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用于dot blot 的抗体，可以用在western blot 上么？

用于dot blot 的抗体，可以用在western blot 上么？# Biology - 生物学

f*i2010-10-28 07:10

1 楼

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2. 没有Overdraft Charge
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r*e2010-10-28 07:10

2 楼

可以在建设银行的随便一个储蓄所买美元么?
另外,建行往boa汇美元是免手续费的吗? 还是boa这边免wire的接受费?
多谢指点.

c*y2010-10-28 07:10

3 楼

1-2岁小孩穿着可以下水的鞋，除了crocs以外，还有哪些牌子质量不错而且也不贵的,而且样子也不错的？
谢谢

c*n2010-10-28 07:10

4 楼

我看有效期是一年，那能不能呆半年回去，然后不签证，买张机票再过来，然后再呆半
年呢（如果第二次的I94还是给的半年时间？这样就不用申请延期了。

F*n2010-10-28 07:10

5 楼

【以下文字转载自 Immigration 讨论区】
发信人: FeiDian (非典), 信区: Immigration
标题: H4递交以后可以回国吗？
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 15 16:27:44 2014, 美东)
人不在美国，移民局还能批准吗？

a*g2010-10-28 07:10

6 楼

净慧：柏林寺禅七开示（二）
http://www.hrzh.org/culture/p/2009-6-11/3831.shtml
本文为净慧长老于1993年11月3～9日在赵县柏林禅寺禅七开示的全文，由明海整理成文。
第一天、学佛的三大纲目
去年本寺举行了第一次禅七法会，今年又到举行禅七的时候了。我们在座的不少人参加
过去年的禅七，回想一下当时的情景，好象这两次法会中间没有时间上的距离，似乎这
两次法会就是接在举行的。也可以这样说：不但这两次禅七法会，还有其它法会，没有
任何时间的距离，即使同佛在灵山会上说法的那种情景、那种因缘，也没有时间的距离
。所以，我们说一次法会的殊胜因缘，往往用“灵山一会，俨然未散”来形容。我想今
天诸上善人聚会一处，在这里共同修学，确实是一个了不起的大事因缘。
这一次禅七法会的人数比去年增加了一倍以上，有一百二十多位居士来参加；地理覆盖
面也比去年广，最远有从新疆来的，南边有上海、杭州来的。大家不远千里来到这里参
加共修，这种为道的心、求法的心，使我本人和常住大众都非常感动。只是作为一个主
七的

g*e2010-10-28 07:10

7 楼

如题
谢谢!

W*n2010-10-28 07:10

8 楼

请问各位大侠，
我想买一个抗体用，结果只查到一个抗体，用途说明中说可以用在dot blot 和 ELISA
及免疫组化中。只是没有说western blot中可用. 我没有做过dot blot. 请问这个可以
用在dot blot的抗体，一般情况下可否用在我的western blot上？浓度一般需要做如何
调整？
谢谢！

A*n2010-10-28 07:10

9 楼

Speedo Water shoes， Target卖water toys的地方有

,而且样子也不错的？

【在 c***y 的大作中提到】

: 1-2岁小孩穿着可以下水的鞋，除了crocs以外，还有哪些牌子质量不错而且也不贵的,而且样子也不错的？
: 谢谢

S*I2010-10-28 07:10

10 楼

possible, but if the gap between the two visits are too short, could have
trouble.

【在 c***n 的大作中提到】

: 我看有效期是一年，那能不能呆半年回去，然后不签证，买张机票再过来，然后再呆半
: 年呢（如果第二次的I94还是给的半年时间？这样就不用申请延期了。

p*y2010-10-28 07:10

11 楼

戒定慧三学，持戒是根本，是保证，修定是基础，证慧是究竟。这三者的次第，我们通
常是按持戒、修定、证慧的顺序排列的，所谓“由戒生定，由定发慧”。当修行到一定
程度，这种顺序又可以倒过来，由于有智慧，有抉择力，你修定就会事半功倍；有了甚
深禅定，那你持戒就能够不持而持，自自然然，毫不勉强，每时每刻，一言一行都在戒
律中，但又不觉得有戒律的约束了。
喜欢这一段，谢谢分享！我回国了希望也能参加这样的禅七。
阿弥陀佛！

n*y2010-10-28 07:10

12 楼

越狱装iScheduler

s*y2010-10-28 07:10

13 楼

yes, in most case you can use it. I would suggest you to test it first.
In principle, the concentration used for Immunohistology need to be diluted
for 10~100x for WB application.
I suggest you to load good negative control and positive control lanes in
your test run to confirm this ab works for your application.

ELISA

【在 W*********n 的大作中提到】

: 请问各位大侠，
: 我想买一个抗体用，结果只查到一个抗体，用途说明中说可以用在dot blot 和 ELISA
: 及免疫组化中。只是没有说western blot中可用. 我没有做过dot blot. 请问这个可以
: 用在dot blot的抗体，一般情况下可否用在我的western blot上？浓度一般需要做如何
: 调整？
: 谢谢！

g*e2010-10-28 07:10

14 楼

Thanks. I'll try

W*n2010-10-28 07:10

15 楼

谢谢艳阳天！以前经常得到您的指点！
还有两点不明白：
1）一个对于某个肽段的抗体做出来之后，为何有的可以用在点杂交，免疫组化或者
western上，有的不写可以在某方面应用呢？我觉得抗体（多抗）都是一种方式产出
来的，为何用途会不同？
2）关于一个检测磷酸化蛋白的抗体，我想检测的蛋白（另一个物种的）和抗体制备所
用的蛋白（人的）肽段，在磷酸化位点左右各4个（一共9个氨基酸）完全相同，再往两
侧就有些区别了。请问这种情况下，以磷酸化位点为中心的13个氨基酸的肽段，和磷酸
化位点为中心的30个氨基酸的肽段产生的多抗，用起来效果一样么？我觉得产生出来的
抗体应该只纯化出磷酸化位点相应的抗体，否则其它位点的抗体，应该也能够识别非
磷酸化蛋白，这是磷酸化蛋白抗体所不允许的。请您指点迷津。
谢谢！

diluted

【在 s******y 的大作中提到】

: yes, in most case you can use it. I would suggest you to test it first.
: In principle, the concentration used for Immunohistology need to be diluted
: for 10~100x for WB application.
: I suggest you to load good negative control and positive control lanes in
: your test run to confirm this ab works for your application.
:
: ELISA

s*y2010-10-28 07:10

16 楼

这个解释起来比较麻烦。
简单的讲吧，因为抗体在体内产生的时候，是识别一个经过免疫细胞处理过的
变性后的短肽，这个短肽和实际上的蛋白可能会有差别。所以有的抗体能够
识别作为抗原的短肽但不一定能够识别真正的蛋白，特别是在做免疫荧光的时候，很多
时候蛋白被formaldehyde固定后构象更接近于native protein 而不是变性的
短肽。
另外，有些时候有些抗体不适用于某些场合可能是因为在那个场合该抗体的非特异背景
太强。
这个是不能保证的。虽然一般而言大部分抗体的识别序列小于10个氨基酸，但是也会有
可能有些抗体可能会需要更多的氨基酸才能识别。
另外，有些抗体的识别只需要很少的氨基酸就可以了。比方说，有些抗体甚至可以
识别一个被磷酸化的tyrosine.
所以说抗体这种东西，是要试一试才能知道怎么回事的。根据理论做出的推测只
能作为推测，不能作为结论。

【在 W*********n 的大作中提到】

: 谢谢艳阳天！以前经常得到您的指点！
: 还有两点不明白：
: 1）一个对于某个肽段的抗体做出来之后，为何有的可以用在点杂交，免疫组化或者
: western上，有的不写可以在某方面应用呢？我觉得抗体（多抗）都是一种方式产出
: 来的，为何用途会不同？
: 2）关于一个检测磷酸化蛋白的抗体，我想检测的蛋白（另一个物种的）和抗体制备所
: 用的蛋白（人的）肽段，在磷酸化位点左右各4个（一共9个氨基酸）完全相同，再往两
: 侧就有些区别了。请问这种情况下，以磷酸化位点为中心的13个氨基酸的肽段，和磷酸
: 化位点为中心的30个氨基酸的肽段产生的多抗，用起来效果一样么？我觉得产生出来的
: 抗体应该只纯化出磷酸化位点相应的抗体，否则其它位点的抗体，应该也能够识别非