从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记（十四）# Biology - 生物学
r*o
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本文献给YL
（十四）anfinsen的疑虑
跑完sephacryl柱子，组分就可以过DNA affinity column。DNA affinity column虽然很重
要，但是这一步技术上来说要求很低。买来CNBR活化好的agarose，然后让特定序列的寡聚核
苷酸固定上去就行了，柱子也是最简单便宜的一次性柱子。
亲合层析是目前最常用也最强大的一种蛋白质纯化技术, 纯化效率比别的层析方法可以高出一
两个数量级。这种方法诞生是六十年代的事情。当时是在NIH的Anfinsen实验室。Anfinsen是一
个诺贝尔奖获得者，可以说是蛋白质折叠研究的老祖宗。他主要贡献是通过研究ribonuclease 的
变性和重折叠证明氨基酸序列就可以决定蛋白质最后的三维结构。他实验室那时侯有一个学生一
个project是从葡萄球菌里面提取大量核酸酶，然后研究enzyme-inhibitor interaction。这个纯
化可是很麻烦的事情，用gel filtration, ion-exchange, hydrophobic interaction, 效率都很
低。有人可能会问，怎么不在E.Coli
（十四）anfinsen的疑虑
跑完sephacryl柱子，组分就可以过DNA affinity column。DNA affinity column虽然很重
要，但是这一步技术上来说要求很低。买来CNBR活化好的agarose，然后让特定序列的寡聚核
苷酸固定上去就行了，柱子也是最简单便宜的一次性柱子。
亲合层析是目前最常用也最强大的一种蛋白质纯化技术, 纯化效率比别的层析方法可以高出一
两个数量级。这种方法诞生是六十年代的事情。当时是在NIH的Anfinsen实验室。Anfinsen是一
个诺贝尔奖获得者，可以说是蛋白质折叠研究的老祖宗。他主要贡献是通过研究ribonuclease 的
变性和重折叠证明氨基酸序列就可以决定蛋白质最后的三维结构。他实验室那时侯有一个学生一
个project是从葡萄球菌里面提取大量核酸酶，然后研究enzyme-inhibitor interaction。这个纯
化可是很麻烦的事情，用gel filtration, ion-exchange, hydrophobic interaction, 效率都很
低。有人可能会问，怎么不在E.Coli