GST-fusion protein,
bind完后用elution buffer洗出来了,然后pool,然后dialyze back to PBS (pH 7.3)
,dialyze完我测了下pH是7.56,然后加thrombin,切了一会儿就出现precipitation了
,根据我上次的经验,precipitates里面90%是我需要的蛋白。
现在一个问题是,为啥会有析出?我加完thrombin切的过程中测了一下pH,起码1个小
时的时候pH没有什么变化。。
所以想,是不是因为切了以后蛋白结构变了,疏水性增加?
这个116kD的fusion protein里有18个cysteine,结合之前有人发的帖子,我在想,是
不是这个原因?
谢谢。