求推荐BAC purification kit# Biology - 生物学m*92010-12-02 08:121 楼fresh phd, engineering, 刚拿到一个offer,大家能不能给我指导一下多少basesalary比较合适啊,我用来去和HR argue。还有一个人的话消费一个月大概在多少啊?没有去过CA的说。
w*g2010-12-02 08:122 楼刚才联系机票代理给父母买票,结果发现票价差200块钱,明显是两种价格区间,贵的那家说什么也降不到最便宜的,声称,那些便宜的票是高返点的,即使出票之后也有可能被取消的。但我联系便宜票的代理,他们说,他们出票是直接从国航出,不会有这种情况,除非航班取消。我之所以犹豫是因为之前在贵的那家买过票,当时又便宜服务又好,所以还想用她。但是否现在机票还有这种所谓高返点(高风险?)的情况,大家可以交流一下。谢谢!
T*72010-12-02 08:124 楼比如zookeeper, 比如vert.xrequest.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text").end();这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.
j*j2010-12-02 08:126 楼90K-110K. 看专业&水平了。消费人&人差别太大,不好说。【在 m********9 的大作中提到】: fresh phd, engineering, 刚拿到一个offer,大家能不能给我指导一下多少base: salary比较合适啊,我用来去和HR argue。还有一个人的话消费一个月大概在多少啊?: 没有去过CA的说。
a*n2010-12-02 08:127 楼你去travel问问吧,那里对机票懂的牛人多的那【在 w*****g 的大作中提到】: 刚才联系机票代理给父母买票,结果发现票价差200块钱,明显是两种价格区间,贵的那: 家说什么也降不到最便宜的,声称,那些便宜的票是高返点的,即使出票之后也有可能: 被取消的。但我联系便宜票的代理,他们说,他们出票是直接从国航出,不会有这种情: 况,除非航班取消。: 我之所以犹豫是因为之前在贵的那家买过票,当时又便宜服务又好,所以还想用她。但: 是否现在机票还有这种所谓高返点(高风险?)的情况,大家可以交流一下。谢谢!
z*e2010-12-02 08:129 楼request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text").end();写成这样就好了如果你想看log的话用aop,直接设置pointcut = abc.com.ClassName.*这样每次调用method/func的时候都会被拦截,然后你在log中就会看到类似method name = responsemethod name = putHeader, parameter0 = Content-Type:String...method name = write, parameter0 = "some text":Stringmethod name = end酱紫,看你自己怎么设置log了
b*y2010-12-02 08:1211 楼how much did you get?【在 m********9 的大作中提到】: fresh phd, engineering, 刚拿到一个offer,大家能不能给我指导一下多少base: salary比较合适啊,我用来去和HR argue。还有一个人的话消费一个月大概在多少啊?: 没有去过CA的说。
c*e2010-12-02 08:1213 楼response一般传json就可以了,client side拿到json之后把它写出来。text"【在 T******7 的大作中提到】: 比如zookeeper, 比如vert.x: request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text": ).end();: 这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.
t*z2010-12-02 08:1214 楼咳,别提了,我半天没抽出多少东西来,试验过QIAGEN Large-Construct Kit,QIAGENPlasmid Mini,Invitrogen PureLink HiPure Kit。产量低且不稳定,关键是要做好心理准备,细菌要好好养,动作要轻,水要热。最后我们直接把含有BAC的细菌株送到转基因公司去了。他们说可以免费代替我们纯化。
d*e2010-12-02 08:1216 楼这就是要上Scala的节奏text"【在 T******7 的大作中提到】: 比如zookeeper, 比如vert.x: request.response().putHeader("Content-Type", "text/plain").write("some text": ).end();: 这种玩意debug起来是悲剧阿。还有exception怎么catch.
b*g2010-12-02 08:1217 楼Clotech Nucleobond 100http://www.clontech.com/products/detail.asp?tabno=2&product_id=186802
p*p2010-12-02 08:1222 楼please google these 3 words: bac qiagen midi. First hit.I've used the protocol for many Bac clones, routinely get more than 100ug/50ml culture.【在 V**F 的大作中提到】: 大家有没有好用的抽BAC的kit?: 多谢!
b*g2010-12-02 08:1224 楼Clotech Nucleobond 100http://www.clontech.com/products/detail.asp?tabno=2&product_id=186802
S*s2010-12-02 08:1226 楼何必用 Kit,直接 CsCl 纯化吧。产率高很多,而且样品也很纯。我用 Clontech 的kit 纯化出来的 BAC,如果再 setup CsCl 的话还能看到有很多杂质和 linear DNA。【在 V**F 的大作中提到】: 大家有没有好用的抽BAC的kit?: 多谢!
j*g2010-12-02 08:1228 楼看你的目的了。如果只是为了做PCR的template,那么很简单,Qiagen kit里的p1, p2,p3buffer加后直接加isopropanol沉淀,再用ethanol洗两次就可以了。保证不会丢。这个方法可以在CHORI的网站上找到。我们实验室一般用来打老鼠,这就需要CsCl纯化。虽然步骤挺多,但是做熟了也很简单。而且质量会好很多。
m*h2010-12-02 08:1238 楼唔,唔,我今天打电话,妈妈告诉我,我们那的机场检查还挺严的,nnd,我妈没带电脑,没带皮包,没带照相机,没带iphone,没带化妆品,还问这问那,嫌我妈的行李箱塞的满,又没超重,跟海关有毛关系,我听了都想骂人!还问,带那么多东西干吗,wtf!
z*y2010-12-02 08:1241 楼抽查,以前也就查查香港澳门回去的,现在美国回去的查得也严了【在 m****h 的大作中提到】: 唔,唔,我今天打电话,妈妈告诉我,我们那的机场检查还挺严的,nnd,我妈没带电: 脑,没带皮包,没带照相机,没带iphone,没带化妆品,还问这问那,嫌我妈的行李箱: 塞的满,又没超重,跟海关有毛关系,我听了都想骂人!: 还问,带那么多东西干吗,wtf!
m*h2010-12-02 08:1243 楼我妈说跟抢似的,那帮安检的操蛋,包里都是衣服,鞋,没有电子产品和奢侈品,还问东问西,md,要是我在,我能呛死他们!【在 z*******y 的大作中提到】: 抽查,以前也就查查香港澳门回去的,现在美国回去的查得也严了