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请教：evans blue小鼠脑组织BBB实验的问题

请教：evans blue小鼠脑组织BBB实验的问题# Biology - 生物学

S*22011-01-27 08:01

1 楼

由于不可避免的原因（实验室搬迁），有可能不得不申请FULL TIME CPT，除非老板找
到办法留钱在原来学校
ISSO说Full Time CPT>12 month，OPT自动作废，但如果老板在一年内找到办法重新开
始从原来学校付我工资，对OPT会有什么影响？实际使用掉的CPT的时间会从将来的OPT
中扣除么？
ISSO前台接电话的说：“会！”
我想在跟ISSO specialist约时间之前先来这里请教一下，谢谢！

s*x2011-01-27 08:01

2 楼

有个公司找上门的，是做RoR
担心legal问题。。。

C*12011-01-27 08:01

3 楼

用evans blue做小鼠brain blood barrier实验，tail vein注射完evans blue以后1小
时，
左心室灌注PBS，然后取脑组织，匀浆后测定。
试了几次都没有结果，有几个问题请教：
1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆，然后离心，取上清测定。
脑组织先在PBS里面匀浆，然后离心；取上清液500ul，加入50%TCA 500ul，
incubate at 4
度 O/N，次日离心，取上清液测定。
哪一种方法好？
2. 测定的时候，我们试了波长610，615，620，感觉结果都很低。
3. 改用fluorencens测定，用ethanol稀释3倍，比较原液测定，浓度反倒高了。标准曲
线是用
evans blue + TCA +ethanol配置后进行等比例稀释做的吗？
请做过的各位版友帮助，谢谢
再次祝福新年快乐

k*92011-01-27 08:01

4 楼

if your Full Time CPT<12 month, it won't hurt anything.

OPT

【在 S****2 的大作中提到】

: 由于不可避免的原因（实验室搬迁），有可能不得不申请FULL TIME CPT，除非老板找
: 到办法留钱在原来学校
: ISSO说Full Time CPT>12 month，OPT自动作废，但如果老板在一年内找到办法重新开
: 始从原来学校付我工资，对OPT会有什么影响？实际使用掉的CPT的时间会从将来的OPT
: 中扣除么？
: ISSO前台接电话的说：“会！”
: 我想在跟ISSO specialist约时间之前先来这里请教一下，谢谢！

b*i2011-01-27 08:01

5 楼

找个中国公司中转一下？

【在 s********x 的大作中提到】

: 有个公司找上门的，是做RoR
: 担心legal问题。。。

w*i2011-01-27 08:01

6 楼

你好，我对你的BBB的研究挺感兴趣，目前我做一些结核性脑膜炎与血脑通透性的研究
，我想如果可以的话，能互相介绍下自己的情况吧，希望能够产生一些合作。
Email:1*******[email protected]

S*22011-01-27 08:01

7 楼

多谢多谢！可能ISSO的小二业务不熟吧
不过将错就错告诉了老板，希望他尽量避免让我CPT

【在 k*******9 的大作中提到】

: if your Full Time CPT<12 month, it won't hurt anything.
:
: OPT

C*12011-01-27 08:01

8 楼

any suggestion?

d*g2011-01-27 08:01

9 楼

请教lz什么条件可以申请CPT?

V*N2011-01-27 08:01

10 楼

1, 你只说了一种方法，为什么问哪一种方法好？我们不是在4度过夜的，我们是在高温
度下过夜的。

S*22011-01-27 08:01

11 楼

老板搬到另一个university，我还是registered as full-time student at the
previous university
ISSO解释说：关键是你的奖学金从哪里来，如果从原来学校来，就不用麻烦CPT，如果
从新学校来，就算off-campus working，要用CPT

i*s2011-01-27 08:01

12 楼

我没看懂你要测什么

【在 C****1 的大作中提到】

: 用evans blue做小鼠brain blood barrier实验，tail vein注射完evans blue以后1小
: 时，
: 左心室灌注PBS，然后取脑组织，匀浆后测定。
: 试了几次都没有结果，有几个问题请教：
: 1. 取的脑组织直接放入50% TCA溶液进行匀浆，然后离心，取上清测定。
: 脑组织先在PBS里面匀浆，然后离心；取上清液500ul，加入50%TCA 500ul，
: incubate at 4
: 度 O/N，次日离心，取上清液测定。
: 哪一种方法好？
: 2. 测定的时候，我们试了波长610，615，620，感觉结果都很低。

c*a2011-01-27 08:01

13 楼

EB效果不好，会结合血清蛋白。用620波长测，具体参考以下文章：
Blood–brain barrier changes and cell invasion differ between therapeutic
immune clearance of neurotrophic virus and CNS autoimmunity