d*e
2 楼
最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
r*y
3 楼
Take it easy. It is still not late.
s*s
4 楼
前面那些我不知道，不过蛋白修饰啥的改变表观分子量很正常
60KDa
【在 d*******e 的大作中提到】
: 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa
: 左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
: 的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
: 又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
: 怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
60KDa
【在 d*******e 的大作中提到】
: 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa
: 左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
: 的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
: 又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
: 怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
b*u
5 楼
多谢鼓励~~~慢慢等了...
k*0
6 楼
糖链修饰或超强输水，都引起表观分子量异常。
非变性胶，不是用来测分子量的。
检查抗体特异性如何或是否目标蛋白质发生降解或切除信号肽，等等。
非变性胶，不是用来测分子量的。
检查抗体特异性如何或是否目标蛋白质发生降解或切除信号肽，等等。
n*w
7 楼
您的结果只有1条带吗？
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