Re: 问一个fusion protein之间的linker的问题# Biology - 生物学
r*o
1 楼
BDscience有专门表达GFP fusion蛋白的质粒卖。比如pEGFP系列。
我用过pEGFP-N1,感觉不错。你不妨试一试。
另外，GFP其实是个结构蛮紧凑的蛋白，即使没有很长的linker，
也应该不会干扰你要表达蛋白的折叠。比如我用的pEGFP-N1的多克隆位点
实际上与GFP就没有专门的linker sequence.但是表达出来的fusion protein
活性很好，而GFP折叠也没有出问题，免疫荧光实验看得很清楚。
如果你实在想加一个linker sequence,可以参考一下pEGFP-N1 多克隆位点
序列。
另外刚才查了一下文献，感觉linker design还是很有讲究的，对于较短的
linker,原则是要用flexible 和hydrophilic氨基酸。Flexible 的氨基酸，比如
Gly和Ala; hydrophilic的氨基酸比如ser。
有些情况比较复杂，较短的linker不行。比如有报道表达一个protein G
和luciferase的fusion protein，中间的linker是GGGGS。发现虽然luci
我用过pEGFP-N1,感觉不错。你不妨试一试。
另外，GFP其实是个结构蛮紧凑的蛋白，即使没有很长的linker，
也应该不会干扰你要表达蛋白的折叠。比如我用的pEGFP-N1的多克隆位点
实际上与GFP就没有专门的linker sequence.但是表达出来的fusion protein
活性很好，而GFP折叠也没有出问题，免疫荧光实验看得很清楚。
如果你实在想加一个linker sequence,可以参考一下pEGFP-N1 多克隆位点
序列。
另外刚才查了一下文献，感觉linker design还是很有讲究的，对于较短的
linker,原则是要用flexible 和hydrophilic氨基酸。Flexible 的氨基酸，比如
Gly和Ala; hydrophilic的氨基酸比如ser。
有些情况比较复杂，较短的linker不行。比如有报道表达一个protein G
和luciferase的fusion protein，中间的linker是GGGGS。发现虽然luci