Re: expression of actin in E.coli?# Biology - 生物学
m*e
1 楼
我觉得有一下几个原因不用E。COLI
1。 一般的E。COLI细菌用的CODON PREFERENCE可能与MAMALIAN CELL不同,所以你用普通
的BL21的话可能蛋白根本不表达,但是这点可以克服,你可以用那种加入了RARE CODON的
CELL LINE,比如ROSETTA GEMI系列。
2。有一些MAMALIAN PROTEIN是需要表达后修饰才有活性的,而E。COLI可能无法提供这种
环境。
3。但是也有很多人用E。COLI表达真和生物蛋白,有时也能成功,但YEAST其实是一种挺
好的表达环境,比在FLY,或者作细胞培养方便多了。
所以建议你试一下用E。COLI,不行的话想办法提高YEAST中的产量。至少我知道不同培养
液对E。COLI表达量影响很大,可能你也可以换其他培养夜养YEAST。
1。 一般的E。COLI细菌用的CODON PREFERENCE可能与MAMALIAN CELL不同,所以你用普通
的BL21的话可能蛋白根本不表达,但是这点可以克服,你可以用那种加入了RARE CODON的
CELL LINE,比如ROSETTA GEMI系列。
2。有一些MAMALIAN PROTEIN是需要表达后修饰才有活性的,而E。COLI可能无法提供这种
环境。
3。但是也有很多人用E。COLI表达真和生物蛋白,有时也能成功,但YEAST其实是一种挺
好的表达环境,比在FLY,或者作细胞培养方便多了。
所以建议你试一下用E。COLI,不行的话想办法提高YEAST中的产量。至少我知道不同培养
液对E。COLI表达量影响很大,可能你也可以换其他培养夜养YEAST。