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: @[email protected]
相关阅读
等会儿做Cajun乱煮正片负扫看着很给力啊。。。估计没几个像我这样的吧跟各位大牛求一个好用的ny pass内牛满面,吃了碗牛肉干拉片面。。。来报个道5D3 18MP,略逊于7D的对焦系统,高感无敌这个 $100 的 Refurbished HP Touchpad 是不是 Deal?貌似不少人都拿到马总的200GC了怀念2007年之春有人了解永诺的闪光灯吗版上求5DII哥被踢出门了,急需大家的帮助! (转载)同学们,hot deal, all in吧xxbis $899 before any cashback and free shipping万佛,在美国买的哪个牌子laptop可以选择中文系统啊?[喉一嗓子] Brand new Canon 5d2 kit @ 2700周末过完了转一句话,推荐新手看看X220的IPS屏幕就是个joke