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讨论一个关于reactive oxygen species的assay
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讨论一个关于reactive oxygen species的assay# Biology - 生物学
w*t
1
昨天爹妈成都签B2顺利签过,具体情况不清楚。
要定机票了,有个问题请教:入关的时候如果给6个月的停留时间,这6个月是指的180
天吧?不是真正的6个月?
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B*M
2
佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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m*d
4
想定量tumor cell里的Reactive oxygen species (ROS)
从invitrogen买的6-carboxy-DCF, 为了确保这个chemical的确能够检测到ROS,首先用
H2O2做了satndard curve:不加DCF,tumor cell有微弱的auto-fluorescence;加DCF的
样品,mean fluorescence intensity(MFI)与H2O2 concentration(0,10,50,100
,500,1000 micro-molar)成线性关系;H2O2 concentration为0的时候,tumor cell
也有较高的endogenous ROS level。整个过程中,对于同一个cell line, FACS的
instrument setting和gating都是一致的。通过这个实验,我觉得比较有把握这个DCF
应该是work了。
然后我给tumor cell不同的treatment和stress,24-72hr,然后用DCF检测细胞内的ROS
水平,之前觉得这些treatment和stress应该upregulate ROS level,但检测到的MFI近
似平直。
所以想跟版上做过这个assay的前辈们讨论讨论,是否这就是conclusive negative
data了,还是我犯了什么技术性错误?
谢谢
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a*a
5
cong
一般是真正的6个月
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b*d
6
握手。我也是这么觉得的。 轮回不存在,佛法就没什么大用。
最多就是个心理治疗手段。

【在 B*M 的大作中提到】
: 佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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s*e
8
检测到没变就是没变,会变高只是个一厢情愿的想法。想变高还是很不容易的,升高30
% DNA就会坏掉了。
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m*n
9
180天, 这个版上的惨剧够多的了

180

【在 w*****t 的大作中提到】
: 昨天爹妈成都签B2顺利签过,具体情况不清楚。
: 要定机票了,有个问题请教:入关的时候如果给6个月的停留时间,这6个月是指的180
: 天吧?不是真正的6个月?

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o*b
10

但没有佛法, 你又如何证明轮回存不存在呢?

【在 B*M 的大作中提到】
: 佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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h*o
11
Get a positive control
Treat your cells with Oligomycin or Antimycin
These mitochondrial inhibitors should dramatically increase ROS generation.
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x*a
12
最好不要算得那么准确,最好提前几天
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B*M
13
该怎样证明一个不存在的东西不存在呢?

【在 o****b 的大作中提到】
:
: 但没有佛法, 你又如何证明轮回存不存在呢?

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m*d
14
Can I use the H2O2 as my positive control?

.

【在 h*******o 的大作中提到】
: Get a positive control
: Treat your cells with Oligomycin or Antimycin
: These mitochondrial inhibitors should dramatically increase ROS generation.

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K*5
15
恭喜啊!请问你父母遇上哪位签证官?

180

【在 w*****t 的大作中提到】
: 昨天爹妈成都签B2顺利签过,具体情况不清楚。
: 要定机票了,有个问题请教:入关的时候如果给6个月的停留时间,这6个月是指的180
: 天吧?不是真正的6个月?

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B*M
16
[email protected]#@#$$^^&**)(*)*)*)HFHDSSR
上面的字符串代表一样东西,请证明此东西不存在

【在 B*M 的大作中提到】
: 该怎样证明一个不存在的东西不存在呢?
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h*o
17
I don't recommend H2O2, as the reagent itself also elicits DCF fluorescent
signal. Then it will be too hard to distinguish between ROS generated by the cells and ROS attributed to H2O2.
Also, you might want to consider MtSOX for your assay.

【在 m**********d 的大作中提到】
: Can I use the H2O2 as my positive control?
:
: .

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w*t
18
不知道,我还没打电话问清楚,主要是忙着看机票去了。
估计是比较水的那几位了。不过我父母7年前来过,呆了两个月就回去了。这个应该是
比较好的状况吧。另外我也没怎么仔细准备签证,连模拟练习都没做,准备到签不到一
个星期的时间。放轻松吧,这种事不是我们说了算。
预约电话很难打通,我打了两天连个自动回复都没听到,只听到嘟嘟的声音,最后让国
内拨打那个400的电话才打通约上。周3去就约到周5,挺快的。

【在 K********5 的大作中提到】
: 恭喜啊!请问你父母遇上哪位签证官?
:
: 180

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o*b
19
这个麻烦, 连存在的东西有时候都不容易证明, 别说不存在的了.

【在 B*M 的大作中提到】
: 该怎样证明一个不存在的东西不存在呢?
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m*d
20
That's a very good suggestion, thanks! But I still have a minor question
about this DCF chemical:
According to the manual, it is permeable through cellular membranes until it
is cleaved of the ester group and becomes trapped in the cell, where it is
hydrolyzed by cellular ROS. Considering that it only reacts with
intracellular ROS, plus I wash thoroughly after DCF loading to get rid of
extracellular hydrolyzed DCF, if there's any, then H2O2 seems to be a good
positive control.
Looking forward to hear about your opinions


the cells and ROS attributed to H2O2.

【在 h*******o 的大作中提到】
: I don't recommend H2O2, as the reagent itself also elicits DCF fluorescent
: signal. Then it will be too hard to distinguish between ROS generated by the cells and ROS attributed to H2O2.
: Also, you might want to consider MtSOX for your assay.

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E*e
21
以前来过美国是关键。

【在 w*****t 的大作中提到】
: 不知道,我还没打电话问清楚,主要是忙着看机票去了。
: 估计是比较水的那几位了。不过我父母7年前来过,呆了两个月就回去了。这个应该是
: 比较好的状况吧。另外我也没怎么仔细准备签证,连模拟练习都没做,准备到签不到一
: 个星期的时间。放轻松吧,这种事不是我们说了算。
: 预约电话很难打通,我打了两天连个自动回复都没听到,只听到嘟嘟的声音,最后让国
: 内拨打那个400的电话才打通约上。周3去就约到周5,挺快的。

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B*M
22
[email protected]#@#$$^^&**)(*)*)*)HFHDSSR
上面的字符串代表一样东西,请证明此东西不存在

【在 o****b 的大作中提到】
: 这个麻烦, 连存在的东西有时候都不容易证明, 别说不存在的了.
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h*o
23
H2O2 is also cellular membrane permeable.
Unless you treated cells with H2O2, washed it off and waited for sufficient
amount of time, it is possible that exogenous H2O2 will interfere with your
assay.
I

it
is

【在 m**********d 的大作中提到】
: That's a very good suggestion, thanks! But I still have a minor question
: about this DCF chemical:
: According to the manual, it is permeable through cellular membranes until it
: is cleaved of the ester group and becomes trapped in the cell, where it is
: hydrolyzed by cellular ROS. Considering that it only reacts with
: intracellular ROS, plus I wash thoroughly after DCF loading to get rid of
: extracellular hydrolyzed DCF, if there's any, then H2O2 seems to be a good
: positive control.
: Looking forward to hear about your opinions
:

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f*n
24
gxgx!

180

【在 w*****t 的大作中提到】
: 昨天爹妈成都签B2顺利签过,具体情况不清楚。
: 要定机票了,有个问题请教:入关的时候如果给6个月的停留时间,这6个月是指的180
: 天吧?不是真正的6个月?

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B*M
25
[email protected]#@#$$^^&**)(*)*)*)HFHDSSR
和那个人说的轮回由本质的不同吗?
不过是妄想出来的东西罢了,

【在 B*M 的大作中提到】
: [email protected]#@#$$^^&**)(*)*)*)HFHDSSR
: 上面的字符串代表一样东西,请证明此东西不存在

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l*a
26
物质不灭和轮回说得到一起么?
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B*M
27
那是两码事,
一个真,一个假
一个有事实根据,一个纯属幻想,

【在 l*****a 的大作中提到】
: 物质不灭和轮回说得到一起么?
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l*a
28
就是说,有什么不同?

【在 B*M 的大作中提到】
: 那是两码事,
: 一个真,一个假
: 一个有事实根据,一个纯属幻想,

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d*e
29
轮回怎么可能不存在?
如果轮回不存在,就不能解释很多现象,
比如,人为什么生来就不一样,
我不相信造物主会特意地造出不同的DNA.
前世的印记是解释今世的作为的最好的理由.
包括和你有特别关系的人.你自己特别的兴趣
和记忆,有些根本不是后天的教育得来的.
如果你认为一切都是环境和教育,那就未免
太机诫论了.
如果你相信这个世界的一切都是出自一个偶然的
随机,而是无规律性的,那该多么的遗憾.
人的出生这种现象为什么只能是一次呢?
如果有一次的出生,那么就应该有多次的出生,
这是复合逻辑的.

【在 B*M 的大作中提到】
: 佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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B*M
30
减数分裂,生殖细胞结合这些您老懂不?

【在 d******e 的大作中提到】
: 轮回怎么可能不存在?
: 如果轮回不存在,就不能解释很多现象,
: 比如,人为什么生来就不一样,
: 我不相信造物主会特意地造出不同的DNA.
: 前世的印记是解释今世的作为的最好的理由.
: 包括和你有特别关系的人.你自己特别的兴趣
: 和记忆,有些根本不是后天的教育得来的.
: 如果你认为一切都是环境和教育,那就未免
: 太机诫论了.
: 如果你相信这个世界的一切都是出自一个偶然的

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d*e
31
这就是随机论了.
这个解释不够令人满意.

【在 B*M 的大作中提到】
: 减数分裂,生殖细胞结合这些您老懂不?
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B*M
32
随机论主要是什么主张?
减数分裂这些都是观察到的客观现实啊,这个您老不信,去信轮回?

【在 d******e 的大作中提到】
: 这就是随机论了.
: 这个解释不够令人满意.

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d*e
33
因为减数分裂不足以解释这个复杂的世界.
你太低估造物主的智商了吧.

【在 B*M 的大作中提到】
: 随机论主要是什么主张?
: 减数分裂这些都是观察到的客观现实啊,这个您老不信,去信轮回?

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w*r
34
既然我们的肉体
是通过基因重组在进化延续中,
我猜想也不排除我们的生命意识的总体通过轮回
在重租延续更新发展中。
人类社会的确在从蒙昧走向文明,
你看奴隶社会, 对奴隶是多么残暴呀。
那人类整体在humanity上的进步,会不会和我们“识”
的积累和更新有关呢?

【在 B*M 的大作中提到】
: 减数分裂,生殖细胞结合这些您老懂不?
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B*M
35
知识,信念,理想的积累传承和轮回无关,

【在 w*********r 的大作中提到】
: 既然我们的肉体
: 是通过基因重组在进化延续中,
: 我猜想也不排除我们的生命意识的总体通过轮回
: 在重租延续更新发展中。
: 人类社会的确在从蒙昧走向文明,
: 你看奴隶社会, 对奴隶是多么残暴呀。
: 那人类整体在humanity上的进步,会不会和我们“识”
: 的积累和更新有关呢?

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B*M
36
没有造物主,也没有造物主的智商,

【在 d******e 的大作中提到】
: 因为减数分裂不足以解释这个复杂的世界.
: 你太低估造物主的智商了吧.

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d*e
37
我这是用的习惯表达.
我坚信轮回,也坚信业力论.
因为这个理论完美和逻辑,而且公平.

【在 B*M 的大作中提到】
: 没有造物主,也没有造物主的智商,
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S*U
38
Mozart, Newton, Einstein 的孩子为什么不遗传父亲的天才?

【在 B*M 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承和轮回无关,
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w*r
39
知识,信念,理想的积累传承
当然有通过书藉等别的方式流传下来。
但STILL,我觉得你也不能轻易否定
我们生命的“识” 以种子的方式传下去的可能呀。
至少physically基因就是这样传承下去的。
比如男性的hunter本能,现在体现在两性恋爱上,
但是据说这种本能可以trace到原始社会男性作为hunter的角色,
那这种本能,到底是因为基因的方式传下来的,
还是”识“?

【在 B*M 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承和轮回无关,
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d*e
40
Mozart, Newton,都没孩子吧.
不过,问得好.

【在 S**U 的大作中提到】
: Mozart, Newton, Einstein 的孩子为什么不遗传父亲的天才?
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B*M
41
世间有因果,但无轮回,
世间有公平正义,但不是总能实现,

【在 d******e 的大作中提到】
: 我这是用的习惯表达.
: 我坚信轮回,也坚信业力论.
: 因为这个理论完美和逻辑,而且公平.

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r*n
42

你眼中的事实根据罢了。
而你也本就是梦中一角色。

【在 B*M 的大作中提到】
: 那是两码事,
: 一个真,一个假
: 一个有事实根据,一个纯属幻想,

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B*M
43
这个不奇怪,
一定要Mozart, Newton, Einstein 的孩子遗传了父亲的天才,才能令你信服没有轮回?

【在 S**U 的大作中提到】
: Mozart, Newton, Einstein 的孩子为什么不遗传父亲的天才?
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B*M
44
我不在梦中

【在 r****n 的大作中提到】
:
: 你眼中的事实根据罢了。
: 而你也本就是梦中一角色。

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B*M
45
本能是基因的表达,
hunter的本能在三叶虫就有了,已经根植于我们的基因深处,

【在 w*********r 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承
: 当然有通过书藉等别的方式流传下来。
: 但STILL,我觉得你也不能轻易否定
: 我们生命的“识” 以种子的方式传下去的可能呀。
: 至少physically基因就是这样传承下去的。
: 比如男性的hunter本能,现在体现在两性恋爱上,
: 但是据说这种本能可以trace到原始社会男性作为hunter的角色,
: 那这种本能,到底是因为基因的方式传下来的,
: 还是”识“?

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r*n
46

哈哈哈。。。
你晚上不知做没做过梦,在梦中知道自己在梦中吗?

【在 B*M 的大作中提到】
: 我不在梦中
avatar
r*n
47
应该是二者都有。整个轮回的系统,是个很复杂很精妙的系统。

【在 w*********r 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承
: 当然有通过书藉等别的方式流传下来。
: 但STILL,我觉得你也不能轻易否定
: 我们生命的“识” 以种子的方式传下去的可能呀。
: 至少physically基因就是这样传承下去的。
: 比如男性的hunter本能,现在体现在两性恋爱上,
: 但是据说这种本能可以trace到原始社会男性作为hunter的角色,
: 那这种本能,到底是因为基因的方式传下来的,
: 还是”识“?

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f*l
48
如果轮回不存在,一堆人是否就不能淡定了?....--
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B*M
49
我老试图理解你说的识的概念,
识这东西不能说完全不存在,
但是识本身和轮回矛盾,

【在 w*********r 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承
: 当然有通过书藉等别的方式流传下来。
: 但STILL,我觉得你也不能轻易否定
: 我们生命的“识” 以种子的方式传下去的可能呀。
: 至少physically基因就是这样传承下去的。
: 比如男性的hunter本能,现在体现在两性恋爱上,
: 但是据说这种本能可以trace到原始社会男性作为hunter的角色,
: 那这种本能,到底是因为基因的方式传下来的,
: 还是”识“?

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B*M
50
六道轮回的划分就体现出这妄想的粗陋,还精妙哪!

【在 r****n 的大作中提到】
: 应该是二者都有。整个轮回的系统,是个很复杂很精妙的系统。
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B*M
51
阿赖耶识是可数的吗?
我们能不能说一个阿赖耶识,两个阿赖耶识?

【在 w*********r 的大作中提到】
: 知识,信念,理想的积累传承
: 当然有通过书藉等别的方式流传下来。
: 但STILL,我觉得你也不能轻易否定
: 我们生命的“识” 以种子的方式传下去的可能呀。
: 至少physically基因就是这样传承下去的。
: 比如男性的hunter本能,现在体现在两性恋爱上,
: 但是据说这种本能可以trace到原始社会男性作为hunter的角色,
: 那这种本能,到底是因为基因的方式传下来的,
: 还是”识“?

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w*g
52
轮回不存在是指唯物的断灭,还是说有唯心的灵魂存在?佛法为假,是说所有的都不对
,还是某一部分不对?

【在 B*M 的大作中提到】
: 佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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w*d
53
你这只是咱们所在的小世界中所能产生的观点
实际上佛祖所在的无数大千世界的轮回是一起的
也就是说你也许今世脱生在本世界人界
下世就脱生在另一个大千世界的某世界的天界之类的
各个世界进化速度不同, 也许基本物理原则也不同
从目前人类的能力是无法理解的
当然, 你可以说我所说的是不可知论

【在 w*********r 的大作中提到】
: 既然我们的肉体
: 是通过基因重组在进化延续中,
: 我猜想也不排除我们的生命意识的总体通过轮回
: 在重租延续更新发展中。
: 人类社会的确在从蒙昧走向文明,
: 你看奴隶社会, 对奴隶是多么残暴呀。
: 那人类整体在humanity上的进步,会不会和我们“识”
: 的积累和更新有关呢?

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J*s
55
莫扎特不出生在那样的家庭,也基本没有可能成为天才音乐儿童的。
Amadeus 这个电影不错的说。
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r*d
56
舍利弗问天:‘汝久如当得阿耨多罗三藐三菩提?’天曰:‘如舍利弗还为凡夫,我乃
当成阿耨多罗三藐三菩提。’舍利弗言:‘我作凡夫,无有是处。’天曰:‘我得阿耨
多罗三藐三菩提,亦无是处。所以者何?菩提无住处,是故无有得者。’舍利弗言:‘
今诸佛得阿耨多罗三藐三菩提,已得当得,如恒河沙,皆谓何乎?’天曰:‘皆以世俗
文字数故,说有三世,非谓菩提有去来今。’天曰:‘舍利弗!汝得阿罗汉道耶?’曰
:‘无所得故而得。’天曰:‘诸佛菩萨,亦复如是,无所得故而得。’

【在 B*M 的大作中提到】
: 佛法的一个根本目标就是脱离轮回
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B*M
57
这个我老看不懂,
麻烦大侠给翻译下,白话汉语,英文都成,
梳理注解一下,转成正规文言文也好,
谢谢,

【在 r*****d 的大作中提到】
: 舍利弗问天:‘汝久如当得阿耨多罗三藐三菩提?’天曰:‘如舍利弗还为凡夫,我乃
: 当成阿耨多罗三藐三菩提。’舍利弗言:‘我作凡夫,无有是处。’天曰:‘我得阿耨
: 多罗三藐三菩提,亦无是处。所以者何?菩提无住处,是故无有得者。’舍利弗言:‘
: 今诸佛得阿耨多罗三藐三菩提,已得当得,如恒河沙,皆谓何乎?’天曰:‘皆以世俗
: 文字数故,说有三世,非谓菩提有去来今。’天曰:‘舍利弗!汝得阿罗汉道耶?’曰
: :‘无所得故而得。’天曰:‘诸佛菩萨,亦复如是,无所得故而得。’

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h*u
58
没看懂。舍利弗问天,这里天是一个人的名字吗?还是就是天?

【在 r*****d 的大作中提到】
: 舍利弗问天:‘汝久如当得阿耨多罗三藐三菩提?’天曰:‘如舍利弗还为凡夫,我乃
: 当成阿耨多罗三藐三菩提。’舍利弗言:‘我作凡夫,无有是处。’天曰:‘我得阿耨
: 多罗三藐三菩提,亦无是处。所以者何?菩提无住处,是故无有得者。’舍利弗言:‘
: 今诸佛得阿耨多罗三藐三菩提,已得当得,如恒河沙,皆谓何乎?’天曰:‘皆以世俗
: 文字数故,说有三世,非谓菩提有去来今。’天曰:‘舍利弗!汝得阿罗汉道耶?’曰
: :‘无所得故而得。’天曰:‘诸佛菩萨,亦复如是,无所得故而得。’

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d*l
59
人的能力很有限,如果就因为看不到就说没有,岂不太???
何不暂留疑问,按佛说的方法去做,人心清净了,恢复一些本能了,自然看到另外一个
世界。
avatar
S*U
60
这是天女散花中的天女与舍利弗问答。

【在 h***u 的大作中提到】
: 没看懂。舍利弗问天,这里天是一个人的名字吗?还是就是天?
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