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请教protein conjugation达人

请教protein conjugation达人# Biology - 生物学

S*A2010-05-14 07:05

1 楼

【以下文字转载自 JobHunting 讨论区】
发信人: SASPHMA (SASPHMA), 信区: JobHunting
标题: H1-B tranfer 的一些问题
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 4 11:03:51 2012, 美东)
第一个问题是，一直在用opt做contractor，然后在11月初的时候申请了h1-b。
h1-b办理期间就找到另外一个工作，然后之前申请的h1-b下来之后就开始办理transfer
。办理tranfer这个人一定要pay stub，可是我那个h1-b是新的，还完全没有开始使
用的。后来他就又说most recent pay check，我想那h1-b 的recipt date 其实是11
月底，所以我要是提供 12月的pay check，是不是也是合理的呢？若都是direct deposit 打到账户里的，怎么弄pay check 呢？？
第二个问题是，因为做contractor 是corp-to－corp 所以申请工作时候都写的client
的公司，就是我做project 的公司，然后现在如果transfer h1-b应该要怎么写呢，写
真正雇佣我的公司还是都写？因为client 没有变过，但是发钱的中间公司换过，都写
出来真的是够confused的了。
谢谢大家！！！！！！

w*g2010-05-14 07:05

2 楼

Upcoming month's visa bulletin: August 2011 (Coming Soon)

n*n2010-05-14 07:05

3 楼

天人合一是国学裏的一个特别概念。因为大宗师篇有浓厚的天人合一的信息，所以將兩
者合在一起讨论。天就是大自然的意思，也是大道的意思。所以天人合一的意思就可以
说：人和大自然溶合一起的一体感，进一步可以与大道溶在一起。大自然存在道中，但
不完全代表道，而道是无所不包。
大宗师的意思就是以大道为我们的老师，從大道与大自然中学习仁爱与艺术性的美感，
而且体会大道的陶汰万物的意义，效法大道的眼光远大。以大自然作我们的模范，如此
再加上庄子所建议的修养，久而久之，也许就达到天人合一之境。
甲、＜天人合一＞
天人合一是庄子在大宗师篇中提出的一个構想，虽然他並没有直接说出这四个字，“天
人合一”仅是后人將庄子的思想简化而整理出的词句。天就是大道的意思並包括大自然
，所以天人合一的意思就是：人和大自然溶合一起，进一步可以与大道契合。大自然在
道之内，但不完全代表道。而道是无所不包、包括大自然。简单地说，天人合一就是：
人与道契合时，就有开放的心态，当下就在天堂。以天人合一为目的之人生，应该是优
遊自在而且心中无掛礙。而且在求与道契合的过程中，可使我们的精神昇华，並且有这
些好处是在追求天人合一时，我们就会不断地陶冶人格，在现实生活中我们的精神有所
寄托，可以有艺术性的人生。
庄子内篇中有许多寓言与故事都很有意义，其中也有很多展显出天人合一的境界，举例
如下：
(1)在庄子内篇的逍遥遊篇的第一章有一段开宗明义的寓言：“鯤魚化为大鹏鸟后，一
飞冲天，飞到九万里的高空，準備顺着海风從北极飞到南极，南极就是天堂的所在地。
” 在此寓言中，当鲲魚化为大鹏鳥时，一定要先下決心立大志，再经过长期的修炼才
行，这就是比寓：在达到目标前的修炼工夫。在九万里的高空中，远离人间的是非对錯
和物慾，甚至可以视而不见、聼而不闻，悠然自在，这就是大鵬的生命的昇华。而当牠
飞向天堂时，精神有所寄托，生命也有所安頓。大鹏在九万里高空飞行，眼光远大，在
高空上的天空仍是蒼藍色吗？從高空向下看地球是什么样子呢？这也是艺术的思维。庄
子也用此则寓言展开他的流传二千年的伟大哲学，他不用宗教，不靠鬼神的恐嚇力，教
人陶冶性格，远离人间是非与物慾，使我们的精神得到寄托，使我们有艺术的心情欣赏
此大自然。
(2)在庄子的养生主篇有一则故事：庖丁(屠夫)为文惠君屠牛，文惠君在旁观看，看见
庖丁分解牛的身体时，手足並舞，有如奏古典的音乐，好像动作可以与拍子配合。文惠
君讚叹不已。庖子將刀放下后，解释说：“我以前爱好的是大道，大道的思想渐渐就昇
华到屠牛的技术裏了。三年以后就不見到整隻牛了。而现在，当我杀牛时，完全用心灵
去体会而不用眼睛去观察，也就是停用器官的作用而用心神去解剖。以薄薄的刀片穿过
骨头间之空隙，所以我十九年都未曾換新刀。” 屠牛夫聀业虽低微，但是这位屠牛夫
是一个崇道的人，所以在杀牛的时候，完全用心灵去引异他的动作，而且將这份聀业完
全艺术化了。虽然庖丁的杀牛聀业骯髒，而且为人不恥，但庖丁並没有如佛教所教诲的
放下屠刀的罪惡感，卻进一步使切割声有节奏，增加生活的艺术性。並且在十九年内，
他的屠刀仍如新刀，也显出他的聀业技术的高超。庄子教我们虽聀业是卑下血腥，但庖
丁將此工作节奏化，亦可以有艺术人生。艺术人生虽不完全等于天人合一，但在追求与
道契合的过程中，我们可以有此享受，也可以算是一种額外的红利。
(3)在庄子大宗师篇内有一段话：“真人的“与道契合的心”是和天作朋友，真人的“
不一的心”是和人作朋友。天和人不是相对立的，这就是真人。” 〖原文：其一与天
为徒，其不一与人为徒。天与人不相胜也，是之谓真人。〗很明显的，真人与大自然(
大道)是朋友，所以真人是爱护万物、是二千年前的环保人士。
在大宗师篇中，庄子描述真人就是守道的人，也是以“天人合一”为人生目标的人。因
为守道的人和天作朋友，这种人爱护大自然，所以不破坏大自然，任何創造发明都可能
会損害大自然，所以不鼓励創新，也不鼓励任何克服大自然的举动。再观察那些以人定
胜天的民族，不断的創新发明，如今日的汽车与电子工业，虽然给人类某些方便，但这
些工业卻带来许多无可弥补的空气污染与水源污染，北京的举世闻名的霧霾，长江黄河
流水变色，沿岸人民患癌病人增多，这些都是工业所带来的伤害。由此可见：天人合一
的观念就是道家的智慧所在，可以使大家长期的安居生活。
乙、＜大宗师篇摘要＞
在老庄哲学思想中，大的意思就是大道，因为老子道德经25章中有“吾不知其名，字之
曰道，强为之名曰大。” 这就是为什么在道家哲学中，大就等于道的原因。宗就是效
法，师就是老师，所以大宗师就是效法大道作为我们的老师。为了解大宗师的全部，先
將此篇所提出的三个新观念(在二千多年前，应该是新观念)摘其要点讨论于下，此篇的
重点有三：
［注：但是古人作书没有标点符号，也很少分章节，而且今日各书仿的分章节也不相同
，所以笔者在分章讨论时，特別注明各章的起点与终点。］
（一）死生如一的“气化论”
以道为师，了解没有任何私心的道，顺物的自然的而淘汰万物，因此死亡乃是自然淘汰
而已。他的目的就是要说服大众不必担心死亡，所以他在大宗师篇中，述出只在萌芽状
态的“气化论”，故有：第2章之两忘而化其道，第5章之“善吾生者、乃所以善吾死也
”，第6章之游乎天地之一气，第7章的“安排而去化、乃入于寥天一”，这四章都论及
生死和死后的归宿。此气化论使我们的生命与天地相应合，进一步也可以与天地神明相
契合，因此生与死不再对立。
（二）“向内求”的修养工夫，与“向外求”的求道求知的方法
在庄学的内篇中，仅仅在大宗师篇將得道的修养工夫巨细无遗地全盤说明，而在其他内
篇中，只是透露出一部分而已，認清这点，就会觉得大宗师篇所透露的资料是非常可貴
。笔者在此將第4章中庄子所提出的工夫分为向内求与向外求两部分，但两者仍要交互
运用，再加上第8章的以大道为师的模仿心态与第9章的坐忘功夫，也许更快速有效。对
此修养功夫有兴趣的读者可以參阅我的博文【庄学的啓示】中的“进入庄子的不生不死
境界的修养工夫”。［注：庄子在第4、8、与9章中將修炼到真人的秘诀都集中在这三
章中。］
（三）达到“天人合一”的境界
有气化论的概念后，我们就可以抛弃对死亡的恐惧感。随着庄子所引導的向内与向外的
修养工夫，再加上他所谓的坐忘，我们再一定可以迈向天人合一之道。因此庄子更在大
宗师篇中之第1、8、和7章中透露了常人修养到真人地步时，在日常生活就可以达到逍
遥的境界有：
(1)在第1章中有：“其一也一，其不一也一。其一与天为徒，其不一与人为徒。” 故
真人可以一方面与天地精神往来，一方面又可以与世人共处于此花花世界中。所以真人
的境界就是可以与天作朋友。而庒子的真人是一般人经过修炼可以达到的，真人不悦生
不怕死，不过分求功名利祿、所以睡眠安稳，依当地的礼节风俗行事、所以与人无爭，
而这些都是常人可以作到的。先立志成为真人，再以大道的我们的導师，同时有适当的
读书求道的方法，再加上坐忘的工夫，就可以步入“天人合一”的真人境界。
(2)在第8章中有：“吾师乎！吾师乎！……覆載天地刻雕众形而不为巧。” 故我们可
以去体验与去欣赏大道在自然界的巧工傑作，也就是可以去欣赏名山美景，也可以有艺
术的眼光去欣赏任何小山小溪，因为我们所喜欢的是生命中的纯真朴实的本质。真人看
这个世界是无处不美，因为真人的心中本来就存有真善与美。不仅如此，在此章中，庄
子要我们效法天的泽爱万物，所以我们不要暴殄天物或不要浪费自然资源。並且要学习
宇宙的广大与长久使我们的眼光远大而包容人间百态。如此一来，我们就更加会体恤万
物与欣賞自然的本性。
(3)在第7章中，庄子以孟孫才为故事的主角，孟孫才达到不愁自己的生或死，而且达到
完全忘记自己的地步。因为他
a、不知所以生，不知所以死，
b、也不在乎死后的气化或者不气化，
c、即使身体死亡而其实精神不死，
d、所以母亲死时，人哭亦哭、如此而且，没有特别悲伤。
e、他人都認为我的肉身就是我，他人那裏知道这个肉身其实不是真的我啊！
f、孟孫才了解人生如梦与梦如人生的道理：譬如你有时梦作鳥在空中飞翔，梦作魚在
水中游泳，而不知今天你与我的谈话是在醒着呢？还是作梦呢？
g、因为他达到忘我的境地，所以内心舒适而来不及笑，自然的笑容也来不及安排。
所以他是安心順從自然的安排而忘去任何变化，他的心境就在人间天堂了。〖原文：安
排而去化，乃入于寥天一。〗在逍遥遊篇中，庄子並沒有举“至人无己”而达到逍遥境
地的实例，孟孫才应该符合这个条件吧！
总之，庄子在大宗师篇所提出的修养自己到达真人的境界，就会有欣赏大自然美之艺术
人生境界，而有些人也会有完全忘我的至人无己的境界，比起在逍遥遊篇中高不可攀的
聖人无名与神人无功的境界，实在简单与容易作到。由此可见：透过庄子的天人合一哲
学，我们的个体生命也可以在此现实的世界中得到寄托或安頓。

w*e2010-05-14 07:05

4 楼

有没有什么宝典推荐阅读？
我要做的实验，希望能conjugate a few ug protein to beads (dynabeads, etc)。
要求是用量越少越好（protein贵啊～），在此前提下beads coverage越高越好，
有什么product可以推荐？conjugation完成后如何定量？lab里用nanoorange，据说
效果很一般。
最后，lab用NHS-EDC link primary amine，有什么alternative吗？我指link蛋白
上其他位点。
非常感谢！

r*k2010-05-14 07:05

5 楼

they talked about a link of the Aug VB document from USCIS that was valid
while u were sleeping.

C*e2010-05-14 07:05

6 楼

要问有没有别的位点，自己去Pierce网站上看就行了
Pierce有一个免费的crosslinking handbook（当然是基于它家的产品）
可以pdf下载
也能要他们给你寄free copy
除了连接在哪个位点上要考虑以外
还要考虑考虑链长（spacer length），过长或者过短都有可能影响后续实验（蛋白功
能）

【在 w******e 的大作中提到】

: 有没有什么宝典推荐阅读？
: 我要做的实验，希望能conjugate a few ug protein to beads (dynabeads, etc)。
: 要求是用量越少越好（protein贵啊～），在此前提下beads coverage越高越好，
: 有什么product可以推荐？conjugation完成后如何定量？lab里用nanoorange，据说
: 效果很一般。
: 最后，lab用NHS-EDC link primary amine，有什么alternative吗？我指link蛋白
: 上其他位点。
: 非常感谢！

n*s2010-05-14 07:05

7 楼

You just got up?

w*e2010-05-14 07:05

8 楼

thx a lot for the information!

要问有没有别的位点，自己去Pierce网站上看就行了
Pierce有一个免费的crosslinking handbook（当然是基于它家的产品）
可以pdf下载
也能要他们给你寄free copy
除了连接在哪个位点上要考虑以外
还要考虑考虑链长（spacer length），过长或者过短都有可能影响后续实验（蛋白功
能）

【在 C*******e 的大作中提到】

: 要问有没有别的位点，自己去Pierce网站上看就行了
: Pierce有一个免费的crosslinking handbook（当然是基于它家的产品）
: 可以pdf下载
: 也能要他们给你寄free copy
: 除了连接在哪个位点上要考虑以外
: 还要考虑考虑链长（spacer length），过长或者过短都有可能影响后续实验（蛋白功
: 能）